川崎病小鼠肿瘤坏死因子α/核因子κB/基质金属蛋白酶-9通路研究

目的通过检测川崎病(KD)小鼠TNF-α、核因子-κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达及活性变化,探讨KD的发病机制。方法 3周龄C57BL/6雄性小鼠60只,分为模型组和对照组,每组各30只。模型组单次腹腔注射0.5 mL干酪乳杆菌细胞壁提取物(LCWE)制备KD模型,对照组注射等量生理盐水。检测两组小鼠注射后14、28和56 d时点外周血TNF-α水平,心脏、冠状动脉组织NF-κB、MMP-9及其组织抑制物-1(TIMP-1)表达水平,NF-κB、MMP-9表达活性。观察小鼠心脏超声改变,同时行病理学检查冠状动脉病变严重程度。结果①模型组建模后14和28 d时点超声心动图显示,冠状动脉血管内膜毛糙,血管壁与血管周围出现高回声,部分呈冠状动脉瘤样扩张改变;②模型组建模后14和28 d时点病理学检查可见冠状动脉主干周围管壁肿胀、以淋巴细胞为主的大量炎细胞浸润,弹力层显著破坏。模型组建模后14 d时点,血清TNF-α水平明显高于对照组[(389.3±0.3)vs(18.9±0.3)pg·mL-1,P<0.01];建模后14和28 d时点心脏及冠状动脉NF-κBp65蛋白表达水平模型组均显著高于对照组[14 d:(37.5±9.3)vs(14.6±5.6)μg·L-1,28 d;(57.6±13.7)vs(21.6±6.6)μg·L-1;P均<0.05];建模后14和28 d时点心脏及冠状动脉MMP-9/TIMP-1水平模型组显著高于对照组[14 d:(4.9±1.7)vs(0.5±0.4),28 d:(12.3±6.9)vs(0.09±0.1);P均<0.01]。结论 KD急性期TNF-α等炎性细胞因子分泌,NF-κB活化和MMP-9分泌上调可能是KD心脏及冠状动脉炎症发生的重要通路。

川崎病小鼠模型心脏超声评价

目的利用高频小动物心脏超声分析干酪乳杆菌细胞壁提取物(LCWE)诱导下川崎病(KD)疾病模型冠状动脉损伤的动态变化,为KD小鼠动物模型的制备及其功能评价提供依据。方法制备LCWE,取0.5 mL经腹腔单次注射制备C57BL/6小鼠的KD模型。将40只小鼠随机分为2组:KD模型组、正常对照组(磷酸盐缓冲液腹腔注射),每组20只。于LCWE注射后第10 d、21 d和60 d进行超声心动图检测,观察冠状动脉损伤动态变化。结果利用高频小动物超声心动仪成功测定了KD小鼠模型冠状动脉的变化,全部小鼠超声均检测到冠状动脉。KD模型组LCWE注射后10 d以及21 d,超声心动图显示冠状动脉管壁与血管周围出现高回声,左冠状动脉内径值比较,KD模型组左冠状动脉内径值(10 d:0.46±0.11 mm;21 d:0.47±0.09 mm)明显高于正常对照组小鼠(10 d:0.32±0.14 mm;21 d:0.36±0.06 mm),差异具有明显统计学意义(10 d:P=0.035;21 d:P=0.027),4(20%)只小鼠出现冠状动脉瘤样扩张改变;造模后60 d,KD模型组小鼠冠状动脉管壁弥漫性增厚,左冠状动脉主干内径较前缩小(0.43±0.11 mm),与正常对照组(0.38±0.02 mm)比较无明显差异(P>0.05),未见冠状动脉瘤样扩张改变。结论利用高频小动物心脏超声可获取小鼠清晰的冠状动脉图像,并能准确反映KD小鼠模型冠状动脉内径值动态变化;进一步证实LCWE诱导KD小鼠模型其冠状动脉损伤与自然病程状态的KD患儿冠状动脉损伤情况十分相似,可以很好的模拟KD冠状动脉损伤的形成过程;

