脓毒症大鼠肠上皮细胞自噬水平的研究

目的:研究盲肠结扎穿刺(CLP)诱导的脓毒症大鼠小肠上皮自噬水平,探讨自噬与脓毒症肠上皮损害的关系。方法:建立大鼠盲肠结扎穿刺模型,收集大鼠血清和小肠上皮黏膜,采用酶联免疫吸附法检测血清和黏膜细胞因子的变化,用蛋白免疫印迹法和rt-PCR法检测小肠黏膜组织中自噬相关蛋白的表达量以及转录水平,对获取的数据进行统计学处理。结果:CLP诱导的脓毒症大鼠血清和黏膜细胞因子TNF-α在4 h即明显升高,与对照组比有显著性差异(P<0.05)。自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3在脓毒症8 h明显升高,12 h下降,与对照组比有显著性差异(P<0.05)。LC3基因也表现出早期升高随之下降的趋势。结论:大鼠在脓毒症时,小肠黏膜受损,其自噬相关蛋白表达早期升高,随后下降。自噬受细胞因子水平的影响,导致肠黏膜上皮细胞功能失调。

呼吸机报警的临床分析

目的根据临床常见呼吸机报警情况讨论常见报警的原因,保障患者机械通气治疗的有效性及安全性。方法归纳81例使用气管插管呼吸机辅助通气患者,分析其中出现报警的51例患者,总报警例数138例的报警原因。结果 138例报警中,报警项目以高压报警最常见,占41.30%,报警原因中以镇静不恰当、呼吸机参数设置不合理等原因最为常见。结论在有创机械通气过程中,有效判断、及时准确的处理各项呼吸机报警,对保障患者呼吸机治疗的有效性和安全性至关重要。

脓毒症脏器功能不全与细胞自噬关系的研究现状

自噬是一种广泛存在于真核细胞内的溶酶体依赖性降解途径,被称为Ⅱ型凋亡,其在自噬相关基因的严格调控下在细胞发育、细胞免疫以及多种疾病中发挥重要作用。近来有研究发现,自噬参与脓毒症疾病发展过程,与多脏器功能不全关系密切。自噬途径异常可能是脓毒症脏器功能损伤的重要原因,该文对自噬及其在脓毒症中的表现、分子机制以及调节途径进行综述,旨在了解脓毒症脏器损伤的机制,以期为脓毒症脏器功能保护寻求新的途径。

危重症病人早期肠内营养联合新斯的明疗效观察

目的:探讨早期肠内营养(EEN)联合新斯的明足三里注射对危重症病人救治的效果。方法:80例危重症病人随机分为EEN组和EEN+新斯的明组,每组40例。两组均给予等热量、等氮量的EN支持。EEN+新斯的明组病人同时行双侧足三里穴位注射新斯的明各0.5 mg,每2 d一次,连用14 d。病人分别于EN支持前和EN支持后第1、7、14和21天检测血清清蛋白(ALB)、血红蛋白(Hb)、淋巴细胞计数(PLT)、氮平衡(NB);EN支持后第14和21天测定免疫学指标(lgM,lgG,lgA)和T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8、CD4/CD8比值)。并记录EN使用期间达TEN时间、EEN达标率和EN并发症的发生率等临床指标。结果:两组病人EN治疗后各项营养指标均较治疗前改善。EEN+新斯的明组病人第14天时ALB、TLC、NB以及第21天时ALB、Hb、TLC、NB改善均明显优于EEN组(P<0.05)。EEN+新斯的明组第14和21天时lgA水平明显低于EEN组(P<0.05),且CD4、CD4/CD8比值较亦EEN组明显升高(P<0.05)。EEN+新斯的明组病人对EN的耐受性显著高于EEN组[(4.8±0.7)d vs(6.7±1.3)d](P<0.05),EEN达标率亦明显升高(63.33%vs 48%,P<0.05),EN相关并发症发生率明显减低。结论:EEN支持联合新斯的明足三里注射治疗能改善危重症病人的营养状况,增强病人对EN的耐受,降低并发症,增强病人免疫功能。

