补肾通络汤联合仙灵骨葆胶囊治疗老年骨质疏松性桡骨远端骨折临床研究

目的:探讨补肾通络汤联合仙灵骨葆胶囊治疗骨质疏松性桡骨远端骨折的临床疗效。方法:选取我院2021年1月-2022年12月收治的骨质疏松性桡骨远端骨折患者124例,按随机数字表法分为观察组与对照组各62例,对照组患者给予西医常规治疗,观察组在对照组基础上给予补肾通络汤联合仙灵骨葆胶囊治疗,比较两组治疗前后临床疗效,中医证候评分,以及骨折愈合时间、肿胀消退时间和疼痛缓解时间,血清骨代谢指标(血清骨钙素、I型前胶原氨基端前肽、Ⅰ型胶原C端肽β降解产物),骨密度水平,腕关节功能及并发症情况。结果:治疗后观察组总有效率(94.92%)显著高于对照组(84.75%),差异有统计学意义(P <0.05);治疗后两组中医证候评分、血清Ⅰ型胶原C端肽β降解产物水平均较治疗前降低,且观察组低于对照组(P <0.05);治疗后观察组骨折愈合时间、肿胀消退时间及疼痛缓解时间均短于对照组(P <0.05);治疗后两组血清骨钙素、I型前胶原氨基端前肽及骨密度水平、掌倾角、尺偏角角度均较治疗前升高,且观察组高于对照组(P <0.05);治疗后观察组并发症发生率(6.78%)显著低于对照组(20.34%),差异有统计学意义(P <0.05)。结论:补肾通络汤联合仙灵骨葆胶囊治疗老年骨质疏松性桡骨远端骨折临床疗效显著。

补肾活血汤联合阿仑磷酸钠对绝经后骨质疏松患者临床疗效及免疫调控因子的影响

目的:探究补肾活血汤联合阿仑磷酸钠对绝经后骨质疏松(postmenopausal osteoporosis,PMOP)患者临床疗效及免疫调控因子的影响。方法:选择2019年12月-2020年12月于湖南省中医药研究院附属医院和湖南省中医药大学第一附属医院确诊并治疗的100例PMOP患者,按就诊时间顺序随机分将其为对照组与治疗组,每组50例。对照组给予阿仑膦酸钠片治疗,治疗组在对照组的基础上加用补肾活血汤制备的中药浓缩颗粒。比较两组临床疗效、L_(1~4)骨密度(BMD)、骨代谢指标及免疫调控因子。结果:治疗组治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,治疗组L_(1~4)的BMD高于对照组(P<0.05)。治疗后,治疗组血清中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和骨钙素(bone gla protein,BGP)、IL-17、TNF-α及TGF-β水平均明显优于对照组(P<0.05)。结论:补肾活血汤联合阿仑膦酸钠可以改善PMOP患者骨密度水平、骨代谢、免疫调控因子,从而提高临床疗效。

龟甲胶对绝经后骨质疏松大鼠骨代谢的影响及机制研究

目的:观察龟甲胶对绝经后骨质疏松(PMOP)大鼠能量代谢和骨代谢稳态的影响,及对腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)通路的调控作用。方法:将60只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组、龟甲胶低、中、高剂量组,每组各10只。除假手术组外,其余大鼠采用双侧卵巢摘除法复制绝经后骨质疏松大鼠模型,以尼尔雌醇片作为阳性对照药,于造模完成后给予尼尔雌醇片1 mg/kg灌胃,1次/d,龟甲胶低、中、高剂量组分别给予0.45,0.90,1.80 g/kg灌胃,2次/d,持续治疗8周。称量大鼠子宫质量并计算子宫指数,双能X线骨密度仪测定L_(4/5)及双侧股骨骨密度,显微CT分析骨形态计量学参数,ELISA法实验检测血清骨钙素(BGP)、骨碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)、Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(CTX-Ⅰ)含量,Western Blot法及RT-PCR检测骨组织AMPK/SIRT1通路相关蛋白和mRNA表达。结果:与假手术组相比,模型组子宫指数、L_(4/5)及双侧股骨骨密度明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);骨形态计量学参数骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)明显降低,骨小梁间隔(Tb.Sp)明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);血清中血清骨钙素、骨碱性磷酸酶、TRACP-5b、CTX-Ⅰ的水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);骨组织中p-AMPK/AMPK、SIRT1、PGC1-α的蛋白及AMPK、SIRT1、PGC1-α的mRNA水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。龟甲胶高、中、低剂量组治疗后,子宫指数、L_(4/5)及双侧股骨骨密度较模型组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);BV/TV、Tb.N、Tb.Th明显升高,Tb.Sp明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);血清中血清骨钙素、骨碱性磷酸酶、TRACP-5b、CTX-Ⅰ的水平均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);同时明显上调了骨组织中p-AMPK/AMPK、SIRT1、PGC1-α的蛋白及AMPK、SIRT1、PGC1-α的mRNA水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:龟甲胶对绝经后骨质疏松大鼠具有较好的改善效果,能够保护大鼠骨微结构,调节骨代谢水平,其作用机制可能与激活AMPK/SIRT1通路、提高骨骼肌能量代谢相关。

