针刀干预对颈型颈椎病兔颈肌超声影像及Notch1/Dll1表达的影响

目的观察针刀干预对颈型颈椎病模型兔颈肌超声影像及肌肉组织内翅缘缺刻信号通路(notch signaling pathway,Notch)中的受体1(Notch1)及Delta样配体1(delta like ligand protein 1,Dll1)蛋白和基因表达的影响,探讨针刀干预对颈型颈椎病颈肌修复的效应机制。方法按随机数字表法将24只健康新西兰兔分为空白组、模型组和针刀组,每组各8只。除空白组外其余建立颈型颈椎病动物模型,持续8周。造模后通过颈椎侧位X线片验证是否造模成功。证实造模成功后实行针刀干预,每周1次,共4次。干预结束通过多普勒超声检查观察颈肌影像变化,采用蛋白质印迹法(Western blot)和实时荧光定量PCR法(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测Notch1、Dll1蛋白和基因表达。结果造模后模型组和针刀组超声检查下可见局部肌肉回声增强、连续性中断,血流信号增强;干预后针刀组回声较均匀,血流信号减少。与空白组相比,模型组兔Notch1/Dll1蛋白和mRNA水平均明显升高(P<0.05);与模型组相比,针刀组Notch1/Dll1蛋白和mRNA水平明显降低(P<0.05)。结论针刀治疗能够明显下调Notch1/Dll1表达水平,促进肌肉修复,这可能是针刀治疗颈型颈椎病颈肌损伤的作用机制之一。

针刀干预对颈型颈椎病兔颈多裂肌细胞中Wnt3α、β-catenin和MyHC1表达的影响

目的 探讨针刀干预对颈型颈椎病模型兔颈深部多裂肌血流变化的影响及对多裂肌细胞中Wnt信号蛋白-3α(Wnt3α)、β-连环蛋白(β-catenin)和肌球蛋白重链-I(MyHC1)表达的影响。方法 将24只6月龄雄性新西兰兔分为空白组、模型组、针刀组,采用低头位方法建立异常应力诱导下的颈型颈椎病兔模型,8周后通过X线摄片验证造模结果。在造模成功后第3天进行干预,以针刀四步法为指导,每周1次,共干预4周。模型组、针刀组采用相同固定方式固定。结束后采用多普勒超声法观测各组实验兔颈部肌肉血流供应状况变化;Western blot法和q-PCR法检测颈部深层多裂肌中Wnt3α、β-catenin、MyHC1蛋白和基因含量的变化。结果 多普勒超声显示:空白组家兔颈部肌肉结构完整肌束连续,肌束呈中低水平回声,肌束膜呈强回声。血流信号呈点状分布。模型组家兔颈部肌肉结构完整性被破坏,肌肉组织内肌丝回声增强,肌束膜和肌内结缔组织网络样回声断续。整体相较空白组回声信号偏高。血流信号较空白组丰富,由点状融合成片状。针刀组家兔颈部肌肉结构完整性较模型组有所改善,肌束膜连续性有所恢复。血流信号呈点状分布,但较空白组仍可见血流信号增多;Western blot法结果显示:与空白组相比,模型组颈多裂肌中Wnt3α、β-catenin、MyHC1蛋白表达降低(P<0.05);与模型组相比,针刀组中Wnt3α、β-catenin、MyHC1蛋白表达增加(P<0.05);q-PCR法结果显示:与空白组相比,模型组颈多裂肌中Wnt3α、β-catenin、MyHC1基因表达降低(P<0.05);与模型组相比,针刀组中Wnt3α、β-catenin、MyHC1基因表达增高(P<0.05)。结论 实验所选取的颈型颈椎病兔模型具有可行性;针刀干预可以减轻炎症,促进肌组织供血恢复;针刀治疗修复颈型颈椎病受损颈肌的可能机制是通过干预调整Wnt/β-catenin信号通路,从而达到促进颈部肌肉修复,改善颈椎力学平衡,延缓颈型颈椎病进程的目的。

