三氧化二砷通过降低Pin1表达及调节Wnt/β-连环素通路抑制肝癌细胞增殖

目的探讨三氧化二砷(ATO)在肝癌中对肽基脯氨酰基顺反异构酶NIMA相互作用蛋白1(Pin1)表达的抑制作用及其分子机制。方法使用DepMap数据库和GEPIA数据库中的数据分析Pin1在人肝癌细胞系和肝癌组织中的表达情况。以人肝癌细胞系Huh7和小鼠肝癌细胞系H22为细胞模型,通过ATP法检测ATO对肿瘤细胞活力的影响;通过蛋白质印迹法、免疫荧光染色和qPCR检测ATO对Pin1在蛋白质水平和转录水平表达的作用。用氯喹预处理Huh7细胞抑制溶酶体途径后,通过蛋白质印迹法和免疫荧光染色检测ATO对Pin1表达的调控作用。通过皮下荷瘤小鼠模型和免疫组织化学染色验证ATO在体内对肝癌细胞生长和Pin1表达的影响。采用RNA测序分析ATO可能影响的信号通路,并通过蛋白质印迹法和qPCR验证。结果在DepMap数据库23种人肝癌细胞系和GEPIA数据库人肝癌组织中,Pin1的表达均呈现较高水平。在体外实验中,ATO处理后Huh7和H22细胞的细胞活力均降低,细胞中Pin1在蛋白质和转录水平的表达均降低,但用氯喹抑制溶酶体途径逆转了ATO对Pin1表达的影响。在皮下荷瘤小鼠模型中,ATO表现出一定的抗肿瘤效果,免疫组织化学染色显示ATO处理后Pin1表达和肿瘤细胞增殖受到抑制。在ATO处理的H22细胞中Wnt/β-连环素通路相关基因富集,抑制H22细胞中Pin1的表达后β-连环素表达减少。结论ATO通过溶酶体途径抑制Pin1表达,以及影响Wnt/β-连环素信号通路来抑制肝癌细胞增殖。

三氧化二砷在肿瘤治疗中临床应用及相关分子机制研究进展

三氧化二砷(ATO)具有广泛抗肿瘤作用,用于治疗疾病已有2000多年的历史。自20世纪70年代以来,ATO被用于治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)。越来越多的证据表明,ATO在其他癌种中同样发挥抗肿瘤效果,如多发性骨髓瘤、肝癌和胰腺癌等。现对ATO在肿瘤治疗中的临床应用及相关分子机制进行综述。

揿针治疗术后胃瘫综合征100例临床观察

目的观察揿针治疗术后胃瘫综合征(PGS)的临床效果。方法将200例PGS患者随机分成对照组(100例)和治疗组(100例)。对照组患者采用常规治疗:禁食水、予以胃肠减压、静脉营养、促进胃肠道蠕动等药物。治疗组在常规治疗的基础上加用揿针治疗。观察两组患者治疗前后胃动力恢复时间、胃液引流量变化、痞满症状改善和临床疗效。结果与对照组相比,治疗组胃肠动力恢复时间减少、胃液引流量降低,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组痞满症状分级评分优于对照组(P<0.05);对照组总有效率为71.0%(71/100),明显低于治疗组的89.0%(89/100),差异有统计学意义(P<0.05)。结论腹部术后胃瘫综合征患者实施常规疗法与揿针疗法结合的方案可促进胃肠功能恢复,缩短胃动力恢复时间,减少胃液引流量,缓解患者的痞满症状,增强临床疗效。