脓毒症大鼠小肠上皮PepT1的表达变化及其与Ghrelin的相关性研究

目的探讨脓毒症对大鼠小肠上皮短肽载体1(PepT1)表达的影响以及PepT1表达与Ghrelin水平的关系。方法雄性SD大鼠48只,随机分为对照组(n=8)和脓毒症组(n=40)。脓毒症组大鼠采用盲肠结扎穿孔法(CLP)建立脓毒症模型,模型建立后4、8、12、16、20h分别处死8只小鼠,留取小肠黏膜和全血标本。光镜下观察空肠黏膜的病理学变化,ELISA方法检测血清及肠黏膜Ghrelin水平,Real-time PCR及Western Blotting分别检测肠上皮PepT1 mRNA及蛋白的表达。结果 CLP所致脓毒症导致大鼠小肠黏膜明显损伤,主要表现为黏膜短缩、脱落,毛细血管扩张出血和溃疡形成。脓毒症8、12、16、20h各亚组小肠上皮PepT1 mRNA表达水平均较对照组明显下降(P<0.05),但各亚组间表达水平无明显差异(P>0.05);脓毒症12、16、20h亚组小肠上皮PepT1蛋白表达较对照组及脓毒症4h和8h亚组减少(P<0.05);血清和肠黏膜Ghrelin水平均在建模4h时达高峰,之后逐渐下降,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);血清和肠黏膜Ghrelin水平与PepT1蛋白表达均呈正相关(r=0.792、r=0.756,P<0.001)。结论脓毒症时Ghrelin表达水平在短暂上升后显著下降,与小肠上皮PepT1蛋白表达密切相关,可能是导致脓毒症时小肠上皮PepT1表达下降的原因之一。

Nod2-Rip2信号通路在短肽载体PepT1介导的细菌产物引发小肠黏膜炎性损伤中的作用

目的:探讨Nod2-Rip2-NF-κB信号通路在PepT1转运细菌产物酰基二肽(MDP)诱导小肠黏膜炎性损伤中的作用。方法:将80只大鼠随机分为正常组、实验对照组、MDP灌注组和PepT1竞争抑制组,每组20只。正常组大鼠不作处理,其余三组分别给予Krebs-Ringer缓冲液、加细菌产物MDP的缓冲液、加MDP和Gly-Gly的缓冲液灌注4 h。大鼠处死后采集小肠标本,检测小肠组织的病理变化和黏膜中Nod2和Rip2 mRNA表达、NF-κB活性和炎性因子,如肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素8(IL-8)、髓过氧化物酶(MPO)水平。结果:小肠组织病理学表明,MDP可引起炎性细胞的聚集和肠黏膜损伤。大鼠小肠内灌注MDP后,其黏膜中Nod2与Rip2mRNA的表达、NF-κB的结合活性以及炎性物质MPO、IL-8、TNF-α的表达均较正常组和实验对照组明显升高。上述表现被营养性二肽Gly-Gly明显抑制。结论:Nod2-Rip2-NF-κB信号通路在PepT1转运细菌产物并激活肠道炎性反应中发挥着重要作用。

脓毒症大鼠小肠上皮短肽载体生物学功能的变化

目的:探讨脓毒症对大鼠小肠上皮短肽载体(PepT1)的表达和功能变化影响。方法:将60只大鼠分为对照组(n=10)和脓毒症组(n=50),采用盲肠结扎穿刺术(CLP)动物模型。模型建立后4、8、12、16和20 h留取血标本和小肠黏膜,行肠黏膜病理检查,用Elisa方法检测血清、肠黏膜肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平,实时定量PCR和蛋白印迹法分别检测肠上皮PepT1 mRNA和蛋白表达。采用高效液相色谱法检测PepT1的摄取功能。结果:CLP所致的脓毒症大鼠小肠黏膜明显损伤,表现为黏膜短缩、脱落,毛细血管扩张出血和溃疡形成。血清和肠黏膜TNF-α、IL-1β水平均在建模4 h时达高峰,之后逐渐下降,显著高于对照组(P<0.05)。脓毒症8、12、16和20 h组小肠上皮PepT1 mRNA表达水平较对照组明显下降(P<0.05),PepT1蛋白表达也较对照组显著减少(P<0.05)。脓毒症12、16和20 h组小肠上皮PepT1对底物的摄取功能较对照组明显下降(P<0.05),摄取量也较脓毒症4 h和8 h组明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:CLP所致的脓毒症大鼠小肠上皮PepT1 mRNA和蛋白表达明显下降,机体在基因和蛋白水平下调了肠上皮PepT1生物学功能。

