微针载药系统在局部器官组织疾病治疗中的研究进展

近年来,微针由于其微尺寸(500~1000μm长度)和高表面积,可以通过皮肤无痛和有效地给药而引起了人们的广泛关注。除了基于微针的经皮给药取得巨大成功外,越来越多的研究表明微针的应用已经扩展到各种器官的应用,包括脱发、眼部疾病和口腔黏膜治疗的递送。本文讨论了目前脱发、眼部疾病、口腔疾病及心血管疾病的治疗,并概述了微针载药系统在这四种非皮肤器官组织疾病中应用的最新进展。同时强调了未来微针载药系统的发展趋势和挑战。

搭载雷帕霉素纳米晶的透明质酸微针贴片的制备及性质初步探究

目的可降解载药微针可以持续、安全、无痛地实现局部药物缓释,而微针载药系统用于心血管领域可最大程度发挥药物的局部抗凝,抑制内膜增生,减小药物全身给药带来的毒副作用。为此本文制备了一款搭载雷帕霉素纳米晶的透明质酸(hyaluronic acid,HA)微针贴片,并对该贴片进行初步理化性质评价、体外模拟释药性能评估以及刺入大隐静脉性能的分析评价。方法首先以150万分子量的透明质酸为基材掺杂的雷帕霉素水相纳米晶混悬液(rapamycin nanoparticles,RAP-NPs)形成药物均匀分散的水凝胶;然后通过聚二甲基硅氧烷微针模板(polydimethylsiloxane,PDMS)制备可溶于水的雷帕霉素水相纳米晶混悬液的透明质酸微针贴片(hyaluronic acid-rapamycin-microneedle,HA-RAP-MN);最后对这种载药微针进行初步理化性质评价和体外模拟释药性能分析评价。结果RAP-NPs水相混悬液可与HA水凝胶形成混匀的混合物,使药物能够均匀分散在微针中并持续释放药物,解决了难溶性药物分子无法在HA水凝胶中均匀分散的技术瓶颈。药物模拟释放实验表明雷帕霉素可在8h内释放70%以上,达到缓释效果。免疫荧光结果表明雷帕霉素均匀分布于静脉中膜及内膜。结论可溶于水的雷帕霉素水相纳米晶混悬液的透明质酸微针贴片在局部降低冠状动脉旁路移植术后内膜增生方面具有可预期的应用潜力。

人用H5N1禽流感疫苗免疫动物效果观察

目的将用禽流感毒种R1203株按3种生产工艺生产的疫苗进行动物接种,观察疫苗的免疫效果。方法用不同剂量的3种工艺生产的禽流感疫苗,分别免疫大鼠和家兔,肌肉接种2针(隔14 d),首针后14和28 d静脉采血,测定接种1针和2针后,动物血清中血凝抑制抗体和中和抗体的产生情况。结果大鼠的抗体反应较家兔敏感;大鼠和家兔在疫苗接种1针后14 d,都能产生血抑抗体,滴度可达1∶40,但中和抗体滴度都很低,几乎测不到;接种2针后,血抑抗体或中和抗体反应都显著高于第1针;裂解-2苗接种大鼠和家兔后的抗体反应普遍高于另2种疫苗,且家兔量-效反应明显。结论裂解-2疫苗优于其他2种;中和抗体能正确反应疫苗的质量;H5N1禽流感疫苗的效力试验可用于免疫家兔测定中和抗体和临床前研究的动物试验,用15μg血凝素(HA)接种家兔2针,血清中和抗体滴度达1:40或以上。