连翘酯苷冻干粉的遗传毒性试验

目的检测连翘酯苷冻干粉的遗传毒性,为临床前安全性评价提供依据。方法分别应用Ames试验、小鼠骨髓微核试验、体外培养CHO细胞染色体畸变试验、CHO细胞和正常人肝细胞Chang liver两个细胞株单细胞凝胶电泳法。结果Ames试验选用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)TA97、TA98、TA100、TA102及TA1535为指示菌株,加和不加代谢活化系统(S9)时对鼠伤寒沙门氏菌均无致突变性。小鼠骨髓微核试验采用ICR小鼠,尾静脉注射给药,剂量分别为0.2、0.4和0.8g/kg,结果显示:雌性小鼠微核诱发率分别为1.50、2.67和6.75%,雄性小鼠微核诱发率分别为1.87、5.79和6.57%;其中雌性小鼠在0.8g/kg剂量下、雄性小鼠在0.4、0.8g/kg剂量下的微核诱发率与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。表明受试物连翘酯苷冻干粉在0.4、0.8g/kg剂量下对ICR小鼠有诱发骨髓嗜多染红细胞微核的效应。CHO细胞染色体畸变试验结果显示:受试物连翘酯苷冻干粉在受试剂量下作用24h,-S9的染色体畸变率分别为3%、7%和9%,与阴性对照组比较164.0和328.0μg/ml2个剂量组均显示差异有统计学意义(P<0.05);-S9作用48h的染色体畸变率分别为3%、5%和8%,与阴性对照组比较164.0和328.0μg/ml剂量组差异有统计学意义(P<0.05);+S9的染色体畸变率分别为1%、1%和6%,各剂量组与阴性对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。重复试验结果一致。以上结果说明连翘酯苷冻干粉在无代谢活化系统时,作用24h328μg/ml以上剂量对CHO细胞有致染色体畸变作用,作用48h164μg/ml以上剂量对CHO细胞具有致染色体畸变作用,在有S9代谢活化系统时,在受试剂量下对CHO细胞均无致染色体畸变作用。细胞彗星试验结果显示,在各试剂量的拖尾率和尾长与溶剂对照组相比较差异无统计学上意义,表明酯苷冻干粉在受试剂量下无损伤CHO细胞和人肝细胞Chang liverDNA的能力。结论连翘酯苷在体外培养CHO细胞染色体畸变试验和微核试验中,在较高剂量时呈阳性,无损伤CHO细胞和人肝细胞Chang liver DNA的能力。连翘酯苷冻干粉有一定的遗传毒性,分析连翘酯苷所致染色体畸变和微核的机制,可能不是通过损伤DNA机制诱导的,而是通过抑制DNA合成的、抑制拓扑异构酶、细胞毒性等非DNA损伤所致。

苦参碱和氧化苦参碱的提取 鉴定和含量测定

目的:研究中药苦参中的主要有效成分苦参碱(Matrine,MT)、氧化苦参碱(Oxymatrine,OMT)的提取、鉴定和含量测定方法。方法:采用乙醇提取法和酸水提取法提取苦参根中的MT、OMT,并用薄层色谱法和红外光谱法对所获取的样品加以鉴定,用高效毛细管电泳法测定提取样品中MT、OMT的含量。结果:在提取MT和OMT过程中发现,酸水提取法获得MT和OMT的量比乙醇提取法多,最终测得安微出产的苦参中MT含量为(0.116±0.002)%,OMT为(1.134±0.016)%,所得样品经薄层色谱法和红外光谱法鉴定与对照品完全一致。用高效毛细管电泳法测得两批样品中MT、OMT的含量分别为96%和99%。结论:提取工艺不同获得的MT、OMT量不同。高效毛细管电泳法简单、实用,重复性好,可用于生药和成品的检测。

猫人参注射液抗肝癌作用和对免疫功能的影响

目的 :初步探讨猫人参注射液抗动物移植性肝癌及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法 :体内抗肿瘤实验采用液下接种肿瘤细胞及实体瘤称重的方法 ,腹腔接种肿瘤液观察荷瘤动物存活率 ,采用3H -TdR掺入法检测猫人参注射液对荷瘤小鼠脾T淋巴细胞转化功能和NK细胞活性的影响 ;流式细胞仪检测荷瘤小鼠T细胞亚群。结果 :猫人参注射液 1 0 0g/kg、50g/kg、2 5g/kg连续尾静脉注静 1 0天后 ,对小鼠皮下移植性H2 2 肝癌的抑瘤率分别为 62 1 6%、35 1 4 %、1 7 1 3 % ,有较明显的剂量依赖性(P >0 0 5)。剂量为 1 0 0g/kg时抗肿瘤作用较理想 ,且可延长腹水型肝癌小鼠的生存期 ,对H2 2 肝癌小鼠脾脏 (胸腺 )指数、脾淋巴细胞转化指数、T细胞CD4 + /CD8+ 比值有升高趋势 ,略高于生理盐水组 (P <0 0 5) ,CTX对荷瘤小鼠细胞免疫功能则有明显的抑制作用 (P >0 0 5)。结论 :猫人参注射液具有良好的抗肝癌作用。

