响应面法优化重组大肠杆菌全细胞催化合成丙谷二肽

L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(L-alanyl-L-glutamine,丙谷二肽)是重要的肠外营养补充剂,有着广泛的应用。本文利用表达α-氨基酸酯酰基转移酶的重组大肠杆菌QC01,进行全细胞催化法合成丙谷二肽。通过最陡爬坡实验筛选出对全细胞催化影响最显著的三个因素:QC01细胞浓度、底物比例和反应温度,再利用响应面实验,研究了这三个因素的交互作用。最终确定全细胞催化条件为:QC01细胞浓度3g/L、底物丙氨酸甲酯盐酸盐与谷氨酰胺的摩尔比为1∶0.6、反应温度30℃、底物浓度(以丙氨酸甲酯为准)300mmol/L、反应起始pH9.0、反应时间为40min,优化后底物转化率从22.75%提高到73.85%,为全细胞法制备丙谷二肽的工业化生产提供借鉴。

聚乙二醇-碳酸钠双水相与树脂联用纯化蛋壳膜中的溶菌酶

该实验首次采用聚乙二醇(PEG2000)-Na_2CO_3双水相体系与724树脂联用的方法,对蛋壳膜中溶菌酶进行提纯,当双水相比例为35%∶15%时,溶菌酶的选择性为20.4,最终获得的溶菌酶活力为666U/mg,提取率为0.04‰。