正常小鼠冠状动脉的超声成像技术分析

目的探讨利用高频小动物心脏超声对C57BL/6小鼠冠状动脉进行评价的可行性,为小鼠冠状动脉相关疾病动物模型的制备及其功能评价提供依据。方法采用Vevo 770型高分辨小动物超声仪,频率30 mHz的宽频探头,对20只健康C57BL/6小鼠于4、8和12周龄时冠状动脉的情况进行观察。测定和分析不同周龄小鼠冠状动脉内径值的变化。结果全部20只小鼠超声均成功检测到冠状动脉。超声心动图显示小鼠4周龄时左冠状动脉主干内径检测值为0.36±0.02 mm,右冠状动脉主干内径值为0.29±0.03 mm;8周龄时左冠状动脉主干内径值为0.38±0.06 mm,右冠状动脉主干内径值为0.37±0.02(mm);12周龄时左冠状动脉主干内径值为0.38±0.02 mm,右冠状动脉主干内径值为0.39±0.03 mm。结论利用高频小动物心脏超声可获取正常小鼠清晰的冠状动脉图像,并能准确反映小鼠冠状动脉内径值动态变化。为小鼠冠状动脉疾病模型的制备及其功能评价提供依据。

卵圆孔未闭封堵术对合并隐匿性脑卒中或偏头痛患者的近中期疗效观察

目的探讨卵圆孔未闭(PFO)封堵术对合并隐匿性脑卒中(CS)或偏头痛患者的近中期疗效。方法选取首都医科大学附属北京安贞医院2013年10月至2020年12月诊断PFO合并CS或偏头痛的189例患者的临床资料进行回顾性分析。所有患者接受PFO封堵术治疗。记录患者的临床资料,对患者是否再发脑卒中以及偏头痛是否缓解进行随访。结果189例PFO患者中,合并CS 121例(64.0%),合并偏头痛68例(36.0%)。161例(85.2%)患者PFO封堵成功,28例(14.8%)患者因卵圆孔细小未能成功封堵卵圆孔。围术期均未出现封堵器移位、脱落、栓塞。所有患者无心包填塞、恶性心律失常、死亡等严重手术并发症。随访期间,失访28例,其余161例患者中位随访时间51个月。103例合并CS患者中,PFO封堵成功患者再发脑卒中比例明显低于未封堵成功患者[0(0/90)比15.4%(2/13)](χ^(2)=7.414,P=0.006)。58例合并偏头痛患者中,PFO封堵成功患者偏头痛未缓解比例与未封堵患者比较差异无统计学意义[46.8%(22/47)比36.4%(4/11)](χ^(2)=0.580,P=0.446)。结论PFO封堵术具有较好的安全性,对合并CS患者的疗效确切,对合并偏头痛的患者可能有一定疗效。

产前胎儿超声心动图单纯肺动脉瓣狭窄的特点与生后干预时机的判断

目的:探讨产前超声心动图特点判断单纯肺动脉瓣狭窄(PS)的生后干预时机。方法:收集2014年3月至2018年3月,在北京安贞医院心儿科门诊行产前超声检查,且经生后超声证实为单纯PS的胎儿65例作为病例组;收集同期孕检,超声孕周匹配且心脏结构及心律正常的胎儿64例作为对照组,比较两组胎儿RA/LA,RV/LV,PA/AO,右心室游离壁厚度,卵圆孔(FO)直径,二尖瓣E/A,三尖瓣E/A及VPA/AO。并按生后1年内(婴儿期)是否接受手术将病例组分为手术组(23例)和未手术组(42例),两组的产前超声检查孕周相同(P>0.05),比较两组超声特点。结果:病例组胎儿RA/LA,PA/AO,FO基底直径,V_(PA/AO)均大于正常胎儿对照组(P<0.05)。手术组平均跨肺动脉瓣压差明显高于未手术组[(80.26±15.26)vs.(34.52±15.75)mm Hg,P<0.01,1 mm Hg=0.133 k Pa]。手术组产前主肺动脉扩张、肺动脉瓣回声增强及启闭受限,三尖瓣反流的病例明显多于未手术组(均P<0.05);手术组13例胎儿出现动脉导管血流逆行灌注肺动脉,明显多于未手术组2例(56.5%vs.4.8%,P<0.01)。手术组RA/LA,FO基底直径,VPA/AO明显大于未手术组(P<0.05)。Logistic回归模型在调整了孕周后,显示VPA/AO、RA/LA(Per SD)和动脉导管血流逆灌与生后1年内是否需手术干预显著相关(OR值分别为11.82、7.28和6.62)。VPA/AO的ROC曲线下面积0.86,临界值为2.85;RA/LA的ROC曲线下面积0.78,临界值为1.26。结论:肺动脉瓣流速增快是胎儿PS诊断的主要依据,但对生后严重程度及是否需早期干预不能精准预测。VPA/AO、RA/LA及DA血流逆灌注是预测PS生后早期干预的危险因素,当VPA/AO>2.85,RA/LA>1.26时预示生后1年内需手术干预。