猫人参注射液体外抗肝癌实验研究

目的 :观察单味猫人参注射液在体外对肝癌细胞的抑制作用。方法 :噻唑蓝还原法 (MTT法 )检测猫人参注射液对体外培养的人肝癌细胞株SMMC - 772 1、小鼠肝癌细胞株H2 2 、大鼠肝癌细胞株CBRH - 791 9的生长抑制作用。结果 :体外实验结果表明 :2 50mg ml浓度猫人参注射液对H2 2 、CBRH - 791 9、SMMC - 772 1肝癌细胞株均有抑制作用 ,抑制率分别 63 68%、41 51 %、32 92 % ,IC50 分别为 :1 0 7 70mg ml、51 9 49mg ml、667 56mg ml;在 2 4h,48h ,72h三个时相 ,对小鼠H2 2 肝癌细胞的生长抑制作用存在较明显的时效关系 ,在 72h内 1 6 88mg ml～ 2 50mg ml浓度内药物浓度与抑制作用有正相关趋势 ,其相关系数为 0 91。结论

肿瘤体内药物敏感性测定与肾包膜下移植法

肿瘤对各种化疗药物的敏感性存在明显的个体差异,抗肿瘤药药敏检测越来越受到人们的重视,体内肾包膜下移植肿瘤药敏实验虽存在一些问题,但它可以摸拟体内用药环境,与临床相关性好,是目前较敏感的体内药敏检测法。

苦参碱注射液联合TACE术治疗原发性肝癌的临床观察

目的 :观察苦参碱注射液配合TACE术治疗晚期肝癌的疗效及实验室指标的变化。方法 :80例肝癌患者随机分成 :治疗组41例 ,苦参碱配合TACE术 ;对照组39例 ,甘利欣配合TACE术。结果 :治疗组在改善TACE术后的发热、疼痛有效率分别为82 35%、73 33 % ;对照组分别为54 84 %、54 17 %。实验室指标 :在防治TACE术后白细胞下降、总胆红素的升高、白球比例的下降等保肝、护肝方面有较好的作用 ,与对照组比较差异具有统计学意义 ,在防治转氨酶升高方面与对照组相仿。结论 :苦参碱联合TACE术有改善生活质量、防治白细胞下降。

神昌滴丸的遗传毒性研究

目的:研究神昌滴丸的遗传毒性,为其应用提供安全性毒理学评价依据。方法:采用Ames试验、小鼠骨髓细胞染色体畸变试验、小鼠微核试验,考察神昌滴丸对鼠伤寒沙门菌和细胞的遗传毒性。结果:经Ames试验、小鼠骨髓细胞染色体畸变试验和小鼠微核试验,神昌滴丸的结果均呈阴性。结论:神昌滴丸无遗传毒性。

神昌滴丸对孕鼠致畸性的研究

目的：评价神昌滴丸在妊娠期的毒性。方法：用80只孕鼠,分为3个不同的剂量（0.25、0.5、1.0g/kg）实验组,同时设阴性对照组（采用玉米油作为溶剂）,每组19-21只孕鼠。实验组和对照组给药容量为1mL/100g体重,均采用灌胃给药,给药时间为GD6-15。于妊娠第20天处死孕鼠,检查母体妊娠与胎鼠畸形情况。结果：神昌滴丸在1.0g/kg剂量出现母鼠增重下降,与对照组比较差异有统计学意义;各剂量组出现活胎率下降和死胎率增加,但与对照组比较有差异有统计学意义,不存在剂量反应关系;各剂量组的每窝平均活胎数和吸收胎率及致畸率与对照组比较差异无统计学意义。受试剂量下各组的平均胎盘重、胎儿体重、身长、尾长与对照组比较无统计学差异。低剂量组胸骨节数、骶椎数,高剂量组掌骨数与对照组相比差异具有统计学意义外（P〈0.05）,其它骨骼发育与对照组比较差异无统计学意义。各实验组均未观察到母鼠和胎鼠明显的外观、脏器以及骨骼的畸形。结论：神昌滴丸在1.0g/kg剂量时对孕期SD大鼠存在一定的母体毒性,在受试剂量下无明显的胚胎毒性、胎儿毒性和致畸作用。

