杏鲍菇漆酶部分酶学性质的研究

漆酶是一种含铜多酚氧化酶,可以氧化分解各种酚类染料、芳香胺等,由于漆酶具有相当宽泛的底物专一性和较好的稳定性,漆酶在废水处理、生物漂白、芳香化合物转化、生物传感器构建等方面具有重要应用价值。从多种新鲜食用菌子实体中提取漆酶,发现杏鲍菇漆酶的酶活性最高,对其酶学性质的研究对今后漆酶的应用提供有价值的理论数据。漆酶提取液通过硫酸铵分级沉淀、透析制备漆酶粗酶液。采用分光光度法,以ABTS[2,2′-Azino-bis（3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid）]为底物测定漆酶活力。结果表明,杏鲍菇漆酶的最适反应温度为45℃。该酶在50℃以下保温1-4h,酶活损失很小,但当温度超过70℃时,酶活力损失较大。但漆酶的贮存稳定性相对较高,酶液在4℃下保存近60天后仍残留60%的酶活性。杏鲍菇漆酶的最适pH为3.0;漆酶在pH4.0-8.0,25℃保温1-10h酶活力损失15%-25%,但在pH2.0-3.6,25℃保温1-10h酶活力损失40%-60%。金属离子对漆酶活性有明显的影响作用,Ca^2＋、Mn^2＋、Fe^2＋、Ag^＋对酶的活性有抑制作用,Na^＋、K^＋、Mg^2＋、Cu^2＋、Pb^2＋、Zn^2＋对酶的活性有促进作用。从上述实验结果可以得出结论：杏鲍菇漆酶在50℃以下保温，相对酶活性及热稳定性均较好。最适温度为45℃。但当温度超过70℃时，酶活性被强烈抑制。杏鲍菇漆酶的最适pH为3．0，表明该酶可以在较酸的环境中发挥作用。金属离子作为酶的辅助因子可以激活或抑制漆酶的活性。

胰蛋白酶抑制剂在不同领域的研究概况

胰蛋白酶抑制剂是一类具有胰蛋白酶抑制作用的物质 ,该类物质的来源不同 ,其活性和作用的方式也不同。对其在医药领域、植物抗病虫害。

牛初乳对仔猪血清抗氧化酶活性及丙二醛水平的影响

以饲喂牛初乳的仔猪血清为材料,测定了其中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛水平。结果显示,超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶明显上升,丙二醛含量下降,提示牛初乳粉可提高仔猪抗氧化水平。

水分胁迫对板栗幼苗过氧化物酶、超氧物岐化酶活力及同工酶谱的影响

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳研究了水分胁迫下板栗幼苗过氧化物酶、超氧物岐化酶同工酶谱的变化，并分别测定了酶活力．结果表明：随胁迫处理时间的延长，两种同工酶的谱带都发生变化，诱导出新的谱带；轻度中度胁迫下，两种酶的活力明显增加，随胁迫程度的增强，酶活性增加缓慢．

牛初乳中几种重要酶及其生物功能的研究进展

牛初乳是指奶牛产犊后几天内所分泌的乳汁,含有丰富的营养成分。目前已在初乳中测出50余种酶,它们具有重要的生物功能。因此,牛初乳不仅是新生幼儿及仔畜最理想的食品,也是优良的纯天然保健食品。笔者介绍8种牛初乳中存在的酶,并对其功能和酶活力变化作简要阐述。

牛初乳在畜牧生产中的研究与应用

阐述了牛初乳的营养成分及生理活性物质的种类、来源及功能,并介绍其在畜牧业生产中的应用情况。

牛初乳IgG对仔猪增重和血液指标的影响

选取10窝1日龄大白仔猪60头,随机分为3组。按不同剂量(0、500mg、1000mg)灌服牛初乳IgG,分别测定不同处理组仔猪日增重、血清总蛋白含量、血清牛IgG浓度,旨在探讨新生仔猪吸收异源IgG能力及异源IgG对仔猪生产性能及机体免疫功能的影响。结果显示,灌服IgG1000mg的仔猪,0～15日龄日增重、5、10日龄血清总蛋白含量显著高于对照组(0)(P<0.05),实验组5日龄血清牛IgG浓度较高,并能有效降低仔猪腹泻头次。

间接竞争ELISA检测兔肉中氯霉素残留方法的确定

建立了快速定量测定氯霉素(CAP)含量的间接竞争酶联免疫吸附试验方法。游离氯霉素与氯霉素辣根过氧化物酶标记物(HRP)在同一系统中竞争数量有限的氯霉素抗体结合位点,氯霉素酶标记物与氯霉素抗体结合的数量反比于游离氯霉素的数量。氯霉素浓度在0.2～20μg·ml-1范围内具有良好的线性关系回归方程为y=0.8327-0.5260x,r2=0.9862;测定低限为20ng·ml-1;方法平均回收率为83.5%,符合目前国际上氯霉素残留量检测的要求。

