叶酸受体靶向磁共振对比剂^(157)Gd-DTPA-Folate增强裸鼠肿瘤信号的初期评估

评估移植人胃癌细胞(SGC-7901)的裸鼠注射叶酸受体靶向对比剂钆-二亚甲基三胺五乙酸-叶酸(gadolinium-diethylenetriaminepentaacetic acid-folate,Gd-DTPA-Folate)后磁共振信号的变化情况。通过将叶酸与二亚甲基三胺五乙酸(DTPA)连接后,再与GdCl3反应合成Gd-DTPA-Folate。移植人肿瘤细胞的裸鼠随机分成实验组及对照组。试验组小鼠腹腔注射0．4mL的Gd-DTPA-Folate,对照组小鼠注射等摩尔量Gd3+的Gd-DTPA。注射对比剂前和注射对比剂后即刻、1、2、3、4、6、12和24 h进行MR扫描,观察肿瘤的信号特征。试验组注射对比剂后即刻、1、2、3h的肿瘤信号强度都显著高于注射前的信号。注射后1小时出现最大差异,差异可维持3小时(P<0．05)。对照组小鼠,除了注射后即刻和1h,其他注射对比剂后任何时间点的肿瘤信号强度与注射前没有统计差异。与Gd-DTPA相比,Gd-DTPA-Folate可延长移植人胃癌肿瘤细胞的裸鼠的肿瘤信号增强时间,有可能成为一种有潜力的叶酸受体靶向的磁共振对比剂。

右旋糖酐铁注射液峰位相对分子质量和重均相对分子质量的HPGPC测定

目的:比较右旋糖酐铁注射液峰位相对分子质量(M_p)和重均相对分子质量(M_w)的测定在质控中的应用。方法:采用凝胶液相色谱法,示差检测器。用 TSKG4000PW(300 mm×7.5 mm)凝胶柱测定右旋糖酐铁的 M_p,流动相是0.1%叠氮钠溶液,流速1.0 mL·min^(-1);用 TSKG3000PW(300 mm×7.5 mm)凝胶柱测定右旋糖酐的 M_w,流动相为0.71%硫酸钠溶液,流速0.5 mL·min^(-1)。采用 GPC 软件计算。结果:进口右旋糖酐铁注射液的 M_p 和 M_w 均符合标准要求,而国产右旋糖酐铁注射液除1个产品的 M_w 符合要求外,其余产品的 M_p 和 M_w 均不符合要求。结论:右旋糖酐铁络合物的 M_p 用于质量控制似乎更合理些。

用HPLC法和氨基酸分析仪测定多维氨基酸片中18种氨基酸

目的：RP-HPLC法和氨基酸分析仪（amino acid analyzer，AAA）法测定氨基酸含量的比较。方法：采用Agilent高效液相色谱系统和日立835-50氨基酸分析仪测定多维氨基酸片中18种氨基酸的含量。RP-HPLC法采用C18柱和邻苯二甲醛柱前衍生化进行，AAA法采用离子交换色谱柱和茚三酮柱后衍生化进行。结果：HPLC法和AAA法的变异系数分别〈1．5％和3％，最小检测量分别为3pmol和30pmol。HPLC法的测定值与AAA的测定值有相关性。两种测定方法的平均相对偏差为5．74％（0．24％～9．60％）。结论：两种方法都可用于测定氨基酸，但测定结果存在差异。

^(99)Tc^m-DTPA-Folate的制备及其荷瘤裸鼠体内分布

制备了Tcm-DTPA-Folate并对其在荷瘤裸鼠的体内分布进行了初步探索。将叶酸(Folate)与DTPA99连接,合成DTPA-Folate,再用Tcm标记,考察标记物的纯度和稳定性,并进行荷人SGC-7901胃癌肿瘤裸99鼠的体内分布特性研究。结果表明,99Tcm-DTPA-Folate的标记率>98%。标记物室温放置4h,放化纯度>90%。裸鼠腹腔注射99Tcm-DTPA-Folate后8h,肿瘤与周围肌肉的含量比值高达7.5:1。

