miR-21靶向PDCD4对舌鳞癌细胞上皮间质转化及侵袭能力的影响

目的:探究微小RNA-21(microRNA-21,miR-21)靶向程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD4)对舌鳞癌细胞(tonguel squamous cell carcinoma,TSCC)上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及侵袭能力的影响。方法:qRT-PCR实验检测人口腔上皮细胞(human oral epithelial cell,HOEC)与舌鳞癌细胞系CAL-27中miR-21和PDCD4的表达水平。将miR-21 inhibitor阴性对照(NC inhibitor)、miR-21抑制剂(miR-21 inhibitor)转染至CAL-27细胞中,qRT-PCR实验检测miR-21的表达水平;采用CCK-8实验检测细胞增殖情况;采用划痕实验和Transwell迁移实验检测细胞迁移能力;采用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力;采用免疫印迹法(Western blot)和qRT-PCR实验评估PDCD4、EMT标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)及基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)在蛋白和mRNA水平的表达情况。双荧光素酶报告基因实验验证miR-21与PDCD4的靶向关系。结果:CAL-27细胞中miR-21的表达明显高于HOEC细胞(P<0.001),而PDCD4表达低于HOEC细胞(P<0.001)。与对照组相比,抑制miR-21后miR-21的表达水平明显降低(P<0.001),并能显著抑制细胞的增殖、迁移、侵袭能力(P<0.05);抑制miR-21能上调CAL-27细胞中PDCD4(P<0.05)和E-cadherin(P<0.05)的表达,而下调N-cadherin(P<0.05)、Vimentin(P<0.01)、MMP-2(P<0.01)、MMP-9(P<0.01)蛋白和mRNA水平。双荧光素酶报告基因实验证明miR-21与PDCD4的靶向关系。结论:抑制舌鳞癌细胞中miR-21的表达能抑制其增殖、侵袭和上皮间充质转化,这可能与靶向激活和促进PDCD4的表达有关。

干细胞因子促进共培养DPSCs与HUVECs的成血管能力

目的探讨干细胞因子(stem cell factor,SCF)对共培养的牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)和人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)成血管能力的影响。方法本实验研究已通过单位伦理委员会审查批准。实验分为HUVECs组、SCF+HUVECs组、DPSCs+HUVECs组、SCF+DPSCs+HUVECs组。将SCF与培养液混合,制备成SCF浓度为100 ng/mL的混合培养液,按1∶5的比例将DPSCs和HUVECs在体外进行共培养。通过CCK-8增殖实验观察每组细胞在第1、3、5、7天的增殖能力,细胞划痕实验和Transwell迁移实验分别检测SCF对直接或间接共培养条件下细胞迁移的影响,采用基质胶管形成实验检测各组细胞血管生成能力,通过ELISA检测每组细胞培养上清液中血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)的浓度,Western blot检测CD31、CD34和VEGFA的蛋白表达水平。结果细胞划痕实验和Transwell迁移实验结果表明SCF显著促进了DPSCs和HUVECs共培养组细胞的迁移(P<0.05);体外基质胶管形成实验显示,SCF+DPSCs+HUVECs组中管状结构的分支数目和分支总长度显著高于其他组(P<0.05),并且该组中成血管相关蛋白CD31、CD34和VEGFA的表达水平较高(P<0.01)。结论SCF能够增强共培养DPSCs和HUVECs的迁移能力和体外成血管能力。

钻孔抽采有效半径影响因素分析

本文根据煤层瓦斯流动理论,依据抽采达标相关法规,推导出穿层钻孔和顺层钻孔抽采有效半径的计算方程;结合现场实践计算国投新集二矿1煤层抽采有效半径,并与现场实测抽采有效半径相比较。采用单因素分析方法分析抽采有效半径的影响因素,得出抽采有效半径的影响因素对抽采有效半径的影响规律。

新集一矿采空区自然发火的综合防治技术

通过释放示踪气体,确定采空区漏风分布规律,并根据实际情况,采取有针对性的采空区灭火措施,取得良好效果。

新集一矿采掘工作面动力现象特征及原因分析

新集一矿地质条件复杂,煤层松软破碎,在6-1煤层210601、210603两工作面回采期间,共发生了8次异常瓦斯动力现象,给矿井安全生产带来了隐患。依据动力现象特征及其发生的原因,得出其动力现象类型为压出型,为指导矿井6-1煤安全开采提供了依据。