肺动脉吊带的诊断与治疗--附19例分析

目的:分析肺动脉吊带(PAS)的临床特征、诊断及治疗。方法:回顾性分析2007年1月至2017年9月,北京安贞医院共收治PAS患儿19例,分析其一般情况、临床特征、影像学检查、诊断、治疗和预后。结果:19例PAS患儿进入分析,男性8例,女性11例,12例合并其他心脏畸形,3例合并心脏外畸形。诊断PAS时年龄1岁3个月(0d^6岁),体质量10.6(4~24)kg。所有患儿均有不同程度的咳嗽、喘鸣,其中5例安静或轻微活动后即喘息、喘憋。患者行心脏彩色超声心动图检查及心脏多层螺旋计算机断层扫描(MDCT)明确PAS诊断;气道重建显示所有患者均存在气管狭窄,Cotton气管狭窄Ⅰ期16例,Ⅱ期3例,Ⅲ期0例。16例患儿行手术矫治,手术时年龄3岁6个月(4个月~6岁),体质量13.2(4~50)kg。1岁以下患儿术后带管时间较1岁以上患儿明显长[(0.5~264)vs.(1~5)h,P<0.05]。15例手术成功,远期随访无气管狭窄症状。结论:超声心动图可初步诊断PAS,MDCT可明确诊断PAS及伴随气道狭窄或畸形。有呼吸道症状者应尽早手术治疗,手术矫治效果满意,多数患儿的气道畸形不需手术处理。低龄及气管严重狭窄可能为PAS患者手术死亡的高危因素。

例谈职高数学教学的通俗化

将抽象的数学概念和问题具体化、形象化和生动化,从而激发学生的学习兴趣,突破数学难点。

丙种球蛋白对川崎病小鼠心脏核因子κB与MMP-9表达及活性的影响

目的 探讨静脉注射丙种球蛋白（IVIG）对川崎病小鼠心脏核因子（NF）-κB及其下游基质金属蛋白酶9 （MMP-9）的表达及活性的影响.方法 将72只3～4周龄C57BL/6小鼠按随机数字表法分为IVIG组、模型组和对照组,每组24只.前两组予干酪乳杆菌细胞壁提取物（LCWE）0.5 mg单次腹腔注射进行造模,对照组同法予生理盐水0.5 ml.IVIG组在试验第5天予IVIG（2 mg/g）腹腔注射进行干预,其他两组同样方法注射同浓度生理盐水.在实验第14、28、56天时,每组取8只小鼠分别行超声心动图检测,留取心脏标本进行病理分析.通过蛋白质印迹和电泳迁移率实验（EMSA）法检测心脏及脾脏组织NF-κB的表达.通过蛋白质印迹法和明胶酶谱法检测心脏及冠状动脉组织MMP-9表达量和生物活性.采用f检验及方差分析进行组间比较.结果 LCWE注射后HE染色可见模型组小鼠冠状动脉局部出现大量炎性细胞浸润,弹力纤维染色可见模型组冠状动脉弹力层断裂浅染.超声心动图可见实验第14天及28天模型组小鼠左侧冠状动脉的内径均值均高于IVIG组及对照组[第28天：（0.48±0.07）比（0.41 ±0.03）和（0.35 ±0.02）mm,均P＜0.01],后两组差异均无统计学意义（均P ＞0.05）.蛋白质印迹测得各时间点模型组心脏组织NF-κB以及MMP-9的蛋白表达水平均明显高于对照组和IVIG组[第28天：（58±14）比（19±11）和（25±14） μg/L,（100±41）比（35±19）和（39±19）μg/L,均P＜0.01].EMSA和明胶酶谱检测心脏组织NF-κB和MMP-9的蛋白活性水平,可见各时间点模型组均明显高于对照组和IVIG组[第28天：（84 788±2 081）比（27 220±4 990）和（50 192±1 586）μg/L,（18 560±7963）比（9 112±3 398）和（11 834±4 996） μg/L,均P＜0.05].结论 川崎病小鼠模型心脏组织的NF-κB和（或）MMP-9呈过度表达及激活状态.IVIG在川崎病小鼠模型上可有效抑制冠状动脉周围炎症细胞浸润,缓解冠状动脉损伤,其机制可能是通过抑制NF-κB和（或）MMP-9的过度表达及激活来实现的.