HPLC法测定人尿液中的3-甲基组氨酸

目的采用HPLC法测定人尿液中3-甲基组氨酸(3-MH)的含量。方法尿样经乙腈沉淀蛋白和邻苯二甲醛柱前衍生化,60s内进样,以乙醇胺为内标,测定尿液中的3-MH的含量。结果3-MH的衍生物与尿液中其他杂质的衍生物完全分离。线性范围为10~400μmol·L^(-1)(r=0.9993),平均回收率为94.03%~97.13%(n=5),日内和日间RSD分别<7.80%和8.25%,最低检出浓度达5μmol·L^(-1)。结论该方法灵敏度高,可用于人尿液中3-MH含量的测定。

HPLC法测定人尿糖比值

目的采用HPLC法测定尿液中乳果糖和甘露醇的比值(L/M),以评估健康受试者和手术患者的肠通透性。方法尿样经乙腈沉淀蛋白,离子交换树脂除离子,在Kromasile氨基柱(250 mm×4.6 mm,5μm)上用示差检测器测定尿液中乳果糖和甘露醇的浓度。流动相为乙腈-水(70:30,V/V),流速1 mL·mln^(-1)。结果乳果糖和甘露醇的线性范围为0.1～1.25 g·L^(-1) (r_乳=0.999 2,r_甘=0.999 5),回收率分别为(94.8±2.5)%和(99.1±2.0)%(n=5),日内和日间RSD分别为2.07%～3.45%和4.05%～7.89%、3.44%～5.03%和4.80%～7.37%,最低检出限为0.05 g·L^(-1),健康受试者和手术患者6h的L/M值分别为(0.064±0.024)和(0.132±0.066)。结论该方法可用于评估手术患者的肠通透性改变,但灵敏度不高。

^(125)I-γ-Ty-Folate的制备及其体外结合特性

目的 制备碘标记叶酸酪氨酸复合物 (12 5I γ Ty Folate)并进行体外结合特性的研究。 方法 叶酸(Folate)与酪氨酸甲酯通过EDC连接 ,水解后生成叶酸酪氨酸复合物 (γ Ty Folate)。12 5I γ Ty Folate采用Iodogen法标记 ,C18反向色谱柱纯化 ,纸层析检测。12 5I Ty Folate与叶酸结合蛋白 β 乳球蛋白 (β lactoglobulin)进行饱和结合实验、蛋白解离实验、竞争结合实验和动力学实验 ,与HeLa细胞进行了饱和实验。结果 12 5I γ Ty Folate的标记率为 5 0 %～ 6 0 % ,纯化后比活度为 5 4 3.8GBq/mmol,放化纯度大于 95 %。BMAX为 2 0 6 .4fmol/mL ,Kd 为3.82 7× 10 -10 mol/L。12 5I Ty Folate与叶酸结合蛋白 β lactoglobulin的结合具有温度时间依赖性、可饱和性、可逆性及特异性 ,12 5I γ Ty Folate与HeLa细胞的结合具有饱和性。 结论 12 5I γ Ty Folate可作为叶酸结合蛋白 β lactoglobulin的特异性配体 。

HPLC法测定卵磷脂中6个成分的含量

目的:采用HPLC法测定卵磷脂中6个成分的含量.方法:采用LiChrosphere 100 DIOL色谱柱(250 mm×4mm,5μm),以正庚烷:异丙醇(65:114)为流动相A,正庚烷:异丙醇:水(31:62:12)为流动相B,梯度洗脱,流速0.8mL/min,用蒸发光散射检测器进行检测.结果:磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺的线性范围分别为1.69～33.76μg(r=0.997 9),0.33～6.57μg(r=0.999 6),棕榈酸甘油酯、胆固醇、鞘磷脂和溶血性磷脂酰胆碱的最低检测限分别为0.3、3、10和20 ng.结论:本方法操作简便、准确,可用于卵磷脂中各个成分的测定.

