基于UPLC-QE-HF-MS/MS技术分析红凉伞化学成分及入血成分

目的 分析红凉伞提取物化学成分及入血成分,初步阐明其可能的药效物质基础。方法 采用配对比较法将12只大鼠随机分为空白组和红凉伞给药组,每组6只。每天上、下午各给药1次,连续3 d;第4天再次给药后,取血后制备血清样品。采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱技术对红凉伞提取物和血清样品中化学成分进行分析鉴定。使用Compound Discoverer 3.0软件进行保留时间矫正、峰识别、峰提取等工作,根据二级质谱信息,利用Thermo mzCloud在线数据库、Thermo mzVault本地数据库,并参照有关文献和对照品质谱信息,初步鉴定红凉伞化学成分及入血成分。结果 从红凉伞提取物中共鉴定出34个化合物,主要为香豆素类、黄酮类、有机酸类、氨基酸类等成分,包括岩白菜素、槲皮素、没食子酸、L-焦谷氨酸等化合物;从血清样本中共鉴定出5个入血成分,分别为L-焦谷氨酸、丁香酸、岩白菜素、朱砂根皂苷A、麦考酚酸。结论 本研究初步推测L-焦谷氨酸、丁香酸、岩白菜素、朱砂根皂苷A、麦考酚酸是红凉伞的药效物质基础。

基于UPLC-Q-TOF MS的吴茱萸致肝毒性部位及入血成分分析

利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF MS)法分析鉴定吴茱萸肝毒性部位的化学成分和给大鼠灌胃毒性部位后的血中原形成分及代谢产物。在优化的色谱和质谱条件下,采用正离子扫描模式对质量范围m/z50~1 200的化合物进行数据采集,分析时间仅为12min。通过UNIFI软件与人工相结合的方式对采集的数据进行分析,根据高分辨质谱提供的母离子与碎片离子的精确质量信息,初步推测了化合物的分子组成;结合标准品和参考文献数据,共鉴定了肝毒性部位中的29个化学成分,其中包括9个吲哚类生物碱、10个喹诺酮类生物碱、5个三萜、3个黄酮、1个其他类生物碱和1个有机酸。进一步比较了体内外样品的基峰离子色谱图,结合质谱数据和化合物裂解规律,共鉴定出21个入血成分,包括15个原形成分和6个代谢产物(1个为未知成分),并推测了代谢产物的代谢途径。该方法可为揭示吴茱萸肝毒性成分提供可靠的数据支持。

正交试验优化加味酸枣仁汤颗粒剂的提取工艺

通过优化验方加味酸枣仁汤的提取工艺,为进一步研制加味酸枣仁汤颗粒剂提供理论依据.在进行单因素实验的前提下,选取对实验结果影响较大的三个因素(加水量(A)、煎煮次数(B)、煎煮时间(C)),采用正交设计方法,以酸枣仁皂苷A、细叶远志皂苷、总皂苷的质量浓度为考察指标,综合考察多种因素对提取效果的影响,对加味酸枣仁汤提取工艺进行优化,进而筛选出研制加味酸枣仁汤颗粒剂的最佳提取工艺.筛选得到加味酸枣仁汤颗粒的最佳提取工艺为:加水量10倍,煎煮3次,每次煎煮1 h.该工艺作为研制加味酸枣仁汤颗粒剂的提取工艺简便,稳定,合理可行.

吴茱萸醇提物多次给药致大鼠肝毒性研究

为了研究吴茱萸醇提物多次给药对大鼠肝脏的毒性损害,取大鼠按不同剂量分别灌胃给予吴茱萸的50%乙醇提取物,每天1次,连续14 d.于末次给药后60 min采血,检测血清中ALT、AST的水平,计算肝脏指数,光学显微镜下观察肝组织的病理学改变.结果表明,与对照组比较,给药组大鼠肝脏系数和血清中ALT、AST的水平均明显升高,高剂量组具有极显著差异.病理学检测发现不同程度的肝细胞脂肪变性,炎性细胞浸润和小灶坏死.多次给大鼠灌胃吴茱萸醇提物可对其产生一定的肝毒性,毒性随给药剂量的增加而增大.

