刚地弓形虫自噬相关蛋白3基因的克隆表达与多抗制备

目的克隆、表达刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)自噬相关蛋白3(Tg Atg3)基因,并制备能特异性识别该蛋白的多克隆抗体。方法以弓形虫RH株c DNA为模板,构建p ET28a-Tg Atg3重组质粒,转化入大肠埃希菌(E.coli)Rosetta感受态细胞,经自诱导培养基诱导表达,用镍柱亲和层析法纯化诱导表达产物,以小鼠抗His标签单克隆抗体作为一抗,蛋白质印迹(Western blotting)进行鉴定。以纯化的Tg Atg3蛋白作为抗原皮下多点注射免疫日本大耳白兔,125μg/(只·次),免疫4次后心脏取血,制备血清,获得特异性抗Tg Atg3多克隆抗体。对制备的多克隆抗体进行Western blotting与间接免疫荧光法(IFA)鉴定。结果双酶切、PCR扩增及测序结果证实目的片段序列正确,原核表达质粒p ET28a-Tg Atg3构建成功。SDS-PAGE和Western blotting结果表明,重组E.coli中可见相对分子质量(Mr)约44 000的可溶性Tg Atg3蛋白的高效表达。抗体检测Western blotting结果显示,制备的多克隆抗体能特异性识别弓形虫RH株的Tg Atg3蛋白。IFA结果显示,该多克隆抗体可与虫体胞浆内Tg Atg3结合。结论获得重组可溶性Tg Atg3蛋白,制备的多克隆抗体能特异性识别弓形虫RH株的天然Atg3蛋白。

浅析医学生就业面临的形势与对策

随着医学高校的不断扩招,现阶段的医学毕业生越来越多,医学毕业生的就业问题成为现阶段重要的话题.面临毕业的医学生很多,但是医院大多数都有学历和专业的限制,使得很多毕业生不能够找到合适的、理想的工作,或者是医学生对自己没有很好的职业规划,使得高校毕业生的就业率一直不太理想.文章首先分析现阶段医学生就业面临的形势,然后重点探讨医学生就业的对策,以供相关人员参考.

家庭医生制度下脑卒中高危人群筛查结果及成本分析

目的对上海市新虹社区开展家庭医生制度下脑卒中高危人群筛查,对筛查结果和筛查成本进行分析,为城市地区开展脑卒中社区防治提供政策依据。方法按每位家庭医生管辖区域,随机抽取所管辖建档高血压患者家庭100户,调查该家庭中35周岁及以上共2 760名居民。采用统一制定的《脑卒中高危人群信息登记表》面对面进行调查共2 693人。采用现场集中方式对高危人群筛查阳性居民进一步开展《脑卒中高危人群初筛评估表》问卷调查并检查血清同型半胱氨酸(Hcy)和颈动脉彩超检查,共完成筛查868人。结果问卷筛查出高危人群868人,检出率为32.23%。血Hcy检测结果:低Hcy 140人(16.13%)、中Hcy 424人(48.85%)以及高Hcy304人(35.02%)。颈动脉超声检查有颈动脉斑块者为548人(63.13%),颈动脉狭窄者19人(2.19%)。平均问卷筛查1例成本为16.54元/例,确诊1例高危人群平均成本为51.32元/例;平均完成2个项目筛查成本为93.54元。结论高血压家庭成员脑卒中危险因素暴露处于较高水平;慢性病患者家庭健康管理应是家庭医生工作重点,50岁以上男性居民是社区脑卒中防治中重点人群;应该加强筛查的成本管理,提高筛查收益。