补肾活血汤对去势骨质疏松大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路及肠道菌群的影响

目的研究补肾活血汤对双侧卵巢切除诱导的绝经后骨质疏松模型大鼠肠道菌群及TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响。方法2月龄雌性SD大鼠60只,随机分为假手术组、模型组、戊酸雌二醇组、补肾活血汤组、益生菌组(每组12只)。采用双侧卵巢摘除术诱导去势制备绝经后骨质疏松大鼠模型,予以相应药物灌胃8周。HE染色观察骨及结肠病理改变;双能X线骨密度仪测定股骨BMD值;采用ELISA法检测血清中炎症因子及骨代谢因子水平;Western blot检测股骨及结肠中TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达;16S rRNA基因测序检测大鼠肠道菌群。结果补肾活血汤及益生菌组骨质疏松病变均得到不同程度的修复,且结肠炎症也明显减轻;补肾活血汤组血清中ALP、OCN水平升高,TPAP-5b水平降低,且血清炎症因子水平也明显降低(P<0.05,P<0.01);补肾活血汤组、益生菌组大鼠股骨及结肠组织中TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01),且肠道菌群多样性明显增加,门水平上菌群结构较模型组均发生明显变化(P<0.05,P<0.01)。结论补肾活血汤可一定程度上增加去势大鼠肠道菌群多样性,改变肠道菌群结构,抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号传导,从而介导骨微环境炎症水平,影响骨代谢,达到防治PMOP的作用。

补肾活血汤调节rabHK-2外泌体对椎间盘髓核细胞凋亡及Wnt信号通路的影响

目的:观察补肾活血汤对兔退变椎间盘组织细胞凋亡及Wnt信号通路的影响,以及调节兔肾小管上皮细胞(rabHK-2)来源外泌体的分泌,对退变椎间盘髓核细胞(NPCs)增殖、凋亡及Wnt信号通路蛋白表达的影响。方法:建立兔椎间盘退变模型,补肾活血汤干预8 w后,采用TUNEL法检测椎间盘组织凋亡阳性细胞率,Western-blot法检测椎间盘组织中Wnt信号通路相关蛋白的表达;5.41 g/kg补肾活血汤灌胃新西兰白兔制备含药血清,以10%补肾活血汤含药血清作用于rabHK-2细胞,采用超高速离心法提取rabHK-2细胞外泌体,透射电镜观察外泌体形态,Western-blot法检测外泌体标志蛋白集群分化因子9(CD9)和集群分化因子63(CD63)的表达;用PKH67荧光试剂盒标记后的外泌体与退变NPCs共孵育,荧光显微镜观察不同浓度外泌体作用于退变NPCs后,退变NPCs对rabHK-2细胞外泌体的摄取情况,CCK-8法检测退变NPCs活力。rabHK-2外泌体与补肾活血汤含药血清单独或联合干预后,应用流式细胞术检测退变NPCs凋亡情况,RT-PCR检测退变NPCs中II型胶原和蛋白多糖的mRNA表达,Western-blot和RT-RCR检测退变NPCs中Wnt信号通路相关蛋白和mRNA的表达情况。结果:补肾活血汤干预后,明显降低了兔退变椎间盘组织细胞凋亡率,并上调了Wnt通路中GSK-3β的蛋白表达,下调了β-catenin的表达(P<0.05);经补肾活血汤含药血清干预后,rabHK-2外泌体CD9、CD63的表达明显上调(P<0.05);不同浓度rabHK-2外泌体干预后,荧光显微镜可见外泌体被退变NPCs所摄取,退变NPCs细胞活力增强(P<0.05);外泌体与补肾活血汤含药血清联合干预后,退变NPCs凋亡率受到明显抑制,细胞中II型胶原和蛋白多糖的mRNA表达明显上调,同时显著上调了GSK-3β的蛋白和mRNA表达,下调了β-catenin的表达,联合补肾活血汤含药血清处理后效果较单独应用外泌体更为明显(P<0.05)。结论:补肾活血汤可能通过抑制Wnt信号通路的活化,减轻兔退变椎间盘组织细胞凋亡,同时能够增加rabHK-2细胞外泌体的分泌,并通过rabHK-2外泌体靶向调控退变NPCs的增殖、凋亡及Wnt信号通路的表达,从而延缓椎间盘退变。

独活寄生汤联合消炎散外敷治疗膝骨关节炎33例

目的:观察独活寄生汤联合消炎散外敷对膝骨关节炎(KOA)肝肾亏虚证的临床疗效及炎症因子的影响。方法:将72例KOA肝肾亏虚证患者分为治疗组和对照组,每组各36例。对照组予以常规抗炎、止痛治疗,治疗组在对照组基础上予以独活寄生汤联合消炎散外敷治疗,疗程均为2个月,观察2组临床疗效,西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(WOMAC)量表积分及关节液白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核因子(NF)-κB p65水平。结果:治疗组脱落3例,最终纳入33例,对照组脱落1例,最终纳入35例。总有效率治疗组为87.88%(29/33),对照组为77.14%(27/35),2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后2组WOMAC量表积分及IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65水平均较治疗前降低,且治疗组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:独活寄生汤联合消炎散外敷治疗KOA肝肾亏虚证有一定疗效,其作用机制可能与改善炎症因子水平有关。