中药肉苁蓉的雌激素作用研究

中药肉苁蓉是著名的补益中药,且具有一定的雌激素作用.通过查阅大量文献,从植物雌激素成分组成和药理作用、中药肉苁蓉的介绍及肉苁蓉的雌激素作用三个方面对中药肉苁蓉的雌激素作用的研究进行总结分析,为后续对其发挥雌激素作用的活性成分研究奠定基础.

穿心莲生殖毒性的量效关系研究

研究穿心莲对雄性小鼠精子、酶活力及睾丸组织结构的影响,并探讨穿心莲对受试小鼠影响的量效关系.实验分为分为7组,每组25只,空白对照组(给予相应体积的蒸馏水),穿心莲内酯组(315 mg/kg),其他5组灌服穿心莲提取物,分别为穿心莲提取物A组(75.35 g/kg)、B组(34.88 g/kg)、C组(16.15 g/kg)、D组(7.48 g/kg)和E组(3.46 g/kg)经口灌胃,每天1次,给药持续11周.分别在给药的第3、5、7、9、11周剖杀受试小鼠,称量体重及睾丸和附睾重量,测定精子数量和精子畸形率,测定睾丸中乳酸脱氢酶(LDH)及碱性磷酸酶(AKP)的活性并制备睾丸病理切片.与对照组相比,受试小鼠的睾丸和附睾的相对质量均显著降低(P<0.01);小鼠精子数明显低于对照组,且在同一给药周期内,给药量越高降低程度越显著;精子畸形率高于对照组(P<0.05,P<0.01),且在同一给药周期内,给药量越高升高程度越显著;小鼠睾丸匀浆中LDH、AKP活性与对照组比较明显下降(P<0.05,P<0.01),且在同一给药周期内,降低程度与给药量成正比;受试小鼠的睾丸中曲细精管管壁变薄,管腔内成熟精子缺失;给药量越大出现损伤的程度越重.穿心莲提取物和穿心莲内酯对雄性小鼠具有生殖毒性作用,且存在一定的量-效关系.

中药雌激素活性成分研究进展

基于化学成分的传统分类方法,对中药雌激素的活性成分及其药理作用进行了总结和分析,为后续揭示中药雌激素活性成分奠定基础,为含有雌激素活性成分的中药的临床用药及防治提供参考.

基于网络毒理学和实验验证探讨山豆根致大鼠肾毒性机制

目的 基于网络毒理学和实验验证,探讨山豆根潜在肾毒性机制。方法 网络毒理学预测山豆根毒性成分作用靶点,定位肾毒相关靶基因,取两者交集靶点,导入STRING平台构建靶点互作图,MetaScape数据库进行GO、KEGG分析,BioGPS数据库筛选大鼠肾毒性关键靶基因,构建“成分-靶点-通路”网络。通过动物实验对山豆根肾毒性机制进行验证,荧光定量PCR法检测肾组织关键基因mRNA表达水平。结果 网络毒理学共筛选出山豆根苦参碱、槐定碱、高丽槐素等20种毒性成分,涉及HSP90AA1、SRC、MAPK1、MAPK3、AKT1等135个肾毒性靶点,KEGG富集得到169条相关信号通路,其毒性机制可能与癌症途径、PI3K-Akt信号通路、HIF-1信号通路、MAPK信号通路等密切相关。结合BioGPS数据库筛选出6个关键靶基因PPARA、RAF1、MAP2K1、SRC、AKT1、MAPK3;动物实验结果表明,山豆根高剂量组大鼠BUN、SCr含量显著升高(P<0.01),肾组织出现明显损伤,荧光定量PCR结果表明山豆根高剂量组均可上调PPARA、RAF1、MAP2K1、MAPK3基因mRNA表达量,下调AKT1基因mRNA表达量(P<0.05)。结论 山豆根致大鼠肾毒性机制是多成分-多靶点-多通路共同作用的结果,本研究也为后续山豆根毒理学探索提供理论基础。

基于“谱-效”相关的中药药效物质基础研究方法

中药作为我国传统医药学的重要组成部分,在我国传统的防治疾病中占有举足轻重的地位。中药主要来源于动植物、微生物及矿物,含有不同结构和性质的多种成分,其物质基础研究具有复杂性,目前尚处于初步探索研究阶段。近年来开展的中药谱效关系研究为其物质基础研究提供了思路和方法,重视将先进的科学技术与中药研究有机结合,进而为中药实现现代化提供了可能。本文通过查阅相关文献,总结了近年来有关中药谱效关系相关性研究思路和方法,对中药谱效关系研究方法进展作一综述,为其药效物质基础研究提供依据及借鉴。