糖皮质激素雾化吸入对呼吸窘迫综合征患者肺纤维化的疗效观察

目的观察经雾化吸入糖皮质激素对成人呼吸窘迫综合征(ARDS)患者临床症状及肺纤维化的影响。方法选择2011年12月-2013年6月入住上海市松江区中心医院ICU的ARDS患者53例,随机分成两组。A组(常规治疗组)给予常规治疗,B组(雾化治疗组)在常规治疗基础上给予糖皮质激素雾化治疗(布地奈德,2mg/次,每12h 1次,应用12d)。比较两组氧合指数、疗效及预后、肺纤维化指标Ⅰ型胶原肽(CoⅠ)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)及转化生长因子β1(TGF-β1)等的变化,分析常见不良反应的发生率。结果与A组相比,B组患者第15天氧合指数明显改善(P<0.05);ELISA法检测结果显示,两组间CoⅠ、PⅢP、TGF-β1比较差异均有统计学意义(P<0.05);激素治疗并未增加不良反应的发生(P>0.05)。结论小剂量雾化吸入糖皮质激素可改善ARDS患者氧合指数及肺纤维化水平,且常见不良反应并无增加,提示激素雾化治疗ARDS安全有效。

鲍曼不动杆菌荚膜厚度对鼠巨噬细胞炎症复合体活化的影响

目的:探讨荚膜厚度不同的鲍曼不动杆菌激活鼠巨噬细胞Raw 264.7炎症复合体能力的差异。方法:采用刚果红染色法观察鲍曼不动杆菌荚膜,筛选出荚膜厚度差异显著的两株菌株。将两株菌分别感染Raw 264.7,以实时定量PCR法分析感染6 h的细胞NOD样受体家族3(NOD-like receptors,NLRP3)、Caspase-1和IL-1β基因表达量;流式细胞术分析感染1、3和6 h的细胞活性氧表达量。结果:刚果红染色可以清晰地观察到鲍曼不动杆菌周围一圈不着色的荚膜,选择出荚膜厚度差异显著的两株鲍曼不动杆菌用于感染细胞。不同荚膜厚度的鲍曼不动杆菌感染均可刺激Raw 264.7细胞NLRP3、Caspase-1和IL-1βmRNA表达上调,其中厚荚膜菌株诱导细胞NLRP3和IL-1βmRNA表达能力显著高于薄荚膜菌株(P <0.05);不同荚膜厚度的鲍曼不动杆菌感染3 h和6 h时,细胞活性氧表达量均显著高于对照组(P <0.05),且厚荚膜菌株诱导活性氧表达能力显著高于薄荚膜菌株(P <0.05)。结论:不同荚膜厚度的鲍曼不动杆菌活化鼠巨噬细胞炎症复合体能力存在差异,厚荚膜菌株诱导炎症复合体活化的能力更强。

利福平通过促进自噬保护帕金森病模型细胞损伤

目的:探讨利福平对α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)多聚体水平的影响及其与细胞自噬的关系。方法:用不同浓度鱼藤酮、利福平、自噬抑制剂氯喹和自噬促进剂雷帕霉素处理SH-SY5Y细胞,MTT法检测细胞存活率,筛选最佳实验浓度;蛋白质印迹法检测氯喹和雷帕霉素处理后不同时间点细胞内Beclin-1表达水平,确定最佳作用时间;蛋白质印迹法检测鱼藤酮、氯喹和雷帕霉素处理后Beclin-1和α-syn多聚体的表达;将SH-SY5Y细胞分为对照组、鱼藤酮组、利福平+鱼藤酮组和利福平组,流式细胞术检测4组细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测α-syn多聚体及自噬标志蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、p62的表达;在上述分组基础上,蛋白质印迹法检测氯喹和雷帕霉素预处理后各组细胞α-syn多聚体的表达。结果:利福平浓度为150μmol/L时细胞存活率最高;氯喹、雷帕霉素调节自噬的最佳处理条件分别为10μmol/L(1 h)、10 nmol/L(2 h);与对照组相比,鱼藤酮、氯喹均能显著增加细胞内α-syn多聚体表达(P均<0. 01),降低Beclin-1表达(P均<0. 05),雷帕霉素能显著提高Beclin-1表达(P <0. 01);与对照组比较,鱼藤酮组细胞凋亡率明显上升(P <0. 05),p62和α-syn多聚体表达增加,Beclin-1和LC3-Ⅱ/Ⅰ表达明显降低(P均<0. 01);与鱼藤酮组相比,利福平+鱼藤酮组细胞凋亡率明显降低(P <0. 05),p62和α-syn多聚体表达明显减少,Beclin-1和LC3-Ⅱ/Ⅰ表达明显升高(P均<0. 01);与利福平+鱼藤酮组比较,氯喹预处理后α-syn多聚体表达明显增加(P <0. 01)。结论:利福平能减少鱼藤酮诱导的多巴胺能神经元凋亡,可能通过促进细胞自噬降低α-syn多聚体表达。