利用高位抽放技术治理综采工作面瓦斯的实践

通过高位钻孔瓦斯抽放技术在新集二矿E1808工作面的应用,找出了在地质条件较为复杂的工作面中,高位钻孔的合理层位及最佳钻场间距。

深部开采动力灾害综合防治技术研究

该文通过分析口孜东矿111303工作面动力灾害情况,针对高地应力低瓦斯工作面提出采用"采前瓦斯预抽达标、注水降低煤层冲击倾向性有效"的复合区域措施,证明了"预抽瓦斯+深孔注水"是防治煤岩瓦斯动力灾害最有效的方法。对矿井深部开采动力灾害(主要包括煤与瓦斯突出、冲击地压)治理有参考作用。

综放工作面采空区“三带”划分的计算机模拟

通过建立采空区滤流场数学模型,并以实例用计算机模拟采空区的流场分布,应用极限风速法对采空区“三带”划分进行了研究,用C语言绘图程序绘制了三带分布图,对影响采空区“三带”中氧化带宽度的因素进行了分析。

大数据背景下企业财务管理的智能化发展探究

信息时代下,各行业的生产经营模式都发生了天翻地覆的变化,随着信息技术在行业中的渗透越来越深,产业结构转型已经成为大趋势。当前市场环境十分复杂,行业间的竞争日渐激烈。企业必须重视信息技术在财务管理中的应用,通过实现财务管理的智能化和现代化,来促进企业运转效率的提升,从而提高自身的竞争力,在市场中占据一席之地。基于此,本文分析了当前财务管理工作智能化的现状,同时针对大数据时代的特点,提出优化建议,以期为有关人士提供参考。

姜黄素对骨髓间充质干细胞成骨分化能力的影响

目的探究姜黄素(curcumin)促进小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的适宜浓度及是否通过BMP-2/RUNX-2信号通路发挥作用。方法将BMSCs分为对照组和姜黄素组,通过CCK-8实验筛选对BMSCs无细胞毒性的姜黄素浓度(0.1~10μmol/L),根据结果选择0.1~5μmol/L姜黄素在成骨分化条件培养BMSCs 7 d和21 d,分别采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和茜素红染色检测BMSCs成骨分化水平与矿化能力;根据以上结果,选择浓度为0.1μmol/L姜黄素进行后续实验。0.1μmol/L姜黄素在成骨分化条件下培养BMSCs 7 d,分别采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)实验和免疫印迹法(Western blot)评价成骨标志物骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)和Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX-2)的mRNA和蛋白的表达情况。使用BMP-2抑制剂Noggin预处理BMSCs,姜黄素继续培养7 d,Western blot检测BMP-2和RUNX-2的蛋白表达水平。结果CCK-8实验结果表明,与对照组相比,10μmol/L姜黄素组在48 h和72 h明显抑制BMSCs增殖(P<0.05),其余各浓度组(0.1~5μmol/L)对细胞增殖无显著影响(P>0.05)。ALP染色和茜素红染色结果显示,0.1μmol/L姜黄素组BMSCs的ALP活性及矿化结节的形成均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。qRT-PCR实验结果表明,与对照组比较,姜黄素组BMSCs的BMP-2和RUNX-2的mRNA表达均上调(P<0.05)。Western blot实验表明,姜黄素组BMSCs的BMP-2和RUNX-2的表达均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);Noggin处理24 h后发现,Noggin组BMSCs的BMP-2和RUNX-2的表达相较于对照组下降(P<0.05),而姜黄素组BMP-2和RUNX-2表达显著高于Noggin组和Noggin+姜黄素组(P<0.05)。结论0.1μmol/L姜黄素可能为诱导BMSCs成骨分化的适宜浓度,且BMP-2/RUNX-2信号通路可能参与其中。

人脐静脉内皮细胞来源外泌体对人牙髓干细胞生物学行为的影响

目的评估人脐静脉内皮细胞来源的外泌体(human umbilical vein endothelial cells-derived exosomes,HUVECs-exo)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)生物学行为的影响。方法通过超高速离心法提取HUVECs-exo,分别用0、5、10、20μg/mL的HUVECs-exo处理hDPSCs,通过CCK-8实验、Transwell实验和划痕实验检测细胞的增殖和迁移能力;通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色、茜素红染色和Western blot研究HUVECs-exo对hDPSCs成骨/成牙分化的影响。结果CCK-8实验结果显示HUVECs-exo对hDPSCs的增殖无显著影响,Transwell和划痕实验结果显示5、10μg/mL的HUVECs-exo显著地促进了hDPSCs的迁移(P<0.05),ALP染色和茜素红染色结果显示其对hDPSCs的矿化无显著促进作用,Western blot结果显示HUVECs-exo未上调Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达水平。结论HUVECs-exo对hDPSCs的增殖和成骨/成牙分化无显著影响,但能显著促进hDPSCs的迁移。