旋毛虫及其虫源性蛋白对盲肠结扎穿孔诱导的小鼠哝毒症的影响

目的观察旋毛虫及其虫源性蛋白对盲肠结扎穿孔(CLP)诱导的小鼠脓毒症的影响。方法 80只雄性BALB/c小鼠随机分为假手术组、CLP组、旋毛虫肌幼虫(ML)预感染组、旋毛虫肌幼虫虫体可溶性蛋白(SMP)处理组和排泄分泌蛋白(MES)处理组。ML预感染组于术前28 d经口感染300条旋毛虫肌幼虫,其余各组分别于术后30 min腹腔注射PBS或SMP(25μg/只)或MES(25μg/只)。观察小鼠术后状态和72 h生存率,检测术后12 h小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)水平及TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、TGF-β水平,观察小鼠肝和肾组织病变。结果与假手术组相比,CLP组72 h生存率降低,血清中ALT、AST、BUN和Cr水平及细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10和TGF-β水平均明显升高(P<0.05)。肝中肝索排列紊乱,肝细胞水肿,肾中部分血管球皱缩,肾小管细胞水肿。与CLP组相比,ML预感染组血清中ALT、AST、Cr、TNF-α和IL-1β水平降低,IL-10和TGF-β水平升高(P<0.05);SMP处理组血清中ALT、AST、Cr、TNF-α和IL-1β水平降低,TGF-β水平升高(P<0.05);MES处理组72 h生存率明显升高,血清中ALT、AST、BUN、Cr、TNF-α、IL-6和IL-1β水平明显降低,IL-10和TGF-β水平明显升高(P<0.05),肝和肾组织结构损伤明显减轻。结论旋毛虫及其虫源性蛋白可减少CLP诱导的脓毒症小鼠血清中促炎因子的释放,促进免疫调节因子的释放,其中MES效果更为显著,并能减轻肝和肾结构和功能的损伤。

日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂干预脂多糖诱导的小鼠脓毒症

目的探讨日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Sj Cystatin)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠脓毒症的干预效果。方法 54只BALB/c小鼠适应性饲养1周后,随机分为正常对照组(PBS组,A组)、脓毒症造模组(PBS+LPS组,B组)、蛋白干预组(PBS+LPS+Sj Cystatin组,C组)。A组腹腔注射PBS(100μL),B组、C组腹腔注射含LPS(10 mg/kg)的PBS(100μL),其中C组小鼠于注射LPS后30 min腹腔注射含25μg Sj Cystatin蛋白的PBS(100μL)。每组随机抽取10只,造模后24 h取小鼠血清及肝、肺、肾组织,酶联免疫吸附试验(ELISA)验检血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)水平,全自动生化分析仪检测ALT、AST、BUN和Cr水平;肝、肺和肾组织HE染色观察其病理损伤;每组余8只小鼠,造模后记录小鼠72 h生存率的差别且观察小鼠状态的改变。结果 3组小鼠的72 h生存率具有统计学差异(P<0.05),与A组(100%)相比,B组(0%)72 h生存率降低(P<0.05),经过Sj Cystatin蛋白治疗后,C组生存率较B组增高(36%)。与A组相比,B组肝、肺、肾组织切片病理损伤加重,血清中ALT、AST、BUN、Cr、IL-6、TNF-α水平明显升高(P<0.05);与B组相比,C组调节因子IL-10水平明显升高,肝、肾、肺组织损伤明显减轻,且血清中上述肝肾功能检测指标及促炎因子水平明显降低(P<0.05)。结论 Sj Cystatin对LPS诱导的脓毒症有显著的治疗作用。

旋毛虫成虫排泄分泌蛋白抗CLP诱导的小鼠脓毒症的观察

目的探讨旋毛虫成虫排泄分泌蛋白（AES）对盲肠结扎穿孔术（CLP）诱导的小鼠脓毒症的抑制作用。方法将48只BALB/c小鼠随机分为3组,即假手术对照组（PBS＋sham组,A组）、脓毒症组（PBS＋CLP组,B组）、AES蛋白治疗组（AES＋CLP组,C组）。A组和B组于CLP术后经腹腔注射200μl PBS,C组术后经腹腔注射含25μg AES蛋白的等量PBS。每组随机抽取8只,建模后观察各组小鼠的一般情况及96 h生存率;每组其余8只小鼠于建模后12 h取肝、肺、肾,HE染色观察病理改变;以酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10及TGF-β细胞因子水平的变化。结果 3组小鼠96 h生存率差异有统计学意义（χ^2=21.16,P〈0.05）;与A组（100%）相比,B组小鼠生存率（0）降低（P〈0.05）,且肺、肝及肾脏损伤明显加重;经AES治疗后,C组存活率（75%）明显增加（P〈0.05）,小鼠肺脏、肝脏及肾脏病理损伤亦显著缓解。3组小鼠血清中的促炎因子TNF-α（F=27.11,P〈0.05）、IL-1β（F=18.75,P〈0.05）及IL-6（F=100.93,P〈0.05）水平差异均有统计学意义;B组小鼠的促炎因子水平均高于A组（P均〈0.05）;经AES治疗后,C组小鼠上述3种促炎因子水平较B组均显著下降（P均〈0.05）。3组小鼠血清中的调节性细胞因子IL-10（F=10.88,P〈0.05）及TGF-β（F=11.37,P〈0.05）水平差异亦有统计学意义;经AES治疗后,C组小鼠IL-10及TGF-β分泌水平较B组亦明显增加（P〈0.05）。结论旋毛虫AES对CLP诱导的BALB/c小鼠脓毒症有显著的缓解作用。