针刀干预对颈型颈椎病模型兔血清中IL-8、TNF-α、PGE2水平的影响

目的观察针刀干预对颈型颈椎病模型兔血清中白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis fac tor-alpha,TNF-α)、前列腺素E(PGE)水平的影响,探讨针刀治疗颈型颈椎病的抗炎作用机理。方法选择兔龄(6±0.5)个月的健康雄性新西兰大白兔24只,分为空白组、模型组、针刀组各8只,空白组正常饲养不做干预,模型组和针刀组建立颈型颈椎病模型兔,模型组在造模成功后7 d取材,针刀组以针刀治疗结束7 d后取材,并用ELISA法测定其中IL-8、TNF-α、PGE水平。结果与空白组比较,模型组兔血清IL-8、TNF-α、PGE水平均明显升高(P<0.01);与模型组比较,针刀组血清IL-8、TNF-α、PGE水平明显降低(P<0.01)。结论颈型颈椎病作为各类型颈椎病的早期阶段,伴随着各种炎症反应,IL-8、TNF-α、PGE水平均明显升高,针刀治疗颈型颈椎病,能够明显降低IL-8、TNF-α、PGE水平。

中医治疗原发性痛经研究进展

对近几年中医治疗原发性痛经的文献进行综述,以了解中医治疗原发性痛经近况。将资料按内治法、外治法以及中医综合疗法进行分类综述。肯定了中医治疗原发性痛经的疗效,并提出中医治疗原发性痛经的研究方向。

长期低头位与寒湿刺激建立颈型颈椎病动物模型的研究

目的 设计一种操作简便、适用性强的兔盒用于制备颈型颈椎病的动物模型并验证其可行性,为研究颈椎病的发病机制、防治方法及作用机制提供技术基础与实验载体。方法 24只雄性新西兰兔随机分为对照组与模型组,每组12只。使用自制兔盒以低头位结合寒湿刺激建立兔颈椎间盘退变模型。造模8周后,通过影像学检查观察兔颈椎生理曲度、椎间盘、椎体及颈肌的变化。影像学检查结束后,行空气栓塞法处死,立即取出肌肉与椎间盘组织。HE染色法观察椎间盘与肌肉组织形态学变化,Masson染色法观察肌肉组织纤维化程度,荧光定量PCR法检测肌肉组织中巨噬细胞M1与M2表达水平,免疫组织化学染色法检测椎间盘组织IL-1的表达水平。结果 与对照组相比,模型组颈椎生理曲度改变,椎体边缘骨质增生形成;MRI结果显示椎间盘高度降低、纤维环破裂、髓核信号降低呈灰黑色,提示髓核脱水严重;超声影像学结果显示肌肉厚度增加、结缔组织信号增强、血流信号增加;HE染色显示肌纤维溶解,肌膜欠完整,细胞核增多与炎性细胞浸润;椎间盘组织中髓核组织消失,纤维环排列不规则,出现裂隙,软骨终板不完整;Masson染色可见大量蓝色胶原纤维覆盖;荧光定量PCR可见肌肉组织中M1巨噬细胞标记物CD68与M2巨噬细胞标记物CD163、CD206mRNA表达显著增加(P<0.05);免疫组织化学染色法可见椎间盘组织中IL-1表达显著增多(P<0.05)。结论 使用自制兔盒造模,可致实验兔颈肌劳损与椎间盘变性,成功建立颈型颈椎病模型。

