应用HIV-1耐药性基因型检测广东部分地区HIV耐药株

目的利用艾滋病病毒1型(HIV-1)耐药性基因型检测法,在HIV-1感染者中监测HIV-1耐药性病毒株,掌握广东省HIV-1感染者在利用抗病毒药物治疗前是否存在耐药突变及其流行情况。方法从未接受高效抗逆转录病毒联合疗法(HAART)治疗的HIV-1感染者血浆中提取病毒RNA,采用套式PCR扩增目的基因片断,并对扩增片断进行序列测定和分析。结果HIV-1耐药性基因型检测法能够从HIV-1感染者血浆病毒载量大于1 000拷贝/ml以上、CD4低于400以下的样本中扩增到目的片断。在广东省50例未治疗对象中,低中度耐药相关突变例数为2例,占4%;高度耐药相关突变例数为0;总耐药相关突变例数为2例,占4%。结论HIV-1耐药性基因型检测法能有效地监测HIV-1感染者血浆中的耐药性病毒株的存在,并且方法提供的结果准确、可靠。对广东省未接受抗病毒治疗的HIV-1感染者中耐药突变的检测表明,HIV-1感染者中存在病毒的耐药性突变,也反应了HIV毒株自然变异情况的存在。

间接免疫荧光法在检测SARS冠状病毒特异性抗体中的应用

目的 利用间接免疫荧光技术 (IFA)建立SARS冠状病毒 (SARS -CoV)特异性抗体血清学诊断方法。方法 采用组织培养技术 ,用SARS病人的咽漱液样本 ,在Vero-E6细胞中培养 ,分离SARS冠状病毒 ;用已制备的SARS病毒抗原片与临床确诊为SARS的病人双相血清和正常人对照血清作用 ,再用荧光标记羊抗人IgM/IgG抗体与之结合 ,在荧光显微镜下观察荧光图像。结果 通过建立检测SARS冠状病毒特异性抗体的间接免疫荧光方法 ,在 4 4份SARS临床病例标本中 ,检出IgG抗体阳性 31份 ,与临床诊断符合率为 70 .4 5 %。 31份IgG阳性者的急性期血清中IgM检出率为 38.70 % ,IgM最早产生于发病第 3天 ,发病 7d以上的 6例的IgM抗体均为阳性 ,滴度在发病 1 2～ 1 5d达到高峰 (1∶80 ) ;恢复期血清中IgG抗体最早产生于发病第 8天 ,滴度在发病 1 5～ 2 0d达到高峰 (1∶32 0～ 1∶6 4 0 )。 97份正常人的血清标本中IgG抗体阳性率为 3 0 9% ,IgM抗体为阴性。结论 利用此方法 ,证实被SARS冠状病毒感染后 ,在机体中产生有特异性的IgM/IgG抗体 ;本方法检测结果与临床诊断符合率较高 。

应用基因工程表达抗原建立检测HP感染的ELISA诊断

应用基因工程表达的经过纯化的CagA和Hsp - 5 8二种抗原作为诊断抗原建立的酶联免疫吸附实验 (ELISA) ,对 87份不同型胃病及 2 0 0份正常人血清中抗幽门螺杆菌 (HP)抗体进行检测。结果证明 :在慢性胃炎和消化性溃疡病中HP感染占 76 %以上 ,尤其肠化生伴随萎缩胃炎HP感染占 10 0 %。所以该法特异性强 ,敏感性高 ,无创伤 ,检测时间短 ,操作简单 ,尤其适用于初筛非溃疡性消化不良和慢性胃炎中HP抗体的检测并可以指导药物治疗及效果的观察和流行病学调查 ,是一项简便、可靠。