经皮电刺激治疗帕金森病患者功能性便秘的临床研究

目的:探讨经皮电刺激(transcutaneous electrical stimulation,TES)对帕金森病(Parkinson disease,PD)患者功能性便秘的治疗作用。方法:选取2021年7-12月镇江市第四人民医院神经内科的PD患者76例,采用随机数字表法将患者分为对照组和试验组,每组38例。对照组给予常规治疗,试验组在对照组的基础上给予TES治疗,治疗时间为2周。比较两组每周完全自主排便(complete spontaneous bowel movements,CSBMs)次数;比较两组胃动素和胃泌素水平、胃窦运动指数及患者便秘状况评估问卷(patient assessment of constipation quality of life questionnaire,PAC-QOL)评分。结果:治疗后第2周,试验组CSBMs次数多于对照组;治疗2周后,试验组胃动素水平高于对照组(P<0.05),两组胃泌素水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗2周后,试验组胃窦运动指数高于对照组(P<0.05);治疗2周后,试验组PAC-QOL评分低于对照组(P<0.05)。结论:TES治疗显著促进PD患者的胃肠动力,对PD患者功能性便秘的治疗有显著的效果。

红细胞膜磷脂酰丝氨酸外露在脓毒症患者贫血发生中的意义

目的探讨红细胞膜表面磷脂酰丝氨酸（Ps）外露在脓毒症患者贫血发生中的意义。方法采用自身前后对照研究方法，选择30例重症监护病房（ICU）脓毒症患者，分别在入ICU1d、7d时采集外周静脉血，常规测定血红蛋白（Hb）；采用膜联蛋白V／碘化丙啶（Annexin V／PI）染色方法，用流式细胞仪测定外周血中PS外露红细胞所占比例，分析Hb水平与Ps外露红细胞比例之间的相关性。结果30例脓毒症患者入ICU7d时的Hh水平较1d时显著下降（g／L：81．59±3．31比121．90±3．34，t=8．570，P=0．000）．外周血中PS外露的红细胞比例也明显高于1d时[（17．19±1．35）％比（7．87±0．83）％，t=-6．557，P=0．000]；Pearson直线相关分析显示，PS外露红细胞比例与Hb水平呈显著负相关（r=-0．838，P=0．000）。结论外周血Ps外露的红细胞在脓毒症患者中明显增加，且与患者贫血程度有关，贫血程度越严重，红细胞PS外露水平越高。

脑肠肽Ghrelin对脓毒症大鼠小肠上皮短肽载体1调节作用的研究

目的探讨脑肠肽Ghrelin对脓毒症大鼠小肠上皮短肽载体1（PepT1）表达及功能的影响。方法雄性SD大鼠80只，按随机数字表法分为正常组、假手术组、脓毒症组和Ghrelin干预组4组，每组20只。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症大鼠模型；制模后即静脉给予Ghrelin干预。各组术后20h随机取10只大鼠，进行小肠黏膜病理观察，实时定量聚合酶链反应（PCR）和蛋白质免疫印迹试验分别检测PepT1的mRNA和蛋白表达，同时检测小肠上皮PepT1对底物Gly—Sar的摄取浓度；另10只大鼠记录7d生存率。结果与正常组和假手术组相比，脓毒症组小肠黏膜受损明显，PepT1mRNA表达（21．43±1．37比23．29±1．24、23．23±1．48）、蛋白表达（7832．55±699．74比13584．74±360．66、13152．51±605．72）以及Gly—Sat浓度（60min：3．23±0．30比6．67±0．51、6．52±0．47）均明显降低（均P〈0．05）；与脓毒症组比较，Ghrelin干预组大鼠小肠黏膜损伤较轻，生存率（40％比20％）、PepT1mRNA表达（22．73±1．16比21．43±1．37）、蛋白表达（10506．26±850．59比7832．55±699．74）及Gly—Sar浓度（60min：4．83±0．32比3．23±0．30）均显著升高（均P〈0．05）。正常组与假手术组各指标比较无显著差异。结论脓毒症大鼠小肠上皮PepTlmRNA及蛋白表达明显下降，机体在基因及蛋白水平下调了小肠上皮PepT1生物学功能；Ghrelin干预对脓毒症小肠上皮PepT1mRNA、蛋白表达以及摄取能力均有上调作用。