人用H5N1禽流感裂解疫苗的制备工艺

目的设计3种工艺,制备不同裂解程度的禽流感疫苗,并观察其免疫效果。方法用禽流感毒种R1203株制备3种禽流感疫苗(全病毒、裂解-1和裂解-2),并分别以不同剂量免疫大鼠和家兔,肌肉接种2针(间隔14d),初免后14d和28d静脉采血,检测动物血清中血凝抑制抗体和中和抗体。结果两种动物在疫苗接种1针后14d,血抑抗体和中和抗体滴度均较低;接种2针后14d,均显著高于1针;裂解-2疫苗接种两种动物后的抗体反应均高于其他两种疫苗,且家兔的中和抗体量-效反应明显。结论裂解-2疫苗的工艺优于其他两种疫苗,其中和抗体能正确反映疫苗的质量。

人用H5N1禽流感疫苗检定评价

目的选用H5N1禽流感毒种(R1194和R1203),按设计的生产工艺,制成的疫苗进行全面检定,选取其中较好毒株生产的疫苗,用于以后人用禽流感疫苗临床前研究的动物免疫。方法利用从国外引进2株H5N1禽流感病毒,设计生产3种疫苗(全病毒、裂解-1、裂解-2)的纯化工艺,优化纯化条件,全面检定制成的疫苗,比较2毒种生产疫苗的质量。结果2毒株在接种滴度104EID50/ml(半数鸡胚感染剂量/ml),培养温度34.5℃,培养时间3 d的条件下,病毒增殖滴度较高;检定结果证明,制成的所有疫苗中反映质量的内毒素、卵清蛋白、总蛋白、总蛋白与血凝素之比这4项指标,明显优于国家标准;3种工艺疫苗的电镜形态完全不同;经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),全病毒疫苗和裂解-2疫苗的蛋白条带形态相似,但裂解-1疫苗在32 KD左右的条带缺失;毒种R1203株疫苗的产量明显高于R1194株。结论设计的3种生产疫苗的纯化工艺,均可生产出高质量的疫苗;毒种R1203株的疫苗产量高于毒种R1194株;可用R1203毒株,按3种不同工艺生产的疫苗接种动物,观察免疫效果。

人用H5N1禽流感疫苗毒种检定及毒种库建立

目的为了研制人用H5N1禽流感疫苗,按照《中国药典》三部“生物制品生产和检定用菌毒种管理规程”中的要求,建立用于生产禽流感疫苗的毒种库。方法从国外引进2株H5N1禽流感疫苗的毒种(R1194和R1203),进行全面检定,建立三级种子库,即原代、主代和工作代,用于疫苗生产。结果引进的R1194和R12032个毒株能在胚蛋中大量增殖并稳定传代;与普通流感A1,A3,B作交叉血凝抑制试验和交叉单向免疫扩散试验表明,符合H5N1禽流感病毒的特征;经对血凝素序列测定,证实了引进的2毒株为H5N1禽流感病毒;测得的序列与原始株序列比较可知,2毒株均已去除有毒基因,属弱毒株;确定2毒株的P2为原代,P4为主代,P5为工作代。结论引进的R1194和R1203毒种为H5N1禽流感减毒株,可用于禽流感疫苗的生产。

冠状动脉旁路移植术后围术期心肌梗死发生机制及预测的研究进展

冠状动脉旁路移植术(coronary artery bypass grafting,CABG)是治疗冠状动脉左主干和3支病变的有效手段,实现完全冠状动脉血运重建是手术的优势和关键所在[1]。而围术期心肌梗死(perioperative myocardial infraction,PMI)不仅增加了围术期死亡风险和并发症的发生,同时也增加了中远期不良心脑血管事件和桥血管再狭窄的发生[2-3]。尽管CABG手术方式日趋成熟和标准化,但PMI的发生率高达5%~30%[4],对于日益增多的弥漫性冠状动脉病变患者,PMI的发病率及病死率更高[5],且患者中远期预后也不理想[6]。因此,有效降低PMI的发生重在预防。本文对近年来关于CABG术后围术期心肌梗死的发生机制及预测手段作简要综述。

