X射线与γ射线辐照对悬浮红细胞质量影响的对比研究

目的 对比分析经过X射线辐照与γ射线辐照后悬浮红细胞相关质控指标与理化指标的变化,以评估X射线辐照对悬浮红细胞质量的影响。方法 随机留取谷氨酸氨基转移酶(ALT)检测不合格,其他检测均合格的2 U悬浮红细胞共49袋,分成两组,按照辐照源分别命名为γ组(21袋)与X组(28袋)。将γ组与X组在采集后第13天进行相应的辐照处理,并将辐照后的血液置于2~6℃血液冷藏冰箱中保存,分别于辐照后第1天、第22天取样测定相应的质量指标。结果辐照后第1天,X组与γ组的溶血率、K~+浓度、Na~+浓度、Cl~-浓度与Ca~(2+)浓度分别为(0.10±0.03)%vs.(0.09±0.06)%、(46.50±7.94) mmol/L vs.(45.03±4.65) mmol/L、(99.44±3.86) mmol/L vs.(100.83±4.79) mmol/L、(68.35±2.79) mmol/L vs.(67.59±1.26) mmol/L、(0.40±0.11) mmol/L vs.(0.43±0.08) mmol/L。辐照后第22天,X组与γ组的溶血率、K~+浓度、Na~+浓度、Cl~-浓度与Ca~(2+)浓度分别为(0.29±0.07)%vs.(0.27±0.06)%、(64.22±4.58)mmol/L vs.(63.05±3.57) mmol/L、(81.50±5.56) mmol/L vs.(81.76±3.91) mmol/L、(68.72±1.97) mmol/L vs.(68.28±1.36) mmol/L、(0.39±0.10) mmol/L vs.(0.41±0.04) mmol/L。对X组与γ组同一保存时间的同一质量指标进行比较,两者均无显著性差异(P>0.05)。随着保存时间的延长,X组与γ组的溶血率与K~+浓度均明显增大,Na~+浓度均显著降低,而Cl~-浓度与Ca~(2+)浓度则无变化。结论 悬浮红细胞经X射线与γ射线辐照后的质控指标与理化指标均无明显差异,基于安全性考虑,X射线辐照仪可完全替代γ射线辐照仪用于制备辐照血液。

6-BA和氨基酸对黄瓜子叶离体培养成花的影响

在基本培养基的筛选中,1/2MS培养基中附加0.10 mg·L-16-BA能显著提高离体黄瓜子叶的开花率,White培养基中附加2.00mg·L-1的KT下开花率也有明显提高,但植株矮小、瘦弱,整株变黄,甚至透明化,长势极差.浓度在一定范围的6-BA(0.01～0.50mg·L-1)对黄瓜子叶开花率影响不大,但在高浓度(0.50 mg·L-1)下,植株生长势差,开花迟,低浓度(0.01 mg·L-1)下,生长势较好.相同浓度的L-丙氨酸和L-酪氨酸均明显促进黄瓜子叶开花,且开花早;而甘氨酸对黄瓜子叶开花则有一定的抑制,开花率低.

基于双目计算机视觉的自适应识别算法及其监控应用

双目计算机视觉是利用仿生学原理,通过标定后的双摄像头来得到同步曝光图像,然后计算获取的2维图像像素点的第3维深度信息。为了对不同环境场景进行监控提出了一种新的基于双目计算机视觉的自适应识别算法。该算法首先利用像素点的深度信息对场景进行识别判断,然后采用统计的方法为场景建模,并通过时间滤波克服光照渐变,以及通过深度算法特性克服光照突变。与单摄像头监控系统相比,利用该算法实现的视频监控原型系统,可应用于更多场合,并利用深度信息设置报警级别,来降低误检率。