二级医院联合社区一体化管理对高血压治疗的研究

目的摸索适合农村社区的创新的二级医院联合社区对高血压综合干预管理模式及其效果。方法回顾医改2009—2011年，二级医院联合农村社区对高血压患者实行的建档随访、健康教育、饮食、运动及行为干预、合理用药等综合措施后管理干预，并对部分高危极高危患者的靶器官之一心脏左室重量指数的基线和随访3年后的指标的记录及对比。结果控制率由2009年的51．11％增加到2011年的61．35％；脑血管病病死率呈下降趋势，由2009年的120．61／10万下降到2011年的100／10万（P〈0．01）。高危和极高危患者的血压达标与未达标组的左室重量指数，达标基线（123．6±35．3）g／m^2，末次（119．5±37．8）g／m^2（P〈0．01）；未达标基线（130．8±40．5）m^2，末次（136．5±54．1）g／m^2，无明显差异（P〉0．01）。结论二级医院社区一体化高血压管理在农村社区实施是可行、有效的，但需进一步完善。

连续性血液滤过在重症中暑救治中的应用研究

目的:探讨连续性血液滤过(CHF)对重症中暑患者内环境和生存率的影响。方法:2011-07-2013-08因重症中暑收入我院GICU患者42例,分为对照组(n=22)和研究组(n=20),观察2组患者体温、炎性递质及病死率情况。结果:2组治疗后1、6、24、48h体温下降比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗48h后,研究组炎性递质肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)显著降低,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:CHF能够改善重症中暑患者的预后,延长其存活时间,改善患者的生存率,其机制可能与早期快速降温,及时清除炎性递质有关。

脓毒症患者外周血红细胞膜磷脂酰丝氨酸的外露

目的研究脓毒症患者外周血红细胞的形态改变及红细胞膜表面磷脂酰丝氨酸（PS）的外露情况。方法采用配对设计随机分组方法，分别对正常对照组（n=30）和脓毒症患者组（n=30）进行静脉采血，行瑞氏染色血涂片观察和测定红细胞聚集指数，并采用对Ps有高度亲和力的磷脂结合蛋白AnnexinV检测技术，利用流式细胞仪对红细胞进行荧光测定。结果显微镜下观察脓毒症患者外周血红细胞形态发生明显异常改变，呈棘形、泪滴形、球形、缗线形等变化，细胞明显聚集；同时红细胞聚集指数测定结果显示脓毒症组较正常对照组也明显升高，其差异有统计学意义（P〈0．05）。脓毒症组Ps外露的红细胞比例明显高于正常对照组，其差异有统计学意义（P〈0．001）。结论脓毒症患者外周血红细胞表面Ps的外露表达明显增加，同时红细胞形态发生明显异常变化。

重复经颅磁刺激辅助功能康复训练对帕金森病患者康复的效果

目的探讨重复经颅磁刺激辅助功能康复训练对帕金森病患者康复的效果.方法选择该院2019年10月—2021年1月收治的60例帕金森患者为研究对象,以随机数表法分为两组.对照组(n=30)采用功能康复训练,观察组(n=30)在对照组基础上采用重复经颅磁刺激干预.对比两组治疗前后的帕金森病生活质量问卷39(PDQ-39)与帕金森病评价量表(UPDRS)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ部分评分.结果治疗前,两组生活质量、日常生活能力与运动功能比较,组间差异无统计学意义(P>0.05).治疗后,观察组PDQ-39量表中身体活动、日常生活行为、精神健康、屈辱感、社会支持、认知、交流、身体不适的评分分别为(17.07±3.31)分、(9.20±3.28)分、(13.38±3.19)分、(5.10±1.35)分、(4.16±1.06)分、(4.10±1.84)分、(4.19±1.33)分、(4.75±1.20)分,均低于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,观察组UPDRSⅠ评分与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组UPDRSⅡ、Ⅲ评分分别为(13.46±1.58)分、(18.10±3.75)分,均小于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05).结论重复经颅磁刺激辅助功能康复训练能有效提高帕金森患者的生活质量,并提高其日常生活能力以及运动功能,有利于延缓患者病情进展.