五种SARS冠状病毒-IgG抗体检测试剂的比较

目的 比较五种SARS冠状病毒 IgG抗体诊断试剂 ,检测SARS冠状病毒特异性抗体的敏感性和特异性。方法 分别用间接免疫荧光 (IFA)和四种ELISA诊断试剂 (其中ELISA 1为全病毒抗原建立的间接法 ,ELISA 2为表达抗原片断建立的双抗原夹心法 ,ELISA 3/ 4为表达抗原建立的间接法 )检测IgG抗体。 10 0份血清标本分别采自发病 7d以上的临床确诊SARS病例 34例和疑似病例 4 2例、发病 6d以内临床确诊病例 1例和疑似病例 2 3例。结果 用IFA及四种ELISA诊断试剂检测 34份发病 7d以上临床确诊SARS病例的血清样本 ,其IgG检出率与临床诊断的符合率分别为 :IFA4 4 12 % ,ELISA 1、4为 4 1 17%、ELISA 2、3为 2 3 5 2 % ;对 4 2例疑似病例的检出率 ,IFA、ELISA 3为11 9% ,ELISA 1、2、4为 9 5 2 % ;发病 1～ 6d内的确诊和疑似病例血清中未能检出特异性的IgG抗体。结论 五种诊断试剂都可以帮助临床做出符合诊断和鉴别诊断 ,可以作为SARS血清学诊断方法 。

人血液和尿液样本HIV-1抗体的ELISA检测比较

目的 比较人的血液和尿液样本中HIV - 1抗体的一致性。方法 在广东省两所劳动教养所收集 346名HIV高危者的血液和尿液样本 ,分别用血液和尿液ELISA初筛试剂检测HIV - 1抗体。结果 346份血液和尿液样本各 18份阳性 ,其中有 17人的血液和尿液平行样本均为HIV - 1抗体阳性 ,血液和尿液样本HIV - 1抗体检测的一致性为 99.4 %。结论 在采集血液样本不便的情况下 。

两种方法检测流行性出血热IgG抗体效果评价

流行性出血热(EHF)是病死率高、对我国人民的健康危害较严重的急性传染病之一.为了更好地控制EHF,每年都对EHF的感染率进行监测.以往采用间接免疫荧光方法(IFA)对健康者进行EHF-IgG抗体检测,但感染率很低.基于此种情况,2000年采用IFA和ELISA两种方法检测EHF-IgG抗体,比较两者检测结果,为今后的检测方法提供科学依据.

广东省吸毒者HIV感染状况和危险因素调查

目的 了解广东省吸毒者HIV感染及相关危险行为因素。方法 对广东省戒毒所内戒毒者和社区吸毒者进行面对面调查 ,并采集静脉血 5ml进行HIV、HCV抗体检测。结果 共调查 655名吸毒者 ,HIV感染率为2 9 0 % ,HCV感染率为 91 6% ;吸毒者对有关艾滋病传播途径的综合知晓率为 65 3 % ;在最近一个月中 ,98 6%的吸毒者有静脉注射吸毒行为 ,且 42 1%有共用针具行为。共用针具的主要原因是毒瘾发作时没有注射器 ,占 80 5% ;吸毒者与临时性伴的安全套使用率为 2 1 3 % ,与固定性伴的使用率仅为 9 5%。结论 广东省吸毒者有较高的HIV和HCV感染率 ,感染HIV的相关危险行为普遍存在 ,应尽快采取有效措施 。

2002年广东省H3N2亚型流感病毒流行的分子基础

目的 了解广东省2002年H3N2亚型流感病毒流行及抗原性变异情况。方法 用狗肾传代细胞(MDCK)和鸡胚进行流感病毒分离,用交叉血凝抑制实验对毒株进行抗原性分析;提取病毒RNA,用一步法RT-PCR扩增血凝素基因(H3A),产物纯化后,并将其克隆到pMD18-T Vector,进行序列测定和分析。结果2002年1～10月共获得流感病毒246株,其中H3N2亚型210株,占85.4％,H1N1亚型2株,占0.8％,B型34株,占13.8％;2002年流感流行的高峰是6月;抗原性分析显示,2002年广东省H3N2亚型流感病毒A/粤/236/2002和2001年流行株A/粤/448/2001以及目前国内代表株A/闽/151/2001的抗原比分别是5.6和4.0;其HA1区氨基酸序列和国际代表株A/悉尼/5/97同源性为94.2％,有19个氨基酸差异,其中发生在抗原决定族A、B、E上的有6个,受体结合部有3个。结论2002年广东省流感病毒以H3N2亚型为主,其流行的分子基础是基因变异导致抗原性发生漂移。