H5N1人用禽流感疫苗免疫原性检测方法的建立

目的确定人用禽流感疫苗免疫原性检测方法。方法用禽流感病毒R1203株制备疫苗,以不同剂量免疫家兔,检测血清中的血凝抑制抗体和中和抗体,并进行交叉血凝抑制试验、交叉单向免疫扩散试验和交叉中和试验。结果R1203株疫苗接种家兔1针后14 d,中和抗体和血抑抗体滴度均较低;第2针后14 d均明显升高。血抑抗体量-效反应不明显,而中和抗体量-效反应明显。交叉血凝抑制试验显示,异型之间普遍有交叉反应,滴度大部分不低于1∶40。单向免疫扩散试验显示异型之间无交叉反应。禽流感疫苗抗血清不能中和人流感病毒,但能中和同型病毒(R1194),滴度可达1∶240。结论中和抗体能正确反映疫苗的免疫原性;检测中和抗体的方法可用于禽流感疫苗的效力试验。

论化工企业安全管理工作现状和创新

伴随我国化工产品以及生产规模的日益发展及扩大,在化工企业之中产生安全问题的概率也随之提升,所以对于化工企业而言务必要重视开展安全管理工作。但以当前情况来看,在开展此项工作的过程中所存在的问题还不在少数,而针对此情况,就务必要重视大力创新安全管理工作,从而保障化工企业安全管理的效果。基于此,本文以化工企业安全管理工作现状分析为出发点,而后探讨了化工企业安全管理工作的创新策略。

乙肝酶标增速剂和稳定剂的研制和应用

本文报道乙肝酶标检测中增速剂和稳定剂的研制结果。采用一定浓度化学物质(P_a和S_c)的适当配比制成增速剂稀释被检标本和酶结合物,并建立快速酶标检测法,可使试验中两次免疫学反应在60分钟内(每次30分钟)完成。比同温度下的常规法(每次1.5小时)缩短2/3时间。用快速法检测定值标本和病人血清中的乙肝标志物与常规法比较,无统计学差异,故本增速剂在乙肝酶标诊断中是可以应用的。 用一定浓度牛血清白蛋白和某些稳定酶的化学物质,配制成4种稳定剂,通过对酶结合物的保存观察,选出了稳定剂B较为理想。用该稳定剂保存酶结合物14个月(最长观察期),其活性下降仅为6.1％。

原代沙鼠肾细胞流行性出血热双价疫苗临床观察与免疫学效果研究

目的对新近研制成功的沙鼠肾原代细胞培养的流行性出血热双价疫苗（汉滩型＋汉城型）进行Ⅱ期临床扩大观察，考核其对人体的安全性和中和抗体反应。方法将观察人群设在不同地区，分别选择中国南方和北方两个点，每个点接种５００人的双价疫苗，同时接种２５０人的商品化单价疫苗（汉滩型）作对照，观察接种对象的副反应程度和采集其血清样品测定荧光抗体和以蚀斑减少中和法测定中和抗体，考核疫苗效果。结果观察结果显示，在观察的２８０人中分别有７人呈现轻度局部副反应和３７．５℃以下低热的全身反应，总反应率分别为２．５％。ＩＦＡ抗体阳转率１００％，ＧＭＴ１∶６７。中和抗体阳转率汉滩型为８７．６％，汉城型为９６．３％（ｎ＝８１）。如果以同一份血清中任何单一血清型阳转来计算，阳转率为１００％。以同一份血清两个血清型均需阳转来计算，则阳转率为７５．３％（６１／８１）。结论经过Ⅱ期临床人体观察结果显示，该双价疫苗仅有轻度局部反应和良好的中和抗体应答。证明该疫苗对人体安全。

