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代谢工程技术调控3-羟基丁酸与3-羟基己酸共聚酯PHBHHx的微生物合成 被引量:5
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作者 欧阳少平 丘远征 +2 位作者 卢晓云 吴琼 陈国强 《生物加工过程》 CAS CSCD 2003年第1期60-65,共6页
3-羟基丁酸和3-羟基己酸共聚酯(PHBHHx)是一种新型生物可降解材料,其性能与3-羟基己酸(3HHx)在共聚物中的摩尔百分含量密切相关。本研究在两株嗜水性气单孢菌Aeromonas WQ和Aeromonas hy-drophila 4AK4中分别引入了编码酯酰辅酶A脱氢酶... 3-羟基丁酸和3-羟基己酸共聚酯(PHBHHx)是一种新型生物可降解材料,其性能与3-羟基己酸(3HHx)在共聚物中的摩尔百分含量密切相关。本研究在两株嗜水性气单孢菌Aeromonas WQ和Aeromonas hy-drophila 4AK4中分别引入了编码酯酰辅酶A脱氢酶的yafH基因和编码合成3-羟基丁酸-CoA的phbA和phbB基因,将A.hydrophila WQ合成的PHBHHx中的3HHx的摩尔含量由3%-5%提高到20%以上;而A.hydrophila 4AK4合成的PHBHHx中的3HHx摩尔含量则由15%左右降低到3%~12%。成功地实现了对PHBHHx单体组成的调控。 展开更多
关键词 代谢工程技术 调控 3-羟基丁酸与3-羟基己酸共聚酯 PHBHHX 微生物合成 嗜水性气单孢菌
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假单胞菌中聚羟基脂肪酸酯合成酶基因的克隆与分析 被引量:1
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作者 丘远征 张广 +1 位作者 季星来 陈国强 《无锡轻工大学学报(食品与生物技术)》 CSCD 北大核心 2002年第6期549-553,共5页
大多数二型聚羟基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoates,PHA)合成酶(PhaC)发现于假单胞菌中,其基因组成形式为两个PhaC基因中间有一个PHA降解酶PhaZ基因.根据已知的假单胞菌PHA合成酶基因区域的特殊结构,设计了采用PCR方法从假单胞菌中克隆PH... 大多数二型聚羟基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoates,PHA)合成酶(PhaC)发现于假单胞菌中,其基因组成形式为两个PhaC基因中间有一个PHA降解酶PhaZ基因.根据已知的假单胞菌PHA合成酶基因区域的特殊结构,设计了采用PCR方法从假单胞菌中克隆PHA合成酶基因的克隆方案,并成功地对一株硝基还原假单胞菌(Pseudomonasnitroreducens)和一株石竹伯克霍尔德氏菌(Burkholderiacaryophylli)中的PHA合成酶基因进行了克隆.将克隆得到的phaC1,phaZ和phaC23个基因所编码的氨基酸序列与其他6株已知PHA合成酶基因的假单胞菌的相应序列进行比较,发现这3个蛋白质在假单胞菌中的相似性很高,由phaC1,phaZ和phaC23个基因所组成的基因区域在假单胞菌中非常保守.从对PhaC1,PhaZ和PhaC2的系统进化树分析可以发现,这3个蛋白质与整个PHA合成酶基因区域的系统进化树有着一致的结构.这表明假单胞菌中的PHA合成酶基因区域可能起源于共同的祖先,而其形成可能经历了一次PHA合成酶基因加倍的过程. 展开更多
关键词 假单胞菌 聚羟基脂肪酸酯合成酶基因 克隆
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重组嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila 4AK4中3-羟基丁酸3-羟基己酸共聚酯PHBHHx的发酵生产 被引量:2
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作者 欧阳少平 丘远征 +1 位作者 吴琼 陈国强 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期709-714,共6页
3 羟基丁酸和 3 羟基己酸共聚酯 (PHBHHx)是一种性能优良的新型生物可降解材料 ,其机械和加工性能与3 羟基己酸 (3HHx)在共聚物中的含量密切相关。在嗜水气单孢菌Aeromonashydrophila 4AK4中引入了编码 β 酮基硫解酶 (β ketothiolase)... 3 羟基丁酸和 3 羟基己酸共聚酯 (PHBHHx)是一种性能优良的新型生物可降解材料 ,其机械和加工性能与3 羟基己酸 (3HHx)在共聚物中的含量密切相关。在嗜水气单孢菌Aeromonashydrophila 4AK4中引入了编码 β 酮基硫解酶 (β ketothiolase)的phbA基因和编码乙酰乙酰辅酶A还原酶 (Acetoacetyl CoAreductase)的phbB基因 ,使重组菌增加了一条利用乙酰辅酶A合成 3 羟基丁酸 CoA的代谢途径 ,这使得利用非相关性碳源调控PHBHHx的单体组成比例成为可能。利用葡萄糖酸钠和月桂酸作为碳源 ,对重组Aeromonashydrophila 4AK4进行了摇瓶培养及 5L发酵罐培养的研究。在摇瓶实验中 ,通过改变碳源中两种组分的比例 ,可以使A .hydrophila 4AK4合成的PHBHHx中的3HHx摩尔含量由原来的 15 %左右降低到 3%~ 12 % ,成功地实现了对PHBHHx单体组成的调控 ;当以月桂酸为唯一碳源时 ,在 5L发酵罐中 ,经过 5 6h的培养 ,获得了 5 1.5g L的细胞干重 (CDW) ,其中 6 2 %为PHBHHx,3HHx在PHBHHx中的摩尔含量为 9.7% ;当以 1:1的葡萄糖酸钠和月桂酸为碳源时 ,4 8h的 5L发酵罐培养获得了 32 .8g L的CDW和 5 2 %的PHBHHx含量 ,其中 3HHx在PHBHHx中的摩尔含量为 6 .7%。 展开更多
关键词 3-羟基丁酸 3-羟基己酸共聚酯 嗜水气单孢菌 3-羟基己酸
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Production of Poly(3-Hydroxybutyrate-co-3-Hydroxyhexanoate) by Aeromonas hydrophila and Recombinant Escherichia coli
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作者 丘远征 刘力平 陈国强 《Tsinghua Science and Technology》 SCIE EI CAS 2003年第4期466-470,共5页
Aeromonas hydrophila (A. hydrophila) 4AK4 produced poly(3 hydroxybutyrate co 3 hydroxyhexanoate) (PHBHHx) with an almost constant 3 hydroxyhexanoate (3HHx) content of 10%15% from lauric acid and/or soybean oi... Aeromonas hydrophila (A. hydrophila) 4AK4 produced poly(3 hydroxybutyrate co 3 hydroxyhexanoate) (PHBHHx) with an almost constant 3 hydroxyhexanoate (3HHx) content of 10%15% from lauric acid and/or soybean oil. Both A. hydrophila 4AK4 and recombinant Escherichia coli (E. coli) JMU193 (pBH32) produced PHBHHx with controllable 3HHx content when fed lauric acid and another co substrate