氨基酸衍生物结合试验在化妆品检测中的应用

以OECD指南为基础,在实验室建立氨基酸衍生物结合试验(ADRA)方法并进行实验室内验证,同时评估该方法对测试化妆品配方致敏反应的可能性。依据OECD 442C指南,将受试物(包括化学品和化妆水配方)分别与半胱氨酸衍生物和赖氨酸衍生物以50∶1的比例避光孵育24 h,采用高效液相色谱法分析两种氨基酸衍生物的消耗,计算氨基酸衍生物消耗率并依据ADRA预测模型对受试物致敏性进行判定。同样条件下使用商业化ADRA试剂盒按照操作规程检测相同受试物的致敏性。由试验结果可知,实验室建立的ADRA方法可以准确区分13种化学品的致敏性,检测结果与OECD442C指南及文献中小鼠淋巴结试验(LLNA)结果一致,也与商业化试剂盒检测结果一致;ADRA对5种化妆水配方检测结果显示4种为致敏物、1种为非致敏物。

直接多肽反应试验在化妆品检测中的应用

以OECD指南为基础,在实验室建立直接多肽反应试验(DPRA)方法并进行实验室内验证,同时评估该方法对测试化妆品配方致敏反应的可能性。依据OECD TG 442C指南,将受试物(包括化学品和化妆水配方)分别与半胱氨酸多肽和赖氨酸多肽以10:1和50:1的比例避光孵育24h,采用高效液相色谱法分析两种多肽的消耗,计算多肽消耗率并依据DPRA预测模型对受试物致敏性进行判定。由试验结果可知,DPRA可准确区分16种化学品的致敏性,检测结果与OECD TG 442C指南及文献中小鼠淋巴结试验(LLNA)结果一致;DPRA对3种化妆水配方检测结果分别为致敏物、致敏物、非致敏物,与多肽反应程度分别为中、低和无。