中药代谢化学研究方法

随着中药现代化研究的新进展,越来越多的研究表明许多中药中的化学成分只有经代谢后才具有生物活性.因此,对中药单体成分及复方的代谢化学研究引起了越来越多的研究人员的重视.近年来对代谢化学的研究逐步深入,中药代谢化学研究方法也随之深入,为中药化学成分及其产生生物活性的有效成分的研究提供依据.概述了有关代谢化学研究方法的新进展,为中药新药研究、中药药效物质研究、以中药有效成分为先导的药物研究及中药质量评价提供了依据.

苯乙醇苷类成分的体内ADME研究

苯乙醇苷类成分广泛存在于中药中,主要含有松果菊苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、红景天苷、连翘酯苷B等成分.苯乙醇苷类成分的生物活性较好、且毒性作用小,具有潜在的药用开发价值及可观的应用前景.对苯乙醇苷类成分在体内的吸收、分布、代谢和排泄进行总结,期望能够在一定水平上为其药效评价和新药研发提供参考依据.

中药化学成分肠道代谢的研究

中药的化学成分复杂,经肠道代谢后,最终发挥药效的是中药中的化学成分,亦或是中药成分的代谢物,也有可能是口服中药后机体发生应激反应产生的物质.近年来,许多科研人员通过研究中药的化学成分,从而进一步揭示其药效物质的归属问题,目前已取得了很大的成效.下面就几种中药化学成分的肠道代谢研究进行简单的综述.

金匮肾气总苷中马钱苷吸收及代谢动力学过程

目的:研究金匮肾气总苷中马钱苷的在体肠吸收机制和药代动力学规律。方法:采用大鼠在体肠循环灌流法,考察药物质量浓度、肠道的pH值、不同肠段及P-gp对总苷中马钱苷肠吸收的影响;给大鼠灌胃不同浓度的总苷,于不同时间点眼眶静脉丛采血,HPLC法测定马钱苷的质量浓度,通过3P97软件进行数据处理。结果:在0.01-0.11 mg·mL^(-1)范围内,总苷中马钱苷的吸收与浓度呈线性关系,不受肠道pH的影响,在十二指肠的吸收明显优于空肠及回肠,利福平和维拉帕米分别呈现出对马钱苷吸收的抑制和促进作用。各剂量组马钱苷的药动学行为呈线性关系,吸收、消除均较快,以一室开放模型在体内分布,与维拉帕米合用后,可显著促进马钱苷的吸收。结论:金匮肾气总苷中马钱苷的吸收呈一级动力学过程,推测为被动扩散,其吸收受到P-gp外排作用的影响,从药动学的角度得以验证。

“九个坚持”理论指导下的中药化学课程思政教学改革的探索与创新

“九个坚持”是习近平总书记对新时代教育改革创新历史性成就的理论概括和新时代党对马克思主义教育理论的创新与发展。随着发展中医药上升为国家战略,中医药迎来了全新的发展机遇,中药化学作为中药学专业的核心课程,对中医药领域人才的培养具有重要作用。文章以“九个坚持”重要论述为理论指导,在课程思政教育理念要求下,对中药化学思政教育进行探索和创新,寻找思政教育和专业课程教学的交叉点,改进和发掘新的思政元素,在讲授专业知识的同时,增强“四个意识”,坚定“四个自信”,在思想道德品质和职业素质方面展开思政教育,为新时代实现中华民族伟大复兴培养合格接班人。