红系细胞发育相关miR-196b的靶基因预测及意义

目的预测红系细胞发育相关miR-196b的靶基因,并探讨其作用机制。方法应用miRbase数据库查找多物种已知的miR-196b成熟序列,比对后分析其在多物种间的保守性。应用miRanda、miRDB、Targetscan7.1、PITA和miRWalk数据库对miR-196b的靶基因进行预测,筛选重复率较高的靶基因。应用Cytoscape3.3.0和KEGG对重复率较高的靶基因进行GO分类富集分析和信号通路富集分析。查阅文献,再次筛选与红系细胞发育相关的靶基因,采用Targetscan7.1和RNA22分析其与miR-196b的结合情况。结果 22个物种具有miR-196b成熟序列,序列比对发现miR-196b在多物种间高度保守。靶基因预测结果显示,共得到5 004个miR-196b的靶基因,其中重复率较高的靶基因有302个。GO分类富集分析结果显示,miR-196b靶基因在生物学过程显著富集于发育过程、细胞过程和定位等,在分子功能显著富集于蛋白结合和物质转运等,在细胞组分显著富集于细胞突起和细胞器膜等(P均<0.05)。结合信号通路富集分析结果,筛选出43个与红系细胞发育相关miR-196b的靶基因,其信号通路富集于Ras信号通路、c AMP信号通路和PI3K-Akt信号通路等(P均<0.05)。结合文献,最终筛选出与红系细胞发育相关的miR-196b靶基因有5个,分别为GATA1、Cdkn1b、Pld1、Cdh1和Ntrk2,其中GATA1、Cdkn1b和Cdh1可与miR-196b直接结合。结论红系细胞发育相关miR-196b的靶基因可能为GATA1、Cdkn1b、Pld1、Cdh1和Ntrk2;miR-196b可能通过对上述靶基因的直接或间接作用激活相应信号通路,在红系细胞的发育过程中发挥生物学作用。

高原红细胞增多症大鼠骨髓CD71^+细胞EpoR表达、分布变化及意义

目的观察高原红细胞增多症(HAPC)大鼠骨髓CD71+细胞促红细胞生成素受体(EpoR)表达及分布变化,并探讨其意义。方法将48只雄性SD大鼠随机分为HAPC组和对照组,每组24只。HAPC组和对照组分别在海拔4 300、2 250 m自然环境下饲养。饲养40天行血液学参数[RBC、Hb、红细胞压积(HCT)、动脉血氧饱和度(Sa O2)]和骨髓细胞分类计数检测,HAPC组RBC、Hb、HCT及红系细胞数量、中幼红细胞数量、晚幼红细胞数量均高于对照组,Sa O2低于对照组(P均<0.05),证实HAPC模型制备成功。两组均采用密度梯度离心法制备骨髓单个核细胞(MNC)悬液,CCK8法检测MNC增殖能力(以OD450表示),单层半固体培养法检测红系集落形成单位(CFU-E)数量。采用免疫磁珠分选法从两组MNC悬液中分选CD71+细胞,免疫荧光法观察细胞膜表面EpoR荧光情况,ELISA法检测细胞膜和细胞质EpoR表达,Real-time PCR法和Western blotting法检测EpoR mRNA和蛋白相对表达量。结果 HAPC组和对照组OD450分别为1.54±0.04、1.17±0.05,CFU-E数量分别为(61.25±6.84)、(12.90±4.39)个;两组比较P均<0.01。免疫荧光显微镜下可见两组细胞膜表面均有环形或半环形的绿色荧光,但HAPC组细胞膜表面EpoR荧光强度和表达EpoR荧光的细胞数量均高于对照组。HAPC组及对照组CD71+细胞膜EpoR表达分别为2.41±0.03、1.55±0.06(P<0.05);细胞质EpoR表达分别为96.39±0.42、94.49±0.65(P>0.05)。HAPC组CD71+细胞EpoR mRNA和蛋白相对表达量均高于对照组(P均<0.05)。结论 HAPC大鼠骨髓CD71+细胞EpoR表达升高,分布多集中于细胞膜表面;上述变化可能通过促进MNC及骨髓红系细胞增殖而参与HAPC的发生、发展。