牛不同生长发育时期卵泡酶活性及定位

应用组织化学方法观察牛卵巢卵泡中葡萄糖 - 6 -磷酸酶 (G - 6 -P酶 )和碱性磷酸酶 (AP)在不同发育时期的活性变化及其在卵泡内的定位。旨在探讨这两种酶的活性同卵泡生长发育的关系。结果表明 :不同发育时期的卵泡数量与AP和G - 6 -P酶活性阳性反应呈极显著正相关。其中酶活性阳性反应有腔卵泡数量多于腔前卵泡 ;但G - 6 -P酶活性阴性反应卵泡显著多于阳性卵泡 ,说明AP活性强于G - 6 -P酶。腔前卵泡酶活性位置主要在颗粒细胞和卵母细胞上 ,而有腔卵泡酶活性位置主要在内膜细胞上。

不同染色方法对牛卵泡AP和G-6-P酶染色效果的影响

应用组织化学手段对牛卵巢卵泡中碱性磷酸酶(AP)和葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P酶)进行酶活性反应显示和定位。旨在探讨不同染色方法对酶活性反应显示的影响,以便更好的观察不同发育时期卵泡内酶的定位和酶活性反应的强弱。结果表明:AP检测效果实验Ⅰ组好于实验Ⅱ组和对照组,其卵巢组织结构及卵泡形态非常清晰,切片背景为兰色,酶活性处呈现黑色沉淀,各期卵泡酶的反应显示较好。G-6-P酶检测效果实验Ⅱ组好于实验Ⅰ组和对照组,其卵巢组织结构及卵泡形态比较清晰,切片背景为浅粉色,酶活性反应处呈现棕色沉淀,酶活性反应显示较好。说明不同染色方法对酶活性反应观察效果不同。牛卵巢卵泡不同发育时期、不同的结构部位,酶的活性具有强弱不同的反应性。

牛卵巢黄体状况与腔前卵泡采集数量的关系

:根据牛离体卵巢黄体的不同状况 ,将 31枚卵巢分为 5种类型 ,并采用机械方法分离腔前卵泡 ,观察不同黄体状况卵巢与腔前卵泡采集数量的关系。结果表明 ,火山口型、圆锥型和蘑菇型 3种大黄体的卵巢腔前卵泡采集量多 ;扁平片状和表面无黄体型卵巢腔前卵泡采集量较少。具有黄体状况的卵巢初级卵泡 ( Pm)采集数量多于无黄体类型卵巢 ;原始卵泡 ( Pf)以 3种黄体较大的卵巢采集数量最多 ;次级卵泡 ( Sc)则以黄体为火山口型卵巢为最多。说明卵巢黄体状况不同 ,其腔前卵泡采集数量有所不同。

酶抑制法检测4种辛辣蔬菜农药残留假阳性消除的研究

选用实际检测中易出现假阳性现象的韭菜、蒜苗、蒜黄、大蒜4种蔬菜为材料,利用酶抑制法检测农药残留,并对样品前处理步骤进行改进,增加了对样品提取液加热处理,达到消除假阳性的目的。结果表明,对样品提取液进行适当加热可以起到消除假阳性的作用,且不会造成残留农药的损失。蒜苗、蒜黄、大蒜、洋葱的最佳处理温度分别为110℃,100℃,120℃,80℃,在达到相应最佳消除温度后,假阳性影响消失,且加热时间对假阳性影响不显著。笔者认为,辛辣蔬菜中含有的某种特殊物质可能抑制乙酰胆碱酯酶的活性,使其不能与底物充分结合,从而干扰检测结果,产生假阳性现象。经过加热处理后,可能使蔬菜样本内某种物质分解,乙酰胆碱酯酶的活性不再被抑制,假阳性现象得以消除。

4种常绿阔叶植物越冬期间叶片组织POD、SOD活性和MDA含量的变化

研究了在北京地区栽培的4种常绿阔叶园林植物的叶片组织过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量在秋冬季的变化。结果表明,4种植物叶片组织的POD活性在秋冬季出现2次明显的上升。北海道黄杨、大叶黄杨和金心黄杨叶片组织的SOD活性随着室外温度的降低不断增加,在室外平均气温接近冬季最低气温时达到最高值,这3种植物叶片组织的MDA含量与SOD活性有相关性。整个秋冬季期间,扶芳藤的SOD活性和MDA含量始终呈增加趋势。

