特异性转移因子对肺癌的免疫治疗

报告应用特异性肺癌转移因子(SPTF)对肺癌患者进行免疫治疗的效果观察。肺癌患者50例分为两组,一组化疗加用SPTF(35例),一组单纯化疗作为对照(15例)。结果化疗反应SPTF组比对照组明显减轻。用OKT单克隆抗体检测外周血T淋巴细胞亚群,发现SPTF组治疗前后OKT_4、OKT_8、OKT_4/OKT_8比值差别非常显著(P<0.001),对照组治疗前后差别不显著(P≥0.05)。以上结果提示SPTF能提高肺癌患者的免疫功能,对肺癌的转归发生良好作用。本组采用的SPTF具有取材来源充足,有抗原特异活性及无毒副作用等优点。

改良酸性胍一步法提取RNA技术

酸性胍一步法提取RNA具有省时、量高和质纯等优点,但是不易在国内现有条件下进行,因此本文对该法进行了改良。实验表明,与CsCl法和酸性胍一步法比较,改良一步法保持了RNA产量、poly(A)+RNA产率、260/280比值和分子完整性等参数水平,并且易于在国内现有条件下推广使用,由此为酸性胍一步法提取RNA提供了可行的方法。

山羊HSV-1特异转移因子活性组分的高效液相色谱纯化和鉴定

作者应用反相高效液相色谱(RP-HPLC)C_(18)柱,对亲和色谱分离的Ⅰ型单疱病毒(HSV-1)特异转移因子(TF_(HSV-1)活性组分进行纯化;分别收集RP-HPLC分离的各组分,用^(51)Cr标记的白细胞粘附抑制试验逐一检测其TF活性;再对其中具有TF活性的组分进行等电聚焦电泳,分析其纯度和等电点.结果显示,RP-HPLC分离的TF第2组分能诱导正常小鼠脾细胞产生对HSV-1的特异粘附抑制效应,具有TF_(HSV-1)抗原特异活性的特征,且此活性与TF_(HSV-1)粗提物产生的活性效应比较,提高约10000倍;该组分经高敏感银染色,在等电聚焦电泳呈现一条电泳区带,其等电点为pH4.48.这些结果表明,经RP-HPLC纯化已得到TF_(HSV-1)的单一活性成分.

逆转录制备cDNA探针对人胃癌MGC80—3细胞系多种癌基因转录的同步检测

本文报道利用人胃癌MGC80-3细胞系总polyA ^+RNA,逆转录制备cDNA探针,并与多种克隆癌基因的质粒DNA斑点杂交,同步检测倍增生长的人胃癌MGC 80-3细胞系不同原癌基因转录本的丰度。结果发现,V-sis、c-erbB-2、V-abl、H-ras、K-ras和c-myc质粒DNA的斑点出现阳性杂交信号,其中V-sis、c-erbB-2的斑点信号最强。说明人胃癌MGC80-3细胞系中,多种原癌基因协同地进行表达。

山羊单纯疱疹病毒Ⅰ型特异转移因子活性成分的生化鉴定

作者在经亲和色谱和反相高效液相色谱分离纯化,获得山羊单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)特异转移因子单一活性成分(PTFC)。用高效凝胶色谱确定PTFC的分子量(Mr),在薄层色谱观察其254nm的紫外吸收点和366 nm与荧光胺结合产生的荧光点,并检测PTFC的氨基酸组成和序列.结果显示,该成分的Mr为6000;薄层色谱后出现-254 nm紫外吸收点和荧光胺显色点,两点重叠于薄层板同一位置;其HC1水解产物含有至少12种氨基酸,其中天冬氨酸含量占12种氨基酸的44.2％,经Edman降解未检测到PTFC的氨基酸序列.实验结果表明,PTFC是Mr为6000的多肽与核苷酸样物质的复合物,其多肽部分富含天冬氨酸,肽链N末端可能封闭。

人胃癌组织cDNA文库的建立

本文直接从一例人低分化胃腺癌组织中提取RNA和分离poly(A)^+RNA,进而合成双链cDNA。再以λgt10作为克隆载体和大肠杆菌C600hfl作为受体菌,构建了人胃癌cDNA文库。该文库中含有1.10×10~5重组子,重组率约为68.8％,克隆效率为2.21×10~6克隆/μgcDNA。

山羊单纯疱疹Ⅰ型特异转移因子的亲和色谱分离和鉴定

作者应用亲和色谱,从Ⅰ型单疱病毒(HSV 1)免疫山羊的淋巴细胞透析物,分离HSV-1特异转移因子(TF_(HSV-1))活性组分,再以^(51)Cr标记的白细胞粘附抑制试验(^(51)Cr-LAIT)和高效液相疏水色谱(HI-HPLC)鉴定该组分的生物活性和纯度。结果显示,亲和色谱分离的TF_(HSV-1)组分,能诱导正常小鼠脾细胞产生对HSV-1特异抗原的粘附抑制效应,具有TF的抗原特异活性;该组分经HI-HPLC分析,在色谱图上仅呈现两个分离峰.上述结果表明,已从TF_(HSV-1)粗提物中分离到部分纯化的TF_(HSV-1)活性组分.亲和色谱是分离TF的有效方法。

人胃癌组织基因组文库中异常高表达基因及c－myc阳性克隆的筛选

目的：为了研究人胃癌组织中癌基因及其调控序列是否存在结构上的改变，首先需要分离并获得所需研究的基因．方法：用人胃癌异常高表达基因ｃＤＮＡ片段（ｈＳＣＧ－３）和ｃ－ｍｙｃ基因为探针，经同位素标记，对所构建的人胃癌组织基因组文库进行二轮噬菌斑原位杂交筛选．结果：从该基因组文库中分别筛选得到２个和６个阳性克隆．结论：为进一步探讨胃癌发生的机理，以及对这二个基因进行亚克隆和序列分析奠定了基础．