悬浮红细胞容量范围的确定及其内部控制标准的建立

目的确定悬浮红细胞的容量范围,建立悬浮红细胞容量的内部控制标准。方法根据健康无偿献血者的筛查标准以及《全血及成分血质量要求》的相关要求,计算悬浮红细胞容量的理论值;随机抽取1 U与2 U悬浮红细胞各2410袋进行称量,分别根据“x±2S”与“x±10%”两种规则确定1 U与2 U悬浮红细胞的容量范围;将两种规则确定的容量范围进行比较,制定符合本中心实际的1 U与2 U悬浮红细胞的容量范围。结果1 U与2 U悬浮红细胞的理论容量范围分别为117~160 mL与234~320 mL,抽取的2410袋1 U与2 U悬浮红细胞的实际容量范围分别为142~180 mL与276~393 mL。以“x±2S”为规则制定的1 U与2 U悬浮红细胞的容量范围分别为145~181 mL与298~358 mL,以“x±10%”为规则制定的1 U与2 U悬浮红细胞的容量范围分别为147~179 mL与295~361 mL。质量抽检结果显示,实际容量范围内悬浮红细胞的血细胞比容与血红蛋白含量均符合质量要求。不同地区悬浮红细胞的容量存在不同程度的差异。结论综合实际与近两年悬浮红细胞质量抽检的结果,将163 mL±10%与328 mL±10%分别确定为本中心1 U悬浮红细胞与2 U悬浮红细胞容量的内控标准。各地区可根据各自的实际情况建立准确、可行的悬浮红细胞的容量标准。

低氧下K562细胞红系分化模型的构建

目的通过筛选更优条件,构建不同低氧(1%和3%O_2)下K562细胞红系分化模型,为后期miRNA的检测奠定基础。方法将K562细胞分别置于常氧、低氧(1%和3%O_2)条件下经不同浓度(30和40μM)氯化血红素(hemin)诱导0、48、72、96 h,以不同培养时间下的细胞浓度增长速率判断指数生长期;用联苯胺染色法选择合适的hemin浓度;结合联苯胺染色阳性细胞率、γ-globin的mRNA水平的变化以及CD235a的表达水平的变化判断细胞分化效率; MTS细胞增殖实验检测细胞增殖的情况与流式细胞周期检测结果分析细胞增殖水平的变化;用流式检测细胞凋亡率判断氧浓度对凋亡的影响。结果 (1)不同培养时间的计数结果显示48～72 h间细胞增殖速率最快。(2)联苯胺染色结果提示以40μM的hemin诱导细胞获得的阳性率更高。(3)联苯胺染色结果显示,1%O_2条件下72、96 h即刻细胞的阳性率明显高于常氧(P<0.05);而3%O_2条件下常氧低氧各时间点间无明显差异;γ-globin的检测结果显示,1%O2条件下96 h的表达水平是常氧的2.5倍(P<0.05),而同样时间、3%条件下仅为常氧的1.4倍(P<0.05);流式检测CD235a结果显示,1%O_2条件下,CD235a阳性细胞率表现为48～72 h下降,72～96 h上升的变化趋势,且96 h常氧低氧差异明显(P<0.05); 3%O_2条件下则表现为随时间延长逐步下降的趋势,96 h常氧低氧差异有统计学意义(P<0.05)。(4)结合MTS及细胞周期检测结果发现,不同氧浓度下细胞的增殖水平与常氧组无明显差异(P>0.05)。(5)流式检测细胞凋亡情况显示,1%O_2条件下72、96 h即刻凋亡率略高于常氧,但差异无统计学意义(P>0.05); 3%O_2条件下常氧低氧各时间点凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验确立的实验参数,构建了符合试验要求的较为理想的K562红系分化模型(低氧下),为后期miRNA的检测奠定了基础。

miR-210的红细胞系相关下游靶基因预测

目的利用生物信息学方法预测miR-210的红细胞系(以下简称红系)相关下游靶基因。方法利用NCBI比对分析miR-210成熟序列在各哺乳动物之间的保守性。运用基因数据库筛选miR-210的下游靶基因。采用Cytoscape中的BINGO插件对预测的miR-210下游靶基因进行GO分类富集分析。筛选参与红系增殖、分化、凋亡的miR-210下游靶基因,采用DAVID和KEGG数据库进行信号转导通路富集分析后,预测miR-210的红系相关下游靶基因。利用Targetscan在线工具验证靶基因与miR-210的相互作用关系。结果 miR-210成熟序列在多物种间具有高度保守性。筛选出416个与miR-210相关性较高的预测靶基因,其分子功能集中在蛋白结合、离子跨膜运输活动、酶结合等,参与的生物学过程集中在细胞信号转导、突触传导等,参与构成的细胞组分主要有突触小泡、细胞质、细胞器等。筛选出26个与红系增殖、分化、凋亡密切相关的miR-210下游靶基因,参与调控的信号通路主要集中于癌症信号通路、PI3K-Akt信号通路等。初步确定Smad3、Mapk10、Stat5a、Ywhag、Ctgf、Kitl6基因与红系增殖、分化密切相关,其中Smad3、Mapk10、Stat5a、Ywhag、Kitl可能受miR-210的直接调控,Ctgf可能受miR-210的间接调控。结论初步筛选出miR-210的红系相关下游靶基因Smad3、Mapk10、Stat5a、Ywhag、Ctgf、Kitl6,这些靶基因可能与红系的增殖、分化有关。