肥胖儿童在为期12个月高强度家庭生活方式干预治疗1年后体质指数和其他心血管风险指标持续性降低；但随访率低

研究背景儿童肥胖的发病率逐年上升，尤其是少数族裔和低收人人群^1。与正常体重同龄人相比，超重儿童释患各种疾病的风险增高、自信降低，焦虑和抑郁症的患病率也有所升高^2-2。尽管研究结果尚不充分，已有证据表明体重减轻和学习成绩提高存在一定关联^6，因而建议在临床评估及治疗肥胖儿童的过程中临床医生应起到核心作用^7.8。

健康孕妇孕晚期全血游离肉碱与母婴心脏结构和功能的关系

目的研究健康孕妇孕晚期全血游离肉碱及氨基酸水平及其与母胎、新生儿心脏结构及功能的关系。方法前瞻性选择2017年6月至2018年2月在北京市2家区级妇幼保健院(城区1家和远郊区1家)进行常规产前检查并分娩的单胎妊娠孕妇,于孕(18±1)周时行唐氏综合征筛查,孕(35±1)周时采用液相色谱-串联质谱技术检测孕妇全血及尿氨基酸、游离肉碱水平,同时行母亲及胎儿心脏超声检查,分娩后行新生儿心脏超声评估心脏结构、心功能。同时收集孕妇文化程度、初婚年龄、妊娠年龄、孕次、孕早期口服叶酸史等产前因素。采用t检验、方差分析、χ^(2)检验、Kolmogorov-Smirnov检验、Pearson相关检验、Kappa检验进行统计学分析。结果最终493对资料完整的孕妇及其新生儿纳入统计分析。孕妇孕晚期血游离肉碱水平为5.09~59.17μmol/L(参考值10.00~50.00μmol/L),平均(13.03±3.87)μmol/L;心脏超声未见结构异常,左室舒张末期内径为(45.70±3.08)mm,左室收缩末期内径为(29.17±3.12)mm,左室射血分数均≥55%;孕晚期胎儿心脏超声未检出心脏畸形。493例新生儿出生体重为(3340±313)g,<2500 g共5例(1.0%),其母亲血游离肉碱水平为(13.25±2.17)μmol/L(10.46~19.21μmol/L);出生体重>4000 g新生儿共15例(3.0%),其母亲血游离肉碱水平为(12.64±2.50)μmol/L(8.78~17.73μmol/L),2组差异无统计学意义(t=0.42,P>0.05)。493例新生儿左室舒张末期内径平均为(17.21±1.27)mm,左室收缩末期内径平均为(11.03±1.30)mm。其中64例(13.0%)新生儿左室射血分数<60%,其母血游离肉碱水平为(12.93±2.78)μmol/L(7.34~22.13μmol/L);59例(12.0%)新生儿左室射血分数>75%,其母血游离肉碱水平为(13.09±3.24)μmol/L(8.66~27.49μmol/L),2组差异无统计学意义(t=-0.29,P>0.05)。以血游离肉碱水平四分位数分4组,不同血游离肉碱水平组间孕妇、新生儿左室舒张末期内径及左室射血分数差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论健康孕妇孕晚期血游离肉碱水平处于正常低限。孕妇心脏功能及胎儿心脏结构虽未受明显影响,但孕晚期母体血游离肉碱低水平是否会影响儿童心肌功能储备及孕晚期是否需要加强肉碱摄入,值得扩大样本量继续观察。