SARS灭活病毒免疫兔后IgG特异抗体应答

将灭活的SARS冠状病毒抗原每隔两周多点注射免疫兔,共免疫3次,以观察SARS灭活病毒免疫兔后兔血清中IgG特异性抗体的应答变化。免疫前及第一次免疫后第8、14、21、28、35天耳静脉取血,分离血清。间接ELISA法测得血清中特异性IgG抗体持续升高,并表现出一定的剂量依赖性。第35天G1、G2、G3组血清IgG抗体滴度分别为1∶51200、1∶49600、1∶25600;中和试验测得G1组第28天血清样品中和抗体效价为1∶2560;蛋白芯片测得M、N、3CL、S1、S2、S3、S4等病毒蛋白抗原都可特异性结合抗血清中的IgG抗体,但是不同蛋白抗原结合能力有差别。因此可认为SARS灭活病毒经皮下注射免疫兔后,可诱导全身性IgG抗体应答,产生SARS冠状病毒特异性抗体。

BALB/C小鼠对不同佐剂SARS灭活疫苗的早期免疫反应

目的 :研究含不同佐剂的SARS灭活疫苗免疫小鼠后 ,小鼠的早期细胞免疫和体液免疫反应。方法 :灭活的SARS冠状病毒F6 9株分别与弗氏佐剂、氢氧化铝、CpG佐剂配伍 ,制备灭活疫苗。接种 6周龄SPF级BALB C小鼠。定时采血 ,分析小鼠外周血中CD4 + 、CD8+ T细胞亚群动态变化 ,同时测定鼠血清中特异性IgG抗体及抗体的病毒中和活性。结果 :由3种佐剂制备的SARS灭活疫苗免疫小鼠后 ,CD4 + 、CD8+ T细胞百分比升高或无明显改变 ,CD4 CD8比值无显著性改变。其中 ,弗氏佐剂疫苗免疫小鼠的CD4 + T细胞百分比升高较明显 ,且在一段时间内 ,维持在一个较高的水平 ;铝佐剂疫苗免疫小鼠后 ,未观察到明显T细胞亚群改变 ;而CpG佐剂疫苗免疫小鼠的CD8+ T细胞百分比改变较其它佐剂疫苗改变更明显。与此相异的是 ,3种疫苗均可诱导小鼠产生较高滴度特异性IgG抗体 ,并且所产生的抗体具有中和活性。在初免后第 34天 ,3种佐剂组的IgG抗体滴度分别为 1∶1 2 80 0、1∶32 0 0和 1∶1 6 0 0 ,中和效价分别为 1∶2 5 6 0、1∶96 0和 1∶32 0。结论 :SARS灭活疫苗接种小鼠后 ,可诱导较强的体液免疫反应 ,同时轻度上调CD4 + 、CD8+ T细胞活性 ,程度因佐剂而异。

2003年广东省流感病毒的流行概况及特征

目的了解2003年广东省流感病毒的流行特点和抗原变异情况。方法根据广东地区流感监测资料进行分析;用交叉血凝抑制试验检测病毒的抗原性;用逆转录-聚合酶链反应扩增病毒HA1基因,纯化产物进行核苷酸序列测定,将序列和Genebank中相关序列进行比较,用MegAlign软件绘制种系发生树。结果全年分离到510株流感病毒,其中H3N2亚型流感481株,占92.4%;乙型流感29株,占7.6%。实验室证实流感爆发52起,其中50起暴发是由H3N2亚型流感病毒引起,2起暴发是由乙型流感病毒引起。H3N2亚型流感病毒抗原性和疫苗株A/Panama/2007/99(H3N2)有所不同。类似于A/Fujian/411/02(H3N2)。在HA1区氨基酸序列上,和疫苗株A/Panama/2007/99(H3N2)同源性为92.1%,存在有25个氨基酸差异。28株乙型流感病毒属于Victoria系,抗原性类似疫苗株B/HongKong/330/01,1株乙型病毒属于Yamagata系,抗原性不同于B/Sichuan/379/99。结论2003年广东省流感活动比2002年要强;同时流行着甲型(H3N2)和2个谱系的乙型流感病毒,H3N2亚型毒株是优势株,抗原性发生了漂移。