新冠康复者恢复期血浆抗SARS-CoV-2中和抗体检测分析

目的了解新冠康复者恢复期血浆中抗SARS-CoV-2中和抗体水平,评价其是否具有特异的抗SARS-CoV-2 S抗原作用,为临床使用提供实验室支持数据。方法以9名已从COVID-19中恢复的新冠康复者恢复期血浆捐献者为研究对象,以4名完成疫苗接种的志愿者和3名新冠抗体筛查阳性的无偿献血者做对比,采用化学发光免疫分析法检测3组研究对象抗SARS-CoV-2总抗体、IgM和IgG,并对所有标本进行抗携带SARS-CoV-2 S抗原的假型化疱疹性口炎病毒检测。结果新冠康复者及完成疫苗接种者血清总抗体及IgG抗体检测均有反应性。与新冠康复者恢复期血浆及完成疫苗接种的标本相比,回顾性筛查抗体检出阳性的献血者标本的抗SARS-CoV-2抗体均呈弱反应。8名恢复期血浆捐献者和所有完成疫苗接种者SARS-CoV-2假病毒中和实验阳性;所有抗体筛查阳性献血者中和实验阴性。结论新冠康复者、疫苗接种者和抗体筛查阳性者3组研究对象的中和抗体水平和特征不同。在无法进行假病毒中和抗体检测的情况下,可以考虑通过检测总抗体替代。

西安地区无偿献血人群SARS-CoV-2抗体的血清学回顾分析

目的了解新冠疫情暴发期间西安市无偿献血人群SARS-CoV-2抗体流行情况,为制订新冠病毒传播防制策略提供依据。方法收集西安市2020年1月1日~6月14日的健康献血者标本共3 623份,采用化学发光法对标本进行血清抗SARS-CoV-2抗体检测。并对比西安本土新型冠状病毒肺炎确诊病例数与西安无偿献血人群SARS-CoV-2抗体月流行率趋势的相关性。结果共检测3 623名西安市无偿献血人员,发现3例SARS-CoV-2抗体阳性者,流行率为0.083%(95%CI:0.00,0.18),最早出现新冠病毒血清阳性的献血者是在2020年2月4日。结论西安地区无偿献血者的抗SARS-CoV-2阳性率很低,符合西安当地疾病的流行情况。提示对献血者进行血清学检测,可以作为疫情监测的一种方式。

中西医结合治疗小儿肾病综合征并发急性肾功能衰竭30例

采用中药保留灌肠(黄芪、大黄、丹参、红花)及辨证治疗联合西药强的松、迷尿和利尿合剂治疗小儿肾病综合征并发急性肾衰30例,结果全部治愈。提示中西医结合治疗该病,有缩短疗程,加速肾功能恢复及防治并发症的作用。

