间接ELISA检测牛分枝杆菌抗体方法的建立及初步应用

针对现行牛结核病检疫方法结核菌素皮内变态反应(TST)的不足,本研究选用牛分枝杆菌特异性抗原MPB83、MPB70及CFP10与ESAT-6融合蛋白(CFP10-ESAT-6)分别建立了检测牛分枝杆菌特异抗体的间接酶联免疫吸附方法(ELISA)。上述3种抗原中一种以上抗原的特异性抗体为阳性时,即可判断为结核检测阳性。以TST为标准,判断ELISA方法的敏感性与特异性。结果证明,ELISA方法具有较好的敏感性(71.4%)。对ELISA检测为强阳性的奶牛进行细菌分离,并对5头结核菌分离阳性奶牛进行TST检测,结果有3头为TST阳性,2头可疑,显示出ELISA方法对严重感染牛的检测较TST具有更高的敏感性。由于TST与ELISA分别以细胞免疫与体液免疫为基础,两种检测方法结合应用可进一步提高牛结核病的检出率。

牛型分枝杆菌MPB70蛋白胶乳凝集方法的建立及应用

为了研究牛结核病新型诊断试剂,提高诊断的特异性和敏感性,我们用大肠杆菌工程菌表达了牛型分枝杆菌特异性抗原MPB70并提纯蛋白建立了牛结核病乳胶凝集试验(LAT)诊断方法。MPB70是一种牛型分枝杆菌特异性分泌而卡介苗BCG缺失的蛋白质,热稳定性好,用此蛋白建立的乳胶凝集方法具有良好的敏感性、特异性以及较长的保存期,检测70份临床奶牛血清,与皮内变态反应和间接血凝方法相比较分别具有71.4%和88.6%的符合率。该方法还可鉴别诊断自然感染和疫苗免疫接种。我们建立的牛型分枝杆菌MPB70蛋白乳胶凝集试验诊断方法将分子生物学手段和经典试验方法有机结合,为临床快速检测牛结核病血清特异性抗体水平提供了行之有效的方法,。

复合芽孢杆菌对蛋鸡粪便微生物及蛋品质的影响

试验选取日龄相近的两栋海兰褐蛋鸡,1栋为对照组(饲喂基础日粮),1栋为试验组(在基础日粮中添加1 g/kg复合芽孢杆菌),研究复合芽孢杆菌对蛋鸡粪便微生物及蛋品质的影响。结果显示,与对照组相比,在30 d时,试验组蛋鸡粪便中的“沙门+志贺”氏菌数显著降低(P<0.05),芽孢杆菌数显著增加(P<0.05);在60 d时,试验组细菌总数、大肠菌群数显著降低(P<0.05),芽孢杆菌数显著增加(P<0.05),蛋黄比率显著增加(P<0.05);在90 d时,试验组细菌总数、大肠菌群、“沙门+志贺”氏菌数显著降低(P<0.05),蛋黄颜色显著增加(P<0.05)。结果表明,在蛋鸡日粮中添加复合芽孢杆菌,可显著降低蛋鸡粪便中的有害微生物数量,改善蛋鸡肠道健康,并可显著提高鸡蛋的蛋黄比率和蛋黄颜色,改善蛋品质。

猪伪狂犬病最新研究进展

猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)感染是由猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的一种多种动物共患的急性接触性传染病。从流行病学、诊断分析、控制策略和面临的挑战等方面综述了中国PR的现状,以期为中国预防、控制及根除PR提供参考。

两种甘草型功能蜂蜜的质量分析及比较

通过对2种方法生产出来的甘草型功能蜂蜜从外观、营养指标、微生物指标、活性成分含量以及离体抗氧化指标进行了比较分析。结果表明,只要蜂蜜生产者从源头起的各个环节做好保品质的工作,严格把关生产中每个细节,优化生产工艺,做好蜂产品的深加工是可行的。用本项目选取的蜜制工艺生产的功能性蜂产品(蜜甘草)可以与蜜酿蜜甘草媲美,可以用科学的蜜制方法替代蜂蜜的蜜酿手段。

不同工艺对甘草型功能蜂蜜活性成分及抗氧化功能的影响

通过对2种方法生产出来的甘草型功能蜂蜜活性成分含量以及离体抗氧化指标进行了比较分析。结果表明:只要从源头抓好各个环节的品控工作,严格把关生产中每个环节,优化生产工艺,做好蜂产品的深加工是可行的——用该文选取的蜜制工艺生产的功能蜂蜜——蜜甘草可以与蜜酿蜜甘草媲美,可以用科学的蜜制方法替代蜂蜜的蜜酿手段。