华蟾素注射液治疗中晚期原发性肝癌临床疗效观察

目的 观察华蟾素注射液治疗中晚期原发性肝癌的临床疗效。方法 10 0例中晚期原发性肝癌患者随机分成华蟾素治疗组与一般治疗组 ,各 50例。分别观察两组患者治疗前后的生存质量、肿瘤大小、部分实验室指标的变化 ,并随访生存期。结果 在控制肿瘤方面 ,华蟾素治疗组的恶化率 (18% )低于一般治疗组 (3 2 % ) ;在生存质量方面 ,华蟾素治疗组的总有效率(80 % )高于一般治疗组 (72 % ) ,但两组比较无显著性差异 ;在生存期方面 ,华蟾素治疗组 >12个月的生存率 (3 0 % )显著高于一般治疗组 (18% ) ,两组比较有显著性差异 ;在肝功能方面 ,华蟾素治疗组的血清总胆红素、丙氨酸氨基转移酶等指标在治疗后有明显下降 ,而在一般治疗组则呈不同程度的升高 ;在甲胎蛋白 (AFP)方面 ,一般治疗组的AFP在治疗后较治疗前有明显上升 ,而华蟾素治疗组则略有上升 ,但与治疗前相比无显著性差异。结论 华蟾素注射液能在一定程度上抑制癌瘤的生长 ,并且具有保护肝功能、提高生存质量、延长生存期的作用 ,在治疗中晚期原发性肝癌方面 ,具有“攻邪不伤正”

连翘酯苷冻干粉对SD大鼠的致畸作用

目的：探讨连翘酯苷冻干粉的对SD大鼠的致畸作用。方法：采用大鼠标准致畸试验，孕SD大鼠随机分为4组，每组20只。实验组剂量分别为0．075，0．150，0．3g·kg^-1，对照组给予生理氯化钠溶液。妊娠d6～15尾静脉注射给药，qd。妊娠d20处死孕鼠，检查母体妊娠与胎鼠畸形情况。结果：各实验组对母鼠增重、胎鼠外观畸形率、内脏畸形率、活胎率、死胎率、吸收胎率、活胎身长、胎盘重和胎鼠体重无显著影响。同时，在各受试剂量作用下对骨骼的发育也无明显影响。结论：连翘酯苷冻干粉冻干粉在受试剂量下无明显的母体毒性和致畸作用，也无明显的胚胎毒性和胎儿毒性。

红景天苷注射液遗传毒性的研究

目的:检测红景天苷注射液的遗传毒性。方法:应用微生物回复突变实验(Ames实验,5 000、500、50、5.0、0.5μg/皿)、体外培养CHO细胞染色体畸变实验(2 0001、000、500μg/mL)和小鼠骨髓微核实验法(1 500、750、375μg/kg)检测红景天苷注射液的遗传毒性。结果:红景天苷注射液对鼠伤寒沙门菌无致突变性,对体外培养CHO细胞染色体无致畸变作用,对ICR小鼠无诱发骨髓嗜多染红细胞微核的效应,三个实验结果均呈阴性。结论:红景天苷注射液不具有遗传毒性。