胞外及胞内Ca^(2+)共同参与拟南芥中茉莉酸诱导的钙动员

【目的】探究茉莉酸(Jasmonic acid,JA)诱导的钙动员的来源及钙调素(CaM)在JA信号通路中的作用。【方法】以拟南芥(Arabidopsis thaliana columbia)为材料,采用不同类型的离子通透性通道抑制剂(或拮抗剂)预处理拟南芥叶肉细胞,利用激光共聚焦显微镜检测其对JA诱导的[Ca2+]cyt升高的影响;同时还利用上述拮抗剂、钙调素(CaM)拮抗剂处理10d的拟南芥幼苗,采用Northern blot方法检测了其对JA诱导的VSP表达的影响。【结果】胞内及胞外钙离子共同参与JA诱导的钙动员,JA诱导的Ca2+通过CaM或CaM相关蛋白进一步传递JA信号。【结论】质外体钙离子的流入和胞内钙库中钙离子的释放均参与JA诱导的钙离子动员,Ca2+可能通过CaM或CaM相关蛋白传递JA信号,进一步诱导JA反应基因的表达。

牛腔前卵泡的体外培养

通过在α- MEM和 D- MEM/ F1 2 基础液中添加不同比例的 ITS、丙酮酸钠、谷氨酰胺、次黄嘌呤和血清 ,观察了不同基础液对牛腔前卵泡体外生长发育的影响 ,从而筛选出较好的组别。在筛选出的基础液组别中添加 3个水平的FSH、L H、E2 ,观察了其对牛腔前卵泡体外生长发育的影响。结果表明 ,α- MEM和 D- MEM/ F1 2 2种基础液中以α-MEM为好 ,不同的基础培养液组合对牛腔前卵泡的体外培养有一定的影响。添加不同水平的激素对牛腔前卵泡体外培养也有显著影响。试验初步筛选出最佳的培养液成分为α- MEM+ITS(I- 5 m g/ L ,T- 5 mg/ L ,S- 5μg/ L ) +丙酮酸钠(0 .2 3mmol/ L) +谷氨酰胺 (1.5 m mol/ L) +次黄嘌呤 (2 m mol/ L) +血清 (7.5 % ) +FSH(0 .2 5 mg/ L) +L H(5 IU/m L ) +E2 (0 .5 mg/ L )。

有机微量元素对肉仔鸡血液生化指标和生产性能的影响

选用 3 0 0只 AA肉仔鸡 ,随机分为 5组。在基础日粮的基础上 ,分别添加 0 %、0 .2 %、0 .3 %、0 .4%、1 .2 %的有机微量元素。 7周后每组随机抽取 1 0只鸡 ,心脏采血 ,测定血清总蛋白、总氨基酸、血糖、α-淀粉酶、谷胱苷肽过氧化物酶的活性 ,并测定总增重、平均日增重、耗料量和料肉比。结果表明 ,添加 0 .3 %有机微量元素的肉仔鸡 ,其血清总蛋白、总氨基酸、血糖水平和α-淀粉酶、谷胱苷肽过氧化物酶的活性均显著高于对照组 ( P<0 .0 5 ) ,其总增重也显著高于对照组( P<0 .0 5 )。

茉莉酸类物质的生物合成及其信号转导研究进展

茉莉酸(JA)是脂类起源的并在植物界广泛存在的一种重要的信号分子,在植物防御生物和非生物胁迫反应及植物的生长和发育过程中起着重要作用.文中介绍了茉莉酸生物合成,钙离子在茉莉酸信号传导中的作用及其钙离子的来源,环核苷酸门控的离子通道可能参与JA诱导的质外体钙离子动员等,并对该领域今后的研究进行展望.

Ca^(2+)和茉莉酸对菠菜CBF表达的影响

为探究钙离子、茉莉酸(Jasmonic acid,JA)对菠菜CBF转录因子表达的影响。以菠菜(Spinacia oleraceaL.)为材料,对其进行低温(4℃)或JA处理或用钙离子载体A23187预处理菠菜幼苗,利用Northern印迹技术检测各处理时CBF的表达情况。结果表明,低温和JA均可诱导菠菜中CBF基因的表达。推测低温可能首先导致细胞中JA含量升高,JA通过一定的机制诱导细胞质基质中游离钙离子浓度([Ca2+]cyt)升高,然后Ca2+可能通过CaM(Calmodulin)或CaM相关蛋白传递低温信号,从而诱导CBF的表达。

牛初乳免疫球蛋白对仔猪血清IgG含量和增重的影响

试验选用120头大白仔猪,随机分为3组。A组为对照组,饲喂生理盐水,其余各组均于出生后24 h之内饲喂不同剂量的牛初乳免疫球蛋白制剂,观察对仔猪5、10日龄血清中牛IgG和猪IgG含量以及断奶时增重的影响。结果表明,饲喂牛初乳免疫球蛋白制剂4 g的仔猪,其5、10日龄血清中牛IgG和猪IgG含量显著高于对照组(P<0.05),断奶时增重显著高于对照组(P<0.05)。