荧光能量转移法测定病毒灭活血袋中的亚甲蓝释放量

目的建立一种简单、经济、快捷的方法,用于测定病毒灭活血袋中的亚甲蓝(MB)释放量。方法利用MB与牛血清白蛋白稳定的金纳米团簇(BSA-AuNCs)建立荧光能量转移体系,通过不同浓度MB对BSA-AuNCs荧光的猝灭程度建立MB测定的标准曲线,以此实现病毒灭活血袋中MB释放量的测定。结果当荧光发射波长为620nm左右,MB浓度(c_(MB))在(0.9-36)μmoL/L时,c_(MB)与BSA-AuNCs荧光的猝灭程度呈良好的线性关系,线性关系为(I_(0)-I)/I_(0)=0.018c_(MB)+0.021(r=0.996);利用本法测定MB浓度,回收率为(98.00-101.95)%;利用本法测定高、中、低3个浓度的MB,日内变异系数分别为0.73%、0.81%与0.77%,日间变异系数分别为3.92%、3.81%与4.73%;利用本法测定病毒灭活血袋中的亚甲蓝释放量,测得的结果与使用固相萃取-分光光度法测得的结果无差异(P>0.05)。结论利用荧光能量转移法可以实现病毒灭活血袋中MB释放量的简单、快速测定,得到的结果准确、可靠。

不同普通血浆制剂相关质量指标的对比分析

目的探讨不同来源的普通血浆制剂中血浆总蛋白(TP)含量、凝血因子Ⅷ(FⅧ)活性及纤维蛋白原(Fib)含量的差异,为普通血浆制剂相关质量标准的建立及细化提供依据。方法试验涉及的样品包括全血来源的冰冻血浆与去冷沉淀冰冻血浆以及去白细胞全血来源的冰冻血浆与去冷沉淀冰冻血浆;血浆总蛋白含量(TP含量)采用双缩脲法进行测定;FⅧ活性(FⅧ∶C)与Fib含量均采用凝固法进行测定。结果全血来源冰冻血浆、全血来源去冷沉淀冰冻血浆、去白细胞全血来源冰冻血浆与去白细胞全血来源去冷沉淀冰冻血浆的TP含量分别为(59.64±4.78)g/L、(58.09±4.18)g/L、(52.20±3.57)g/L与(51.89±1.50)g/L,FⅧ∶C分别为(109.63±43.38)%、(27.06±7.09)%、(71.83±21.64)%与(21.66±3.86)%,Fib含量分别为(2.19±0.39)g/L、(1.30±0.24)g/L、(2.04±0.37)g/L与(1.22±0.15)g/L。两两进行比较,除去白细胞全血来源冰冻血浆与去白细胞全血来源去冷沉淀冰冻血浆的TP含量无显著性差异外,其他普通血浆制剂的TP含量均存在明显差异(P<0.05);4种普通血浆制剂的FⅧ∶C存在明显差异(P<0.05);去冷沉淀冰冻血浆中的Fib含量均显著低于冰冻血浆中的Fib含量(P<0.05),其他普通血浆制剂的Fib含量则无明显差异。结论普通血浆制剂的TP含量、FⅧ∶C与起始血液及制备过程密切相关,建议据此进一步细化普通血浆制剂的质量标准;应考虑制定去冷沉淀冰冻血浆的有关质量标准以及临床适应症。

中职就业缘何“风景”独好

2008年，全国中职毕业学生数为589．15万人，平均就业率为95．77％；从2005年开始，全国中职就业率一直保持在95％以上。在金融危机背景下，就业问题异常严峻的形势下，中职学校何以能够在全国保持如此高的就业率？就业率高的学校有何独到之处？值得探寻。

荧光猝灭法测定冷沉淀凝血因子中的纤维蛋白原含量

目的 建立冷沉淀凝血因子中纤维蛋白原含量测定的新方法,实现纤维蛋白原含量的简单、快速、准确测定。方法 纤维蛋白原(Fib)与羊抗人纤维蛋白原(抗-Fib)能够发生特异性的结合,进而形成抗原抗体复合物。当溶液中有Fib存在时,标记有异硫氰酸荧光素(FITC)的羊抗人纤维蛋白原(FITC-抗-Fib)因免疫复合物的形成导致FITC的荧光发生猝灭。在一定浓度范围时,FITC-抗-Fib的荧光猝灭程度与Fib浓度(cFib)呈正相关。结果 当cFib为(0.007 8~0.560 0)g/L时,FITC-抗-Fib的荧光猝灭程度[(I0-I)/I0]与ln(cFib)的线性关系为(I0-I)/I0=15.53ln(cFib)+80.79 (R2=0.99);利用本法测定Fib,回收率为(96.77~102.43)%;利用本法分别测定高、中、低三个浓度的Fib,得到的日内变异系数分别为0.31%、0.56%与0.49%,日间变异系数分别为3.81%、3.06%与4.13%;利用荧光猝灭法测定冷沉淀凝血因子中的Fib含量,测得的结果与使用凝固法测得的结果无显著性差异(t=-0.075,P>0.05)。结论 本文利用纤维蛋白原与FITC-抗Fib的特异性结合成功建立了1种冷沉淀凝血因子中Fib含量测定的荧光分析新方法,该方法简单、快速,测得的结果准确、可靠。

