利用纤维素水解液中的纤维二糖发酵制备丁二酸

纤维素水解液中通常含有纤维二糖。本文考察了Actinobacillus succinogenes NJ113利用纤维二糖厌氧发酵生产丁二酸的能力,并利用蔗渣纤维素制备纤维二糖作为碳源用于厌氧发酵生产丁二酸。3 L发酵罐厌氧发酵结果显示:以35 g/L纤维二糖作为碳源发酵制备丁二酸,其产量为23.51 g/L,产率达到67.17%;用含有18 g/L纤维二糖和17 g/L其它糖类的蔗渣纤维素水解液作为碳源发酵制备丁二酸,丁二酸的产量和产率分别为20.00 g/L和64.73%。因此,Actinobacillus succinogenes NJ113具有较强的利用纤维二糖生产丁二酸的能力,而且利用废弃的纤维素制备纤维二糖作为碳源高效、经济地发酵制备丁二酸具有可行性。

重组大肠杆菌产蔗糖磷酸化酶的酶学性质及其催化合成α-熊果苷

利用重组大肠杆菌EscherichiacoliRosetta（DE3）／pET-SPase发酵生产蔗糖磷酸化酶（EC2．4．1．7，Sucrosephosphorylase，SPase）。收集的菌体经高压破碎后离心得到粗酶液，通过镍NTA亲和层析、超滤除盐后得到电泳纯的SPase，纯化后的SPase的比酶活是原来的2．1倍，酶活回收率达到82．7％。经SDS．PAGE电泳测定，重组SPase的分子量约为59kDa。该酶在不高于37℃，pH6．0～6．7的条件下比较稳定，最适催化温度与最适催化pH分别为37℃，pH6．7，该酶对蔗糖的米氏常数（Km）为7．3mmol／L，最大反应速率（Vmax）为0．2／μmol／（min·mg）。此外文中还以蔗糖和氢醌为底物，利用重组SPase催化合成a-熊果苷。其最佳反应条件为：20％蔗糖，200U／mL的酶液，1．6％氢醌，pH6．0～6．5，25℃，反应21h。a-熊果苷的摩尔产率为78．3％，a-熊果苷的产量为31g／L。