广东省2000～2001年HIV/AIDS监测结果分析

目的 分析广东省各高危人群艾滋病病毒/艾滋病(HIV/AIDS)的感染情况及高危行为,寻找适当的干预措施。方法 对广东省2000-2001年HIV/AIDS常规、哨点、行为监测资料进行分析。结果全省2000-2001年共报告HIV/AIDS 1874例,感染者主要分布在珠江三角洲地区,但已开始向周边地区蔓延;静脉吸毒是目前的主要感染途径,占81.3％,性途径占3.7％;感染者中90.6％是男性,女性为9.4％;16-35岁的青壮年是最主要的感染人群,占79.4％;吸毒者HIV阳性检出率最高,其次为暗娼和性病门诊就诊者,分别为2.31％、1.02％、0.18％,;静脉吸毒者中有52.69％共用针具;暗娼中仅有32.13％的人每次使用安全套。结论广东省HIV/AIDS流行范围正在不断扩大,静脉吸毒者中共用注射器情况仍然严重,性乱人群中安全套的使用率仍然偏低;当前工作重点是尽快采取适当的行为干预措施,促使高危人群改变其高危行为,减少危害,预防HIV/AIDS从吸毒人群向暗娼以及一般人群传播。

中国肾综合征出血热林区自然疫源地调查研究

通过对林区肾综合征出血热（HFRS）自然疫源地的监测研究，了解了小兽组成、优势鼠种及带病毒率。优势种长白山林区为大林姬鼠和棕背；小兴安岭林区为黑线姬鼠和大林姬鼠；大兴安岭林区为黑线姬鼠和莫氏田鼠；阿尔泰林区为红背和棕背；贵州绥阳林区为社鼠；安徽大别山林区为黑线姬鼠。优势鼠种带病毒率较高。原始森林与经济开发林区比较，后者一些栖息农田草原及家栖鼠已经侵入，前者则为林栖种类；没有非林区鼠侵入的原始森林目前未发现病毒抗原阳性。

广州市2003年HIV抗体初筛实验室质量评价

目的提高技术人员专业素质,提高实验室工作质量,促进全市艾滋病病毒(HIV)抗体初筛实验室的规范化建设,也为全国各省市HIV检测实验室的质量管理和质量评价提供参考。方法采用考评的方式:(1)发放一套质评血清(3份强阳性,2份弱阳性,5份阴性);(2)采用问卷方式对各实验室的职能和质量管理工作进行调查;(3)根据质评血清检测和调查问卷填写的结果,抽取10家实验室进行现场实地考查。结果本市的49家初筛实验室参加考评,质评血清考核和问卷调查综合评分结果:优秀7家,良好24家,合格18家。现场实地考查结果,5家实验室顺利通过,5家被勒令整改。结论考评结果显示:广州市初筛实验室的质量水平均能满足目前工作需求,但按《全国艾滋病检测工作规范》要求,各实验室仍缺乏全面、系统、规范的质量管理体系,人员专业素质及检测技术水平还有待提高。

广东省不同地区吸毒者HIV相关危险行为的研究

目的 了解广东省不同地区吸毒者感染艾滋病病毒 (HIV)的相关危险行为因素 ,以及HIV、丙型肝炎病毒 (HCV)的流行状况。方法 选取 3个市的戒毒所内戒毒者和社区吸毒者进行面对面问卷调查 ,并采集静脉血5ml进行抗 HIV、抗 HCV检测。结果 共调查 6 5 5名吸毒者 ,3个市抗 HIV阳性率分别为 4 0 4 %、2 6 9%和17 6 % (χ2 =2 7 5 4 ,P<0 0 5 ) ;最近 1个月 3个市内吸毒者静脉吸毒 (IDU)的分别为 98 7%、98 7%和 98 4 % ;共用针具的分别为 6 2 8%、33 5 %和 6 8 7% (χ2 =4 5 83,P <0 0 5 ) ;吸毒者首次静脉注射毒品的平均年龄为 2 4 8岁 ,由口吸转为注射毒品的平均年限为 2 7年 ;3个市吸毒者与临时性伙伴的安全套使用率分别为 9 5 %、2 2 6 %和 2 8 6 %。结论 3个市静脉吸毒、共用针具现象普遍 ,共用频率高 ,安全套使用率低 ,但 3个市吸毒者的HIV相关危险行为具有一定差别 ,需进一步研究其潜在的社会背景。

广东省珠江三角洲地区吸毒者HIV感染状况调查

目的 了解广东省珠江三角洲地区吸毒者HIV的感染状况及其相关危险行为 ,为在该人群中开展干预策略提供依据。方法 对该地区戒毒所内戒毒者和社区吸毒者进行面对面调查 ,并采集静脉血 5ml进行HIV抗体检测。结果 共调查 6 5 5名吸毒者 ,HIV感染率为 2 9 0 % ;有静脉注射毒品 (IDU)史者占 99 5 % ,其中曾有共用针具行为的占 75 4 % ;曾经注射毒品是感染HIV最危险的因素。结论 广东省珠江三角洲地区吸毒者有较高的HIV感染率 ,静脉注射吸毒是HIV感染的主要因素。应尽快采取有效的减少危害的措施 。