掺钕介孔硼硅酸盐生物活性玻璃陶瓷骨水泥的制备与性能表征

骨肉瘤是一种常见的恶性骨肿瘤,常通过手术切除进行治疗。但术后造成的骨缺损难以自愈,残余肿瘤细胞还会增加复发可能性。本研究开发了一种用于修复骨缺损和协同治疗骨肉瘤的掺钕介孔硼硅酸盐生物活性玻璃陶瓷骨水泥。首先通过溶胶–凝胶法结合固态反应制备了可作为光热剂和药物载体的掺钕介孔硼硅酸盐生物活性玻璃陶瓷微球(MBGC-xNd),然后将微球与海藻酸钠(SA)溶液混合制备了可同时进行光热治疗和化学治疗的可注射骨水泥(MBGC-xNd/SA)。结果表明掺Nd^(3+)赋予微球可控的光热性能,负载阿霉素(DOX)的微球显示出持续的药物释放行为。此外,载药骨水泥的药物释放量随着温度的升高而显著增加,说明光热疗法产生的热量可促进DOX释放。体外细胞实验结果表明,MBGC-xNd/SA具有良好的促成骨活性,并且光热–化学联合疗法对MG-63骨肉瘤细胞起到了更显著的杀伤作用,表现出协同效应。因此,MBGC-xNd/SA作为一种新颖的多功能骨修复材料,在骨肉瘤的术后治疗方面具有良好的应用前景。

不同基原八爪金龙药材中黄酮、香豆素类化学成分分析

目的:鉴定并分析不同基原八爪金龙药材中黄酮及香豆素类成分。方法:采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-QE-HF-MS/MS)。色谱柱为Zorbax Eclipse-C18,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(梯度洗脱),柱温为30℃,流速为0.3 mL/min,自动进样器温度为4℃,进样量为2μL。离子源为电喷雾离子源,扫描模式为正、负离子模式,加热器温度为325℃,鞘气压力为45 arb,辅助气压力为15 arb,吹扫气压力为1 arb,电喷雾电压为3.5 kV,毛细管温度为330℃,透镜电压为55%,扫描模式为一级全扫描(m/z 100~1500)、数据依赖性二级质谱扫描(dd-MS2,Top N=10),分辨率为70000(一级质谱)、17500(二级质谱),碰撞模式为高能量碰撞解离。通过参考ChemSpider、mzCloud、mzVault、PubChem等国内外专业数据库,同时结合相关文献和对照品数据对化合物结构进行鉴定并比较含量。结果与结论:从朱砂根、百两金、红凉伞等3种不同基原的八爪金龙药材中共分离47个成分,鉴定出17个黄酮类化合物,包括9个黄酮醇类(槲皮素3-O-鼠李糖苷7-O-葡糖苷、杨梅素、芦丁、毛里求斯排草素、山柰酚、槲皮素、异鼠李素、槲皮苷、美恩西汀)、3个黄烷-3-醇类(表棓儿茶素、儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯)、2个二氢黄酮类(黄颜木素、圣草酚)及3个其他类{3-(2,3-二氢苯并[1,4]二噁英-6-基)-7-羟基-2-三氟甲基-4-酮、墨沙酮、Oriciacridone F},10个香豆素类化合物{岩白菜素、[(7-羟基-4-甲基-2-氧代-2H-色烯-6-基)氧基]乙酸、[7-(羧基甲氧基)-4-甲基-2-氧-2-羟色基-3-基]乙酸、4,9-二羟基7H-呋喃并[3,2-g]色烯-7-酮、6,7-二羟基-4-甲基香豆素、七叶内酯、秦皮素、7,8-二羟基-4-甲基香豆素、4-甲基伞形酮葡萄糖醛酸、二十烷酮}。含量分析结果显示,黄酮、香豆素类化合物中,3种不同基原八爪金龙药材中共有5个共有成分,分别为岩白菜素(2号峰)、[7-(羧基甲氧基)-4-甲基-2-氧-2-羟色基-3-基]乙酸(5号峰)、墨沙酮(16号峰)、槲皮素(18号峰)、Oriciacridone F(26号峰),且共有成分的含量存在明显差异。除5个共有成分外,其余22个成分均为差异化学成分,分别为1、3、4、6~15、17、19~25、27号峰对应的化合物,其中3、6、8、23号峰对应的化合物仅存在于红凉伞中;12~15、19号峰对应的化合物仅存在于百两金中。UPLC-QE-HF-MS/MS法可高效、精确、快速地鉴别不同基原八爪金龙药材中黄酮类、香豆素类化学成分。