汉坦病毒Z10株全基因序列的测定及分析

目的 测定我国肾综合征出血热疫苗株Z10的全基因序列 ,了解其分子结构特征 ,并分析Z10与其他汉坦病毒株的遗传学差异 ,为疫苗生产提供依据。方法 从Z10病毒感染的细胞提取总RNA ,将逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)扩增的产物纯化后克隆于T载体并进行序列测定 ,应用DNAS TAR软件分析比较。结果 序列测定表明 ,Z10株L ,M ,S片段的全基因序列分别由 6 5 5 3,36 15 ,170 1个核苷酸组成 ,单一读码框架分别编码 2 15 1,1135 ,42 9个氨基酸。基因比较分析表明 ,Z10株与HTN型外其他汉坦病毒同源性较低 ,与HTN型病毒接近 ,但与HTN型病毒核苷酸序列的同源性亦仅为 83 6 %～ 87 4% ,而其氨基酸序列的同源性高达 94 2 %～ 96 % ,据此绘出了三个片段的核苷酸和氨基酸的种系发生树。结论 测定了Z10株的全基因组序列 ,首次发现Z10株为已报道的HTN型中的另一亚型。

左心室射血分数对冠状动脉内膜剥脱术后心肌梗死发生的预测价值

目的探讨左心室射血分数对弥漫性冠状动脉病变(DCAD)患者行冠状动脉内膜剥脱术(CE)后发生早期心肌梗死的预测价值及左心室射血分数的影响因素。方法本研究为前瞻性、观察性研究。选取2018年5月—2020年12月于首都医科大学附属北京安贞医院行CE+冠状动脉旁路移植术(CABG)的DCAD患者。术前收集患者的年龄、性别等临床资料,超声心动图检测患者的左心室射血分数。根据患者是否发生术后心肌梗死(PMI)分为PMI组和无PMI组。采用线性回归模型、logistic回归模型和受试者工作特征(ROC)曲线分析左心室射血分数与PMI发生的相关性及左心室射血分数的影响因素。结果最终纳入120例行CE+CABG的DCAD患者。PMI组32例(27%),年龄(62±8)岁,男性27例(84%),其中24例(75%)为下壁PMI。无PMI组88例(73%),年龄(62±8)岁,男性70例(80%)。PMI组术前左心室射血分数低于无PMI组[55%(49%,64%)比62%(55%,67%),P=0.01],围术期肌钙蛋白I、主动脉球囊反搏泵使用率、住院时间高于无PMI组。调整年龄、性别和体重指数后,多因素logistic回归分析显示左心室射血分数与PMI存在负相关性(OR=0.93,95%CI:0.89~0.98,P=0.01);ROC曲线分析结果显示左心室射血分数<60%是预测PMI发生的界值(AUC=0.67,敏感度为64%,特异度为69%,P=0.01);线性回归分析显示左心室舒张末期内径(OR=0.52,95%CI:-1.13~-0.60,P<0.001)、术中前降支桥血管流量(OR=-0.20,95%CI:-0.15~-0.01,P=0.02)、糖尿病史(OR=-0.28,95%CI:-8.25~-1.85,P=0.002)与术前左心室射血分数负相关。结论左心室射血分数是DCAD患者CE术后发生PMI的独立预测因素,与左心室舒张末期内径和糖尿病密切相关,并影响术中前降支桥血管流量。