携手助力G20、我为新城添绿意

◎G20杭州峰会举办在即，钱江新城核心区综合整治、美化提升项目建设也相继进入了冲刺决胜阶段。3月14日下午，钱江新城管委会团委组织青年党员、团员和年轻干部到钱江新城核心区综合整治——市民公园临时绿化工程现场开展了“携手助力G20、我为新城添绿意”活动。

HIF-2α对高原红细胞增多症模型大鼠骨髓CD71^＋细胞GATA-1表达的影响

目的探讨低氧诱导因子-2α（HIF-2α）对高原红细胞增多症（HAPC）模型大鼠骨髓CD71^＋细胞红系特异性转录因子GATA-1表达的影响。方法选用雄性SD大鼠48只，随机分为低海拔对照组（海拔2250m饲养）和HAPC模型组（海拔4300m饲养）。在海拔4300m自然环境下复制HAPC大鼠模型并采用骨髓细胞分类计数、血液学参数和血清红细胞生成素（EPO）检测进行验证。应用密度梯度离心和免疫磁珠分选相结合的方法分选大鼠骨髓CD71^＋细胞，Q—PCR和Westernblot法检测其HIF-2α、GATA-1 mRNA和蛋白的表达。低氧培养CD71^＋细胞，以最佳干扰序列HIF-2α shRNAi3转染96h，Q—PCR和Western blot检测HIF-2α、GATA-1 mRNA和蛋白的表达水平。结果骨髓细胞分类计数、血液学参数和血清EPO含量测定结果提示HAPC大鼠模型复制成功。HAPC模型组骨髓CD71^＋细胞HIF-2α、GATA-1 mRNA和蛋白的表达高于低海拔对照组，且HIF-2α与GATA-1在mRNA和蛋白表达均呈正相关（r=0．923，P〈0．01；r=0．838，P〈0．01）。HIF-2α shRNAi3干扰HAPC模型组骨髓CD71^＋细胞96h后，HIF-2α、GATA-1 mRNA和蛋白的表达均低于空白对照组和阴性对照组。结论HIF-2α对GATA-1表达的影响可能与HAPC的发生发展相关。

西安地区去白悬浮红细胞容量参考区间的确定与分析

目的本研究旨在建立本中心去白细胞悬浮红细胞容量内部质量控制标准,以指导成分制备,加强内部质控,提高血液制剂的质量。方法抽取本中心2023年3-8月使用2个厂家去白细胞型塑料血袋采集的全血1523袋,分别称取过滤前及过滤后的重量,依据公式及测定的比重计算全血采集量、过滤损耗容量及产品容量。依据数据分布特征确定去白悬浮红细胞容量参考范围,分析全血采集量、过滤损耗容量及产品容量在两个厂家之间的差异。比较近一年去白细胞悬浮红细胞质控容量数据及另抽取的100袋去白细胞悬浮红细胞与参考区间的差异,验证参考区间的有效性。结果样本总体全血采集量中位数为402.0 mL,过滤损耗容量中位数为41.4 mL;去白悬浮红细胞容量均数为322.5 mL,其中使用厂家A去白细胞型塑料血袋的全血采集量(A:中位数404.4 mL;B:中位数397.7 mL,P<0.01)及去白悬浮红细胞产品容量(A:均值331.4 mL;B:均值312.0 mL,P<0.01)均更高,且过滤损耗容量更低(A:中位数39.5 mL;B:中位数46.6 mL,P<0.01);去白悬浮红细胞容量数据标准差为19.6,则去白悬浮红细胞容量参考区间为284.1~360.9 mL。验证样本及质控抽检数据均与区间样本无差异(P>0.05)。结论根据实际情况,将本中心去白细胞悬浮红细胞的容量标准确定为284.1~360.9 mL。