黑龙江省自然人群乙肝疫苗的应用和预防效果的调查

采用随机整群抽样的方法，在省内１０个疾病监测点内调查１～５９岁人群３２７４人，其中农村１８５５人，城市１４１９人。问卷收集流行病学数据，采血并用ＲＩＡ法检测ＨＢｓＡｇ，抗－ＨＢｓ和抗－ＨＢｃ。结果显示，我省人群乙肝疫苗接种率为９．７％，城市高于农村，分别为１５．２％和５．６％，并且年龄越小接种率越高。城市５岁以下高达６７．０％，而２０岁以上成人仅２．７％。接种组的ＨＢｓＡｇ，抗－ＨＢｓ、抗－ＨＢｃ和ＨＢＶ感染率分别为４．７％、５１．４％、２４．５％和２５．７％；而未接种组分别为１０．３％、２６．１％、４６．４％和５３．３％。两组间差别有显著性意义，而且这种差别与年龄相关。

广东省1995～2001年HIV抗体阳性献血员合并HBV、HCV、梅毒感染状况调查

目的 了解广东省 1995～ 2 0 0 1年献血员HIV流行的特征及与其他传染病合并感染情况 ,为制定HIV经血源传播防治策略提供依据。方法 收集 1995～ 2 0 0 1年广东省HIV抗体阳性献血员资料进行分析 ,并进行HBV、HCV和梅毒血清学检测。结果 1995～ 2 0 0 1年 ,广东省累计HIV抗体阳性献血员 16 7例 ,占全省报告HIV感染者总数的 5 4 4 % (16 7/ 30 72 ) ,且献血员中HIV抗体阳性人数逐年增长。 16 7例病例中以男性为多 (88 0 2 % ) ;年龄主要集中在 2 0～ 2 9岁组 (5 5 0 9% ) ;病例送检地区以广州、深圳和东莞为主 ;其原籍主要是广东省和河南省。 12 8例HIV抗体阳性献血员中抗 HCV、梅毒抗体及HBsAg阳性率分别为 79 6 9%、7 81%及 3 13% ,HIV/HCV/梅毒、HIV/HBV/HCV、HIV/HBV/梅毒三重感染率分别为 7 81%、3 13%及 0 ,未发现四重感染者。结论 广东省HIV抗体阳性献血员合并HCV和梅毒感染率高。应加强献血员的筛查及流动人口的管理 ,以控制HIV、HBV和HCV经献血员向一般人群传播。

不同温度对SARS冠状病毒抗原性灭活效果的研究

目的 探讨用温度灭活的SARS冠状病毒作为免疫用抗原的可行性。方法 采用细胞培养、酶联免疫吸附试验 (ELISA)对灭活前后SARS冠状病毒感染性和抗原性进行检测。结果 5 6℃、30min对SARS冠状病毒感染性的灭活率为 99 99% ;5 6℃、6 0min对SARS冠状病毒感染性的灭活率为 1 0 0 .0 0 % ;检测病毒灭活前、灭活 30min、灭活 6 0min抗原性P/N值分别为 5 4 4、3 0 2、2 72。结论 随着灭活时间的延长 ,病毒的抗原性降低 ,5 6℃、6

灭活SARS冠状病毒疫苗对小鼠脏器影响的实验研究

目的 :探讨灭活SARS冠状病毒疫苗对小鼠是否有损伤作用。方法 :用灭活SARS冠状病毒分别免疫BALB/c和C5 7BL/ 6小鼠 ;ELISA法检测小鼠血清中抗SARS冠状病毒抗体水平 ;免疫 8周后取小鼠各脏器 ,观察其病理形态学改变。结果 :免疫 8d后 ,小鼠血清中就可检测到特异的IgM、IgG抗体 ;组织切片染色观察 ,可见少数小鼠肺及肝组织出现轻度损伤 ,其他脏器未见病变。结论 :SARS冠状病毒灭活疫苗可诱导小鼠产生特异性抗体 ,同时没有造成严重的器官损伤。