滞育发动前家蚕滞育性与非滞育性卵的谷胱甘肽氧化还原循环状态分析

为了调查滞育和非滞育性家蚕卵的谷胱甘肽氧化还原循环在滞育发动前是否存在差异,利用分光光度法检测滞育发动前(25℃中蚕卵产下后0～24 h)滞育与非滞育蚕卵的谷胱甘肽含量和相关代谢酶活性。滞育发动前,滞育性家蚕卵中的还原型谷胱甘肽(GSH)含量、氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量、总谷胱甘肽(GSH+2GSSG)含量和GSH/GSSG比值变化不显著,谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性变化不显著,但硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)活性下降23%,谷胱甘肽还原酶(GR)活性升高57%;非滞育性家蚕卵中的GSH含量及TPX和GST活性变化不显著,但GSSG含量升高61%,GSH+2GSSG含量升高41%,GSH/GSSG比值下降33%,GR活性下降16%。与非滞育性家蚕卵相比,滞育发动前滞育性家蚕卵中的GSH含量、GSSG含量和GSH+2GSSG含量较低,GSH/GSSG比值较高,TPX活性较低,GST活性无显著差异,GR活性较高。两种蚕卵中都未能检测到谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和硫氧还蛋白还原酶(TrxR)活性。结果表明,滞育发动前滞育性家蚕卵中较低的TPX活性和较高的GR活性共同导致较高的GSH/GSSG比值,使其谷胱甘肽氧化还原循环处于相对还原态。

低温冷藏提高家蚕滞育卵NAD含量和胞质苹果酸脱氢酶活性

为了调查5℃低温处理是否改变家蚕Bombyxmori卵滞育NAD代谢,本研究利用HPLC和分光光度法测定了经25℃和5℃分别处理的滞育卵中NADH含量、NAD+含量、乳酸脱氢酶(LDH)活性和胞质苹果酸脱氢酶(cMDH)活性。结果表明:5℃处理的NAD(NADH+NAD+)含量和cMDH活性分别增加了106%和53%,并且显著高于25℃处理(P<0.01);但是两种处理的NADH/NAD+比值和LDH活性没有显著差异(P>0.05)。据此推测,5℃低温处理加强了家蚕滞育卵NAD+合成和再生能力。

即时浸酸显著提高滞育性家蚕卵辅酶Ⅰ和Ⅱ含量

即时浸酸在阻止家蚕Bombyx mori卵滞育发动的同时,提高了其呼吸耗氧量,抑制了山梨醇积累。本研究利用HPLC法测定了家蚕滞育卵和5min即时浸酸滞育性卵中辅酶Ⅰ和Ⅱ含量。结果表明:产下后24-72h,家蚕滞育卵中NAD,NADH,NADP和NADPH含量分别下降了30%,37%,50%和4%;而即时浸酸滞育性卵中分别增加了77%,46%,142%和241%。不过,即时浸酸并未显著改变滞育性家蚕卵中NADH/NAD和NADPH/NADP比值。据此推测,即时浸酸提高滞育性家蚕卵辅酶Ⅰ含量与其呼吸耗氧量增加有关;即时浸酸显著提高辅酶Ⅱ含量与山梨醇积累抑制无关,而主要与生物合成加强有关。

5龄期和吐丝期家蚕丝腺中的抗坏血酸含量及抗氧化作用变化

抗坏血酸(AsA)是家蚕生长发育的必需维生素之一,具有抗氧化的生理功能。用分光光度法测定5龄期至吐丝期家蚕丝腺中的抗坏血酸含量、脱氢抗坏血酸(DHA)含量、抗坏血酸氧化酶(AAO)活性、抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性和脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性,分析丝蛋白合成和分泌期间丝腺中抗坏血酸的抗氧化作用变化。结果显示在此期间丝腺中的AsA含量、总抗坏血酸(AsA和DHA)含量和AsA/DHA比值持续下降,DHA含量变化不显著,而没有检测到AAO和APX的活性,并且DHAR的活性在5龄期变化不显著,但在吐丝期持续下降。检测结果表明,伴随着丝蛋白的合成和分泌,家蚕丝腺中的抗坏血酸含量及抗氧化作用显著下降。

5龄期和吐丝期家蚕丝腺中的过氧化氢代谢与谷胱甘肽氧化还原循环特征

机体内的氧化还原状态对细胞的生命活动有着重要影响,而过氧化氢(H2O2)代谢和谷胱甘肽氧化还原循环与之密切相关。利用分光光度法检测5龄期和吐丝期家蚕丝腺中参与H2O2代谢与谷胱甘肽氧化还原循环调控的各种因子(氧化剂、还原剂和抗氧化剂)的含量变化。在2个时期的丝腺中未能检测到谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和谷胱甘肽还原酶(GR)活性。5龄期丝腺中的H2O2含量显著升高,超氧化物歧化酶(SOD)活性、氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量、还原型谷胱甘肽(GSH)/GSSG比值变化不显著,过氧化氢酶(CAT)活性、GSH含量、总谷胱甘肽含量、硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)活性和硫氧还蛋白还原酶(TrxR)活性显著下降。吐丝期丝腺中的H2O2含量、SOD活性、GSH含量、GSSG含量、总谷胱甘肽含量和TPX活性显著下降,CAT活性、GSH/GSSG比值和TrxR活性显著升高。检测结果表明,5龄期丝腺中的CAT活性和TPX活性下降是导致H2O2含量升高的原因,但是TPX活性和TrxR活性下降导致的GSH/GSSG比值变化并不显著;吐丝期丝腺中的SOD活性下降导致H2O2含量下降,TPX活性下降和TrxR活性升高导致GSH/GSSG比值升高。可见,家蚕丝腺中的H2O2代谢与谷胱甘肽氧化还原循环特征在5龄期和吐丝期存在显著差异。

樟巢螟滞育诱导特性的研究

为探求诱导樟巢螟(Orthaga achatina Butler)滞育的临界光周期及敏感虫态(期),在室内25℃和28℃下观察不同光周期对樟巢螟滞育的影响,并利用不同长光照和短光照组合对樟巢螟幼虫的不同龄期进行处理,掌握樟巢螟的敏感虫态(期)。结果表明光周期为L∥D=12.0h∥12.0h,L∥D=12.5h∥11.5h,L∥D=13.0h∥11.0h时,在25℃下,樟巢螟的滞育率分别为100%,94.80%和97.60%;在28℃下,滞育率分别为98.55%,99.05%和83.50%。当光周期为L∥D=13.5h∥10.5h,在25℃和28℃下,樟巢螟的滞育率分别为42.38%和34.05%。樟巢螟属长日照发育型昆虫,在25℃时诱导滞育的临界光周期是13.565h,在28℃时是13.364h。25℃时樟巢螟对光照反应最敏感的时期是4～5龄期,1～3龄次之,卵期最不敏感。

盐胁迫对绿豆下胚轴氧化还原态的影响

以150 mmol·L-1NaCl对绿豆下胚轴进行胁迫处理,测定其长度和鲜重以及GSH/GSSG、AsA/DHA、NADH/NAD+、NADPH/NADP+比值。结果表明,对照和处理48 h时上述指标分别相当于0 h时的493.1%与206.9%、661.0%与308.2%、118.1%与72.2%、444.4%与44.4%、96.6%与194.3%和97.1%与154.4%。可见,盐胁迫处理显著抑制绿豆下胚轴生长可能与其氧化还原态的显著改变有关。