小麦球蛋白单克隆和多克隆抗体制备及建立酶联免疫吸附法快速检测技术

目的建立小麦球蛋白的ELISA检测技术,用于蛋白质掺假以及过敏原成分的快速检测。方法从麦胚粉中提取球蛋白,抗原免疫Balb/c小鼠进行4次免疫后,通过脾脏细胞杂交瘤技术及间接ELISA筛选制备单克隆抗体,同时制备兔抗小麦球蛋白的多克隆抗体。通过棋盘滴定法,初步确定单克隆抗体和多克隆抗体的最佳工作浓度,建立双抗夹心ELISA。结果通过免疫和杂交瘤技术获得了抗小麦球蛋白的单克隆抗体,纯化后抗体的效价均达到1:107,通过免疫兔制备的多克隆抗体经纯化后效价在1:2.4×105左右,所建立的双抗体夹心ELISA方法最低检测限为10 ng/m L,与其他物种的蛋白不发生交叉反应。结论本文建立的双抗体夹心ELISA方法具有良好的特异性和灵敏度,为建立乳品中小麦成分掺假及过敏原成分快速检测提供理论依据。

顶空气相色谱法测定乳铁蛋白脂质体中乙醚和氯仿的残留量

采用AgilentHP-5毛细管柱（30m×0.32mm,涂膜厚0.25μm）、氢火焰离子化检测器,采用程序升温,柱温起始温度为50℃,保持2min,以10℃/min的升温速率升至100℃,保持5min;进样口与检测器温度均为250℃;顶空瓶平衡温度90℃,平衡时间30min。以二氯甲烷为内标物,直接进样测定乳铁蛋白脂质体中乙醚和三氯甲烷的残留量。结果表明各个峰的分离效果良好,乙醚浓度在9.98~149.5μg/mL的范围内呈良好线性关系（R2=0.9995）,三氯甲烷浓度在9.92~149.2μg/mL的范围内呈良好线性关系（R2=0.9994）,最低检测限分别为0.025μg/mL和0.15μg/mL,平均回收率在95.36%~100%之间,3批样品中有机溶剂乙醚和氯仿的残留量均符合规定。顶空气相法操作简便,准确可靠,可用于乳铁蛋白脂质体中乙醚和氯仿残留量的测定。

网购儿童用碗筷中多环芳烃迁移量的调查分析

儿童用碗筷是常见的餐具之一,其材质通常有塑料和竹木两大类,因其具有携带简便、使用方便等功能,得到了广大消费者的认可。为了解网购儿童用碗筷中多环芳烃迁移量的安全现状,对各大网络平台上销售的儿童用网购碗筷进行调查研究,以便建立网购儿童用碗筷中多环芳烃的应急对策。

氢化物-原子荧光法测定食品容器及包装材料用聚酯树脂及其成型品中的微量锑

为建立简便、快速、高效测定食品包装材料中微量锑的方法,样品用4%乙酸处理后,利用氢化物-原子荧光法检测食品包装材料中的微量锑。结果表明,锑质量浓度在0～20μg/L范围内呈现良好的线性,回归方程为y=87.284 C-17.440,相关系数r=0.999 9,检出限为0.028 4μg/L,相对标准偏差RSD为0.86%～4.04%,回收率91.5%～98.5%。该法具有快捷、灵敏度高、精密度好等优点。

气相色谱-质谱联用法测定食品用硅油纸中氢化三联苯的迁移量

建立了气相色谱-串联质谱快速检测食品用硅油纸中氢化三联苯迁移量的方法。样品经迁移液浸泡后,用气相色谱-质谱仪进行测定,外标法定量。采用HP-5MS柱(30m×0.25mm×0.25?滋m)进行分离,进样口温度为250℃,氦气流速为1.0mL/min。氢化三联苯在1.0~25.0?滋g/mL浓度范围内呈良好的线性关系,方法的检出限(LOD,S/N=3)为0.15?滋g/mL,定量限(LOQ,S/N=10)为0.5?滋g/mL。50%乙醇迁移液的三个加标水平的平均回收率为85.6%~90.6%,相对标准偏差为5.7%~7.2%(n=6);异辛烷迁移液的三个加标水平的平均回收率为91.4%~95.6%,相对标准偏差为5.7%~6.9%(n=6)。该方法具有优良的灵敏度及稳定性,满足食品用硅油纸中氢化三联苯的分析检测和准确定量。

HPLC-MS/MS法测定聚碳酸酯食品包装材料中的酚类化合物

建立了聚碳酸酯食品包装材料中4种酚类化合物的高效液相色谱-串联质谱分析方法（HPLC-MS/MS）。样品经二氯甲烷超声提取后,氮吹至干,再用甲醇定容,以供HPLC-MS/MS检测。采用ZORBAX Eclipse XDB C18色谱柱进行梯度洗脱分离,采用甲醇/0.1%（体积分数）氨水溶液作为流动相;质谱采用电喷雾离子源,在负离子多反应监测（MRM）模式下运行。结果表明：4种酚类化合物在0.2~2 mg/L范围内线性关系良好（r2〉0.999）;检出限为3~10μg/kg,方法定量限为10~50μg/kg。分别在100、200、400μg/L浓度水平进行加标回收实验,回收率为84.4%~108.8%。该方法分离效果良好、准确可靠、方便快捷,为食品包装材料中有害物质风险监测奠定了基础。