针刀疗法对兔退变颈椎间盘组织中p38MAPK蛋白与IL-1表达的影响

目的 观察针刀疗法对兔退变颈椎间盘组织中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)蛋白与白细胞介素-1(IL-1)表达的影响,探讨针刀治疗颈椎间盘退变的作用机制。方法 选用24只普通级的6月龄健康雄性新西兰大白兔,随机分为空白组、模型组与针刀组,每组8只。模型组与针刀组采用自制兔盒制作颈椎间盘退变模型。造模4周后,通过X线与MRI检查评价造模成功与否。造模结束后7 d,空白组与模型组不予任何干预措施;针刀组予以针刀干预,每周1次,共3次。干预结束后7 d,每组随机抽取2只行MRI检查,观察影像学变化。影像学检查结束后行空气栓塞法处死,立即取出椎间盘组织。HE染色观察其组织病理学变化,Western blot法检测p38MAPK的蛋白表达水平,免疫组织化学染色法检测IL-1的表达水平。结果 磁共振成像结果显示空白组见椎间盘高度正常,髓核呈亮白色,未见椎间隙变窄、椎间盘突出,纤维环边缘完整;模型组见椎间盘高度降低,髓核呈灰黑色,椎间隙变窄,C6/7椎间盘向后方突出,纤维环破裂;针刀组椎间盘高度正常,髓核呈灰色,未见椎间隙变窄,C6/7椎间盘向后方轻微突出,纤维环边缘尚完整。HE染色结果见空白组椎间盘组织结构清晰,髓核居中,纤维环排列规则,软骨终板结构完整。模型组髓核组织被纤维组织和成纤维细胞替代,纤维环较空白组粗糙增厚,排列不规则,出现裂隙,软骨终板不完整。针刀组髓核居中,与纤维环界限清晰,软骨终板结构正常。与空白组相比,模型组椎间盘组织p38MAPK蛋白与IL-1表达水平明显升高(P<0.01);与模型组相比,针刀组椎间盘组织p38MAPK蛋白表与IL-1达水平显著降低(P<0.01)。结论 针刀疗法可通过下调p38MAPK与IL-1的表达水平以延缓椎间盘退变。

针刀干预对颈椎间盘退变兔整合素α5、β1表达的影响

目的观察针刀干预对颈椎间盘退变兔颈部肌肉形态学以及整合素α5、β1含量的影响,探讨针刀延缓颈椎间盘退变的机制。方法将24只新西兰家兔按随机数字表法分为空白组、模型组、针刀组,每组8只,采用"低头位加风寒湿刺激"法建立异常应力诱导下的兔颈椎间盘退变模型,通过颈椎核磁共振(MRI)影像学验证造模是否成功。针刀组在造模结束1周后进行干预,干预在无菌状态下以针刀治疗四步曲为参考,每周1次,共治疗4周。空白组、模型组与针刀组采用相同固定方式固定。结束后采用HE染色法观察各组实验兔颈部肌肉组织形态学变化;Western Blot法和Real-time PCR法检测椎间盘髓核中整合素α5、β1含量的变化。结果颈椎MRI结果显示,空白组矢状面可见髓核呈高亮信号状态、椎间盘高度正常,横断面可见髓核内信号均匀且与纤维环边界清晰;与空白组相比,模型组椎间盘的高度出现轻度降低,矢状面可见部分椎间盘髓核颜色较暗,呈灰色,信号强度较空白组明显减低,与空白组椎间盘横断面所见的髓核均匀分布相比,模型组髓核内部结构明显分布不均,且纤维环和髓核之间界限模糊,难以分清。HE染色显示,空白组可见肌纤维结构清晰,呈长条状平行排列,肌核少量散在纤维附近,肌细胞无变形水肿;与空白组相比,模型组肌纤维出现粗细不皱缩、变形,肌核聚集在附近,肌节不清晰,炎性浸润片状散在出现;与模型组相比,针刀组可见肌纤维挛缩改善,肌核规律分布,炎性细胞浸润明显减少。Western Blot法结果显示:与空白组相比,模型组椎间盘髓核中整合素α5、β1蛋白表达量显著降低(P<0.01);与模型组相比,针刀组整合素α5、β1蛋白含量明显增加(P<0.01)。Real-time PCR法结果显示,与空白组相比,模型组椎间盘髓核中整合素α5、β1 mRNA相对表达量均显著降低(P<0.01);与模型组相比,针刀组整合素α5 mRNA显著升高(P<0.01),β1mRNA相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验所选取的"低头位加风寒湿刺激"模型具有可行性;针刀可以修复肌肉的紊乱排列,促进组织修复;针刀延缓颈椎间盘退变的可能机制是通过力学干预调整整合素α5、β1的表达含量,达到延缓颈椎间盘退变的目的。