术前左心房内径预测冠状动脉旁路移植术后新发房颤的价值

目的探讨术前左心房内径预测冠状动脉旁路移植术(CABG)术后新发房颤(POAF)的价值,分析术前左心房内径的相关影响因素。方法前瞻性纳入2020年1月~2020年12月期间在首都医科大学附属北京安贞医院拟行CABG治疗冠心病的患者113例。术前均行冠状动脉造影、超声心动图和实验室检查。根据入选及排除标准,最终纳入90例CABG患者,其中男71例,女19例;年龄42~75岁,平均(62±8)岁。统计术中旁路移植血管数和右冠状动脉血运重建情况,术后通过心电监测和心电图检查确诊3天内POAF发生。根据术后是否发生POAF分为POAF组和无POAF组比较两组术前基线资料、实验室检查和围手术期并发症等指标。结果全组无死亡,POAF 25例(27.8%)。POAF组患者的术前左心房内径[40(36,43)mm对35(33,37)mm,P=0.00]、术前高密度脂蛋白[1.08(0.89,1.25)mmol/L对0.95(0.83,1.08)mmol/L,P=0.03]、围手术期肌钙蛋白I[4.76(0.87,13.60)ng/ml对1.48(0.56,4.52)ng/ml,P=0.04]明显高于无POAF组,差异有统计学意义。POAF组患者CABG术后发生卒中[4(16%)对0(0),P=0.01]、住ICU时间[67(24,96)h对22(19,41)h,P=0.00]和住院时间[21(19,24)天对16(14,24)天,P=0.05]明显多于无POAF组,差异有统计学意义。两组围手术期全因病死率、心肌梗死发生率和肺部感染差异无统计学意义(P>0.05)。单因素、多因素二元logistic回归分析结果均显示,左心房内径与POAF发生显著相关(P<0.001)。ROC曲线分析结果显示,术前左心房内径≥40 mm是预测POAF发生的界值(AUC=0.82,敏感度52%,特异100%,P<0.001)。线性回归分析结果显示,术前左心房内径与术前超敏C反应蛋白显著正相关(B=0.24,95%CI:0.00~0.26,P=0.043)。结论CABG后POAF患者的脑血管并发症发生比例明显增加。术前左心房内径还与POAF发生显著相关,可有效预测POAF,左心房内径≥40 mm是预测POAF发生的界值。系统性炎症反应还与术前左心房内径密切相关。

高敏C反应蛋白预测非体外循环下冠状动脉旁路移植术临床结局

目的探讨非体外循环冠状动脉旁路移植(OPCABG)术患者术前高敏C反应蛋白(Hs-CRP)水平与术后住院期间临床结局的关系。方法前瞻性纳入2019年1月至2019年10月123例在北京安贞医院择期接受OPCABG治疗的患者,收集术前和术后相关数据。以Hs-CRP水平2 mg/L为临界值,将患者分为Hs-CRP正常组(78例)和Hs-CRP升高组(45例)。比较两组患者数据,对存在差异的术后数据行回归分析,探究其独立影响因素。结果Hs-CRP升高组白细胞计数明显高于Hs-CRP正常组[(6.5±1.6)×10^(9)/ml对(7.4±2.1)×10^(9)/ml,t=-2.839,P=0.005];Hs-CRP升高组术后房颤患者占比(38%对19%,χ^(2)=5.100,P=0.024)、住院时间[(21.2±7.1)天对(16.0±4.6)天,t=-4.469,P=0.000]、住院费用[(14.31±3.07)万元对(12.37±2.18)万元,t=-4.090,P=0.000]明显高于Hs-CRP正常组。吸烟(OR=1.660,95%CI:1.186~1.993,P=0.031)和Hs-CRP水平(OR=1.170,95%CI:1.050~1.294,P=0.007)是术后发生房颤的独立危险因素。Hs-CRP水平(B=0.436,95%CI:0.197~0.675,P=0.000)和左心室射血分数(B=-0.180,95%CI:-0.289~-0.071,P=0.001)是住院时间的独立影响因素。高血压(B=-11.256,95%CI:-20.670~-1.842,P=0.020)、Hs-CRP水平(B=1.235,95%CI:0.217~2.254,P=0.018)和左心室射血分数(B=-1.168,95%CI:-1.634~-0.702,P=0.000)是住院费用的独立影响因素。结论OPCABG术前Hs-CRP水平是术后新发房颤、住院时间和住院费用的独立影响因素,这为Hs-CRP联合其他指标准确预测OPCABG预后、筛选高危患者提供了理论依据。

克拉丽斯·李斯佩克朵小说选

爱心安娜有些累了,买的东西把那个新的针织网兜撑得变了形。她上了电车,把网兜挂在脖子上,电车开始行驶。她身子向后倚了倚,让自己坐得舒适一点。她惬意地叹了口气。孩子们都挺好,让安娜心里很踏实,充满甜蜜感。他们在长大,已经可以自己洗澡。他们还有些行为不当需要调教,越来越多地占用着她的时间。