气相色谱-串联质谱法测定塑料菜板中的多环芳烃

建立了气相色谱-串联质谱快速检测塑料菜板中多环芳烃的方法。样品经液氮冷冻研磨,甲苯超声提取、离心、旋转蒸发后,用气相色谱-质谱仪进行测定,外标法定量。采用DB-5MS柱进行分离,进样口温度280℃,氦气流速1.0 ml/min。检测结果表明:16种多环芳烃在0.1～10.0 mg/L浓度范围内呈良好的线性关系,方法的检出限(S/N=3)为0.03 mg/L,定量限(S/N=10)为0.1 mg/L,平均回收率为79.0%～97.0%,相对标准偏差(n=6)为5.2%～9.9%。该方法具有优异的灵敏度和稳定性,满足塑料菜板中多环芳烃的分析检测和准确定量。

气相色谱-串联质谱法测定不同材质菜板中可分解芳香胺的迁移量

建立了气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)快速检测不同材质菜板中可分解芳香胺的方法。样品经模拟液浸泡,经固相萃取小柱富集净化,再用5 ml叔丁基甲醚进行洗脱,氮吹仪对所得溶液吹至近干,用气相色谱-质谱仪进行测定,外标法定量。采用DB-5MS(30 m×0.25 mm×0.25μm)柱进行分离,进样口温度为280℃,氦气流速为1.0 ml/min。24种可分解芳香胺在0.1~10.0μg/ml浓度范围内呈良好的线性关系,方法的平均回收率在78.5%~98.0%,相对标准偏差(n=5)为0.4%~9.9%。该方法具有优异的灵敏度和稳定性,满足不同材质菜板中可分解芳香胺的分析检测和准确定量。

婴幼儿塑料奶瓶中二苯甲酮和4-甲基二苯甲酮等光引发剂的UHPLC-MS/MS测定

建立了快速检测婴幼儿塑料奶瓶中二苯甲酮（BP）和4-甲基二苯甲酮（MBP）的超高效液相色谱-串联质谱法（UHPLC-MS/MS）。样品采用65%乙醇和正己烷作为食品模拟物模拟含酒精和脂肪的食品,分别在5℃和40℃的温度下进行240 h的迁移试验。迁移后的模拟液经浓缩、净化并过滤后直接进样,质谱多反应监测（MRM）模式检测,外标法定量。结果表明,二苯甲酮和4-甲基二苯甲酮的线性范围为0.1～1 000μg/L;检出限为0.01μg/L;定量限（以信噪比≥10计）为0.05μg/L;在3个加标水平下2类化合物的平均加标回收率为80.0%～93.55%,相对标准偏差为2.03%～4.59%（n=6）。该方法具有优异的灵敏度和稳定性,满足对婴幼儿塑料奶瓶中二苯甲酮和4-甲基二苯甲酮等光引发剂的分析检测和准确定量。

儿童用网购仿瓷餐具中甲醛迁移量的调查分析

仿瓷餐具具有携带简便、使用方便等优势,得到了广大消费者的认可。为了解网购儿童用仿瓷餐具中甲醛迁移量的安全现状,对各大网络平台上销售的儿童用网购仿瓷餐具进行了调查研究,以便建立网购儿童用仿瓷餐具中甲醛的应急对策。

气相色谱-质谱法测定硅油纸中二异丙基萘(DIPN)迁移量

建立了快速检测硅油纸中二异丙基萘(DIPN)迁移量的气相色谱-质谱法。样品采用50%乙醇和异辛烷作为预期接触含酒精类和油性的食品模拟物,40℃进行2 h的迁移试验。迁移后的模拟液加入内标液经过超声、混匀后取上清液直接进样,选择性离子模式扫描,内标法定量。结果表明,二异丙基萘(DIPN)迁移量的线性范围0.1~100 mg/kg、检出限0.5 mg/kg、定量限(以信噪比≥10计)1.0 mg/kg;在3个加标水平下,平均加标回收率82.0%~95.34%、相对标准偏差2.08%~3.95%(n=6)。检测方法具有优异的灵敏度和稳定性,满足对硅油纸中二异丙基萘(DIPN)迁移量的分析检测和准确定量。

GC/MS同时检测聚碳酸酯材料中酚类化合物

建立了快速检测聚碳酸酯塑料包装材料中2-叔丁基苯酚、4-叔丁基苯酚及2,4-二叔丁基苯酚等酚类化合物的气相色谱质谱联用法。样品经正己烷超声萃取离心、浓缩后进行GC/MS测定,外标法定量。结果表明,2-叔丁基苯酚、4-叔丁基苯酚及2,4-二叔丁基苯酚均分别在0.1~100 mg/L范围内线性关系良好;定量限(以信噪比≥10计)为1 mg/kg;在4个加标水平下3种酚类化合物的加标回收率为82.23%~92.31%,相对标准偏差为2.13%~4.76%(n=6)。该方法具有优异的灵敏度和稳定性,满足对聚碳酸酯塑料包装材料中2-叔丁基苯酚、4-叔丁基苯酚及2,4-二叔丁基苯酚等酚类化合物的分析检测和准确定量。