应用生物反应器制备人用乙型脑炎纯化疫苗

目的:应用生物反应器培养Vero细胞和乙型脑炎病毒,大规模生产灭活乙脑疫苗。方法:采用乙型脑炎病毒株(京卫研P3株)构建毒种库,Vero细胞为培养基质,应用特定型号的生物反应器,投入25g/L的微载体,以灌流方式培养细胞,连续收获乙脑病毒液,经过浓缩、灭活、纯化等工艺制备病毒原液,并最终分装成疫苗制品。结果:细胞培养密度达到1.5*107个/毫升;病毒滴度8-9LogLD50/毫升;层析纯化的杂蛋白去除率大于99.9%,总蛋白含量小于10ug/剂,残余DNA含量小于10pg/剂。结论:应用生物反应器进行Vero细胞培养,病毒连续灌流收获,可大规模生产灭活人用乙型脑炎纯化疫苗。

病毒类疫苗Vero细胞宿主蛋白残留量检测试剂盒的适用性验证

目的对病毒类疫苗Vero细胞宿主蛋白残留量检测试剂盒进行适用性验证。方法将不同细胞基质制备的乙型脑炎灭活疫苗、人用狂犬病病毒疫苗共16批编盲后，每批疫苗均质等量分为44份，分别分发给3个实验室，用同批ELISA-Vero细胞宿主蛋白检测试剂盒进行检测，对试剂盒进行适用性验证，考核试剂盒的专属性、精密性、线性和范围等指标。结果3个实验室检测每批样品44次，原代地鼠肾细胞和鸡胚细胞为基质的疫苗检测结果均为阴性，以Vero细胞为基质的疫苗检测结果均为阳性。16份样本44次检测结果的变异系数在7．34％～14．77％之间，均低于15％；相对线性范围在12．5—400ng／ml之间。16份疫苗中6批Vero细胞乙脑疫苗和5批人用狂犬病病毒疫苗检出的细胞宿主蛋白残留量分别在153．3—5850．9ng／ml和1895．7～40625．1ng／ml之间。结论疫苗中Vero细胞宿主蛋白残留量检测试剂盒具有较好的专属性、精密性和线性，可用于Vero细胞为基质的病毒类疫苗宿主蛋白残留量的检测。

2011—2020年长春关区输入性疟疾流行病学特征分析

本文旨在对2011—2020年长春关区输入性疟疾流行病学特征进行横断面研究。2011—2020年吉林国际旅行卫生保健中心(长春海关口岸门诊部)报告长春关区输入性疟疾病例23例,对其进行检测时间、境外停留地、人群分布分析,对实验室检测情况、临床症状、采样前用药情况等进行分类统计。23例病例中恶性疟占47.83%(11/23),间日疟占30.43%(7/23),三日疟占13.04%(3/23),恶性疟、间日疟混合占8.70%(2/23);患者以青壮年为主,男性患者与女性患者比例为6.7:1;境外停留地主要为安哥拉、尼日利亚、加蓬、刚果、坦桑尼亚;常见的典型症状为发热、关节肌肉痛、寒战和多汗,部分病例伴有呕吐、食欲不振、咳嗽和腹泻等症状;有30.43%的病例在采样前口服或注射青蒿素类药物。在口岸传染病防控工作中,除了疟疾应同时关注其他传染病,持续做好多病同防工作。

Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗的接种反应及免疫效果观察

目的观察Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗的接种反应及免疫效果。方法选择乙脑低发区黑龙江省肇源县8月龄～10岁常住健康儿童为观察对象,按照免疫程序分别接种辽宁成大生物股份有限公司生产的Vero细胞乙脑灭活疫苗(A组∶水针剂型;B组:冻干剂型)和市售乙脑灭活疫苗(对照组),观察接种后的不良反应,并采用蚀斑减少中和试验(PRNT)法检测血清乙脑中和抗体。结果A、B组疫苗的总不良反应率为2.81%,对照组为6.63%,3组均未出现严重不良反应,发热反应以轻度为主,局部不良反应较轻微,72h后全部消失。免疫后血清中和抗体阳转率A组为93.3%,B组为90.4%,对照组为81.8%;GMTA组为1∶24.0,B组为1∶21.8,对照组为1∶15.4。A组、B组的中和抗体阳转率和GMT均显著高于对照组,差异有统计学意义,3组之间中和抗体滴度的分布差异无统计学意义。结论辽宁成大生物股份有限公司生产的Vero细胞乙脑灭活疫苗不良反应率低,免疫效果良好。

Vero细胞制备流感病毒疫苗

目的利用转瓶培养Vero细胞制备流感病毒疫苗。方法将流感病毒接种于Vero细胞上培养,优化培养条件,收获的病毒液经灭活、超滤浓缩和层析纯化,检测病毒的血凝素(HA)滴度及血凝素含量。按此工艺制备流感疫苗,根据血凝素含量稀释为不同浓度,免疫小鼠,观察不良反应,并通过血凝抑制(HI)试验检测抗体水平。结果Vero细胞培养流感病毒的最佳条件为:维持液中胰酶浓度12.5～15μg/ml,pH值7.4～7.6,Vero细胞经多次洗换后再接种病毒,病毒在细胞上培养72～96h收毒。所有免疫小鼠均未出现不良反应,小鼠抗体阳转率均为100%,HI抗体滴度均不低于同剂量的阳性对照组。结论Vero细胞可用于流感病毒的培养和制备疫苗。