中药黄芪甲苷对SD大鼠致畸性的研究

目的:探讨黄芪甲苷对SD大鼠的致畸作用。方法:采用标准致畸试验,孕鼠随机分为4组,每组20只。实验组剂量分别为0.25,0.5和1.0mg/kg体重,对照组(0.85%生理盐水1/4稀释的1:1丙二醇:乙醇)。于妊娠第6～15天尾静脉注射给药,每日1次,于妊娠第20天处死孕鼠。检查母体妊娠与胎儿畸形情况。结果:黄芪甲苷在1.0mg/kg剂量时孕鼠增重与对照组比较明显降低,差异具有统计学意义。黄芪甲苷在1.0mg/kg剂量时SD大鼠的活胎率和死胎率与对照组比较差异具有统计学意义,表现为活胎率降低和死胎率升高,但胎儿外观畸形率、内脏畸形率、活胎身长、胎盘重和胎儿体重无显著影响。同时,黄芪甲苷在各受试剂量作用下对骨骼的发育也无明显影响。结论:黄芪甲苷在1.0mg/kg剂量时对SD大鼠有一定的母体毒性,在1.0mg/kg有一定的胚胎毒性;但在受试剂量下无胎儿毒性,也无明显的致畸作用。

蜂毒素基因重组腺病毒对肝癌细胞的杀伤作用

目的 :构建携蜂毒素基因及甲胎蛋白 (AFP)启动子 (rAFP)的重组腺病毒载体 ,探讨rAFP驱动的蜂毒素基因在体外对肝癌细胞的特异性杀伤作用。方法 :人工合成蜂毒素基因 ,置于rAFP之后 ,用细菌内高效同源重组法将目的基因重组入腺病毒质粒中 ,转染人胚肾 2 93细胞进行腺病毒包装 ;采用MTT法测定蜂毒素基因转染对AFP阳性、阴性肝癌细胞及正常肝细胞增殖的影响。结果 :携蜂毒素基因重组腺病毒载体构建成功 ,MTT实验证明携蜂毒素基因重组腺病毒转染后 ,AFP阳性肝癌细胞的增殖受到明显抑制 ,而对AFP阴性肝癌细胞及正常肝细胞无明显影响 ;无蜂毒素基因的重组腺病毒转染 ,则对各种细胞增殖均无抑制作用。结论 :表达rAFP驱动的蜂毒素基因的重组腺病毒在体外可特异性地杀伤AFP阳性肝癌细胞。

中西医结合治疗中晚期原发性肝癌313例

对中晚期原发性肝癌(Midadvanced HCC),多采用肝动脉化疗栓塞术(TACE)[1-9]、超声酒精局部介入治疗(PEI)[10-12]以及综合保守治疗[13-18 ]等,但总体的临床疗效多年来未见明显提高,如肝癌细胞的相对5年生存率仍然偏低.因此如何提高中晚期尤其是晚期肝癌的临床疗效,始终是肝癌研究的重要方向之一.我们在上述常规治疗方法的同时,配合应用中医中药治疗,并与相应的常规治疗方法进行了前瞻性地对比观察,发现中医中药配合治疗能显著提高不同常规治疗方法的临床疗效.现报告如下.

光谷济生方治疗恢复期新型冠状病毒肺炎的临床效果

目的观察光谷济生方治疗恢复期新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的临床效果。方法对湖北省妇幼保健院光谷院区122例恢复期COVID-19患者用光谷济生方进行治疗(3 d为1个疗程,共3个疗程),比较服药前后患者中医证候的变化。根据实验室指标及症状严重程度(无、轻、中、重)给予相应评分,评价光谷济生方治疗恢复期COVID-19的临床效果。结果统计分析中医证候评分,治疗3 d总有效率为75.41%(92/122),其中有效31.97%(39/122)、显效21.31%(26/122)、临床痊愈22.13%(27/122);治疗6 d总有效率为86.89%(106/122),其中有效32.79%(40/122)、显效28.69%(35/122)、临床痊愈25.41%(31/122);治疗9 d总有效率为88.52%(108/122),其中有效16.39%(20/122)、显效31.15%(38/122)、临床痊愈40.98%(50/122)。患者的咳嗽、乏力、气短、虚汗症状明显改善,无一例患者呼吸道病原体核酸阴性转阳性。结论光谷济生方治疗恢复期COVID-19有较好的临床效果,能明显改善患者的临床症状。