妊娠失败牛外周血中干扰素刺激基因和细胞因子的表达分析

为了探究牛人工授精后妊娠失败的原因,本研究分析了妊娠失败牛外周血干扰素刺激基因和细胞因子等的表达变化。试验选取11头健康状况良好、体况相近的未孕奶牛,采集人工授精后0d、18d和28d的血液样本,结合28d血清PAG检测和42d直肠触诊,对确定为妊娠失败牛的血液样本进行分析。结果表明,与0d相比,人工授精后18d血液RSAD2、MX1和RTP4 mRNA的表达均呈上调趋势,但无显著差异;18d时IL-2 mRNA的表达显著高于0d,IL-10和CCL8 mRNA的表达显著低于0d,IFN-γ、IL-4和CXCL10 mRNA的表达均呈上调趋势,但无显著差异。说明妊娠失败与胚胎发育早期母体免疫失调及妊娠识别能力不足有关。

从小鼠类ES细胞分化群中分离培养一类衍生细胞及其培养特性

将小鼠囊胚在饲养层、无类LIF因子的培养基中培养出类ES细胞团,将该类ES细胞团传至第三代,暂停传代,继续培养,则4～5 d后该细胞团会向周围分化出一种圆而发亮的衍生细胞,该衍生细胞会不断地向周围生长,约20 d后该衍生细胞铺满培养皿底.将该衍生细胞传至铺有饲养层的培养瓶中继续传代至第七代,再将其传代至无饲养层的培养瓶中,约12 d后,其在无饲养层的培养瓶中长满瓶底.以后随着传代数的增加,该细胞长满瓶底所需时间越来越短,最后稳定在2～3 d.对传代至第30代的细胞进行生长曲线测定,并以不同的基础培养基、不同的血清浓度、不同的胰岛素浓度等条件培养该细胞,结果发现:该衍生细胞分别在DMEM高糖、DMEM低糖、DMEM-F12、PRMI1640等为基础的培养基中都能生长,但以DMEM-F12为最优.在血清浓度分别为10%、14%、18%的DMEM高糖培养基中培养显示:该细胞在高浓度血清的培养基中具有生长更好的趋势.在胰岛素浓度分别为0、0.25、0.5、1 μg/ml的DMEM高糖培养基中培养显示:该细胞在无胰岛素的培养基中无法正常生长,在0.5 μg/ml胰岛素浓度的培养基中生长最佳.

武汉市养蜂基地移动养蜂平台调研报告

一、养蜂车概述养蜂车是现代化的养蜂方式,有较好的养蜂收益,能吸引年轻人从事养蜂行业,可以缓解我国目前养蜂老龄化的现状.功能合理的养蜂车可以快速转场放养,不但提高了蜂农的经济效益,促进养蜂业的繁荣,而且可以使更多的农作物得到蜜蜂的授粉,具有重大的社会意义.

武汉市现代都市农业产业技术体系养蜂基地的移动养蜂平台调研报告（下）

在对武汉地区养蜂车的使用情况进行详细调查后,结合武汉地区的蜂农养蜂情况,做出针对性的分析和总结,然后给武汉市农业农村局相关管理部门提出合理化建议:需国家政策扶持,养蜂车生产厂家标准化管理,补贴政策公开透明、补贴款及时到位,做好养蜂车生产厂和使用者之间的协调工作,制定养蜂车补贴流程,开启绿色通道,加大养蜂车研发经费的支持力度。通过建议让领导决策者在三农以及精准扶贫工作中做出正确有效的决策,促进武汉地区养蜂业的健康快速发展。

武汉市现代都市农业产业技术体系养蜂基地的移动养蜂平台调研报告(上)

为了给武汉政府管理部门制定三农决策提供依据,为武汉地区养蜂业发展建言献策,本文对武汉地区养蜂车的使用情况进行了详细调查。结果发现:目前武汉地区使用的养蜂车,其构造类型有:大型车A、大型车B、小型车C;其功能区有:驾驶区、蜂农旅居区、蜜蜂养殖区、辅助功能区;其分布情况为:江夏5辆、新洲7辆、黄陂3辆、淘汰5辆,共20辆;使用养蜂车的优点有:转地迅捷方便、降低蜂农劳动强度,蜜源丰富、节约饲料、经济效益高,提高了蜂蜜的产量和质量,对蜜蜂造成的应激小、蜂群损失小,使养蜂业向规模化、规范化转变;使用养蜂车的局限有:养蜂车产品不成熟,常年成本比返空车高,养蜂操作不方便,存在偏蜂现象,运输障碍多,维修困难,设计不科学等。