基于UPLC-Q-TOF-MS结合网络药理学的黄褐毛忍冬保肝活性成分及其潜在靶点研究

目的:系统研究黄褐毛忍冬的主要化学成分,基于网络药理学探讨其保肝活性成分,为其药效物质研究提供一定的参考依据。方法:利用超高效液相色谱飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS)对黄褐毛忍冬的主要化学成分进行分析,根据化合物的一级、二级质谱信息,并与标准品或参考文献进行比对,对黄褐毛忍冬的化学信息进行快速识别,利用Molinspiration平台预测药物分子的吸收情况。通过Swiss Target Prediction和Similarity ensemble approach(SEA)数据库检索黄褐毛忍冬化学成分对应靶点,与GeneCards数据库中急性肝损伤靶点进行比对,筛选黄褐毛忍冬保肝作用的靶点,并利用KOBAS 3.0数据库对核心靶点进行通路富集分析,采用Cytoscape 3.7.1软件构建“化学成分—靶点—通路”的可视化网络拓扑关系图。结果:黄褐毛忍冬提取物主要含有57种成分,利用Molinspiration平台筛选出24种可能被吸收的化学成分,其作用于319个急性肝损伤靶点。其中隐绿原酸、木犀草苷、绿原酸、新绿原酸、山柰酚、槲皮苷、齐墩果酸、栀子苷、断马钱子苷半缩醛内酯等主要化学成分可能作用于碳酸酐酶2(CA2)、醛糖还原酶1(AKR1B1)、碳酸酐酶1(CA1)、碳酸酐酶9(CA9)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、白介素2(IL-2)、内质网氨肽酶基因1(ERAP1)、成纤维细胞生长因子1(FGF1)、成纤维细胞生长因子2(FGF2)、醛氧化酶(ALOX)、腺苷受体A1(ADORA1)、碳酸酐酶4(CA4)等靶点,富集于PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、TNF信号通路、Toll受体信号通路、PPAR信号通路、Wnt信号通路、Notch信号通路等。结论:采用UPLC-Q-TOF-MS结合网络药理学的方法,初步揭示了黄褐毛忍冬的化学组成及保肝的潜在作用机制。

基于SLAF-seq技术的苗药八爪金龙遗传分析

为探究苗药八爪金龙群体遗传进化和亲缘关系的远近,该研究利用简化基因组测序技术(SLAF-seq)对42份八爪金龙样品进行测序,获得多态性SLAF标签。同时采用GATK和SAMtools软件在多态性SLAF中检测单核苷酸多态性(SNP)分子标记,并利用SNP分子标记分析八爪金龙样品间的遗传分化关系。结果表明:(1)42份八爪金龙共获得246.35 Mb reads,测序质量值Q30的平均值为95.66%,GC含量的平均值为41.14%。(2)通过生物信息学的分析,获得1769265个SLAF标签,其中379829个多态性SLAF标签,共开发2299640个SNPs分子标记。(3)利用开发的SNPs数据构建八爪金龙的系统发育树,42份八爪金龙分成两个大的类群。第一类群为细柄百两和原变种百两金;第二类群由贵州朱砂根、红凉伞、湖北朱砂根和江西朱砂根组成。江西朱砂根与其余群体关系较远,有明显的分群现象。该研究从基因组水平揭示不同地区八爪金龙资源之间的遗传关系,为八爪金龙种质资源的鉴定和遗传多样性分析提供了理论基础,所开发的SNP位点可进一步用于挖掘与品质、抗逆性等相关的基因。

中医药院校生命科学导论课程思政元素的引入与融合探索

在高等教育多维度育人的“思政”理念导向下,本文立足于生命科学导论课程特点,将高校思想政治教育融入到生命科学导论课程教学中。本文将从课程思政元素的引入、思政融合手段及融合案例等方面挖掘生命科学导论课程思政元素,探索在课程的知识点、科学发展史、历史故事、重大历史事件等融入思政元素,力求实现“教书”与“育人”相统一,为今后全面实施生命科学导论课程思政奠定坚实的基础。

基于化学实验技能大赛背景下有机化学实验的教学改革初探

有机化学实验作为有机化学教学的重要组成部分,在培养学生的专业基本操作能力和科研思维能力方面扮演着重要的角色。化学实验技能大赛对于培养学生的专业实验素养和综合能力的提升具有重要作用。因此,本文通过分析当前有机化学实验教学与实验技能大赛培养的冲突,探讨教学改革措施,为培养满足化学学科特色发展和专业应用型人才提供理论依据。