慢性阻塞性肺病大鼠骨骼肌蛋白降解的变化

目的探讨慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠骨骼肌蛋白降解代谢变化的规律。方法利用熏香烟法制作COPD大鼠模型(COPD组),并设置对照组,每组20只。取伸趾长肌充氧离体孵育,采用高效液相-荧光法测量骨骼肌3-甲基组氨酸(3-MH)和酪氨酸(Tyr)的含量。结果孵育后,COPD组大鼠Tyr及3-MH的降解率与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.001)。结论COPD大鼠不仅全身骨骼肌总蛋白降解增加,作为机体蛋白质储存库重要组成部分的骨骼肌肌蛋白消耗更为明显。

小分子多肽HLP核素示踪分析方法研究

The radioisotopic tracing method of Hirulog-like peptide（HLP） was established, wihch could be a reference for the pharmacokinetic analysis in small molecule polypeptide research.（）125I-HLP was prepared by Iodogen method.The radiochemical purity and stability in vitro of（）125I-HLP were determined by HPLC and SDS-PAGE.The radiochemical purity of(（）125I-HLP) was shown above 95% and was stable for 53 hours.It is the first time using SPE to separate the labeled compound from radioiodide and small molecule polypeptides.The HLP recovery was（92.60±6.31）% by SPE and the coefficient of variation was lower than 10% in a concentration range from 10 to 100 000 ng/mL.The detectable limitation reached 52.79 ng/mL.

^(125)I-r-Sak大鼠单剂量给药的药物动力学

为测定r -Sak在大鼠体内的药代动力学参数及给药一个剂量后的分布和排泄。用12 5I标记法研究大鼠单剂量静脉注射12 5I -r -Sak的药物动力学参数及体内分布和排泄情况。结果表明 ,12 5I -r-sak按 70 μg/kg及 84 0 μg/kg两种剂量静脉给药后 ,在大鼠体内均可以二室模型拟合。低、高两种剂量的T1/2 (α) 分别为 5 .4 7± 2 .13、8.4 5± 4 .5 0min ,T1/2 ( β) 分别为 96.15± 2 2 .2 9、5 8.78± 3 2 .79min ,AUC分别为 0 .895± 0 .4 5 5、3 8.3 6± 5 .181μg·min·mL- 1,经统计分析 ,T1/2 (α) 、T1/2 ( β) 在两剂量组间无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,AUC随剂量增加而显著增加 (P <0 .0 5 )。12 5I -r -Sak在大鼠体内的分布以肾脏中放射活性为最高 ,其次为血浆、肝脏、肺脏、脾脏、心脏 ,在脑内也有很高浓度。排泄试验表明 ,在给药后 96h ,累计的尿和粪排泄的放射性以及被甲状腺组织富集的放射性碘已近 80 %。

^(188)Re(Ⅴ)-DMSA药盒制备及其质量评估

目的研制^(188)Re(V)-二巯基丁二酸(DMSA)标记配方并制备药盒,评价药盒的质量。方法酸性环境下,SnCl_2·2H_2O还原高价态 ReO_4^-为Ⅴ价,并与 DMSA 反应,制备药盒,以高压液相色谱仪(HPLC)测定该药盒的标记率、标记物的体外稳定性、药盒的稳定性,并与^(99)Tc^m(V)-DMSA在小鼠体内分布比较。结果药盒标记率为100%,标记物室温放置24 h 后标记率>97%;药盒置-20和4℃条件下3个月后,标记率>95%;^(188)Re(Ⅴ)-DMSA 与^(99)Tc^m(Ⅴ)-DMSA 在小鼠体内分布相似,在骨骼高浓聚,经肾脏排泄。结论 ^(188)Re(Ⅴ)-DMSA 药盒性能优良。

海风藤化学成分研究

从海风藤的95％乙醇提取物中分得11个化合物。本文报道其中6个化合物的结构及生物活性测定,根据理化性质及波谱分析,分别鉴定为蜡酸(Ⅰ),胡萝卜甙(Ⅱ),denudatin B(Ⅲ),burchellin(Ⅳ),Veraguensin(Ⅴ)和galgravin(Ⅵ)。晶Ⅴ为首次从该植物中分离得到。从Ⅲ、Ⅳ对小鼠淋巴细胞转化的影响结果,证明二者均具有一定的免疫抑制作用。

氨基葡萄糖和硫酸软骨素含量测定方法的建立

目的:建立黄金牌真灵活胶囊中有效成分氨基葡萄糖与硫酸软骨素含量的测定方法。方法:采用Elson-Morgan法、咔唑法分别测定该胶囊中氨基葡萄糖和硫酸软骨素的含量。结果:氨基葡萄糖和硫酸软骨素的平均回收率分别为98.81%(RSD=0.70%,n=5)和99.82%(RSD=0.40%,n=5)。结论:所用方法简便、重复性好、测定结果准确,可有效地控制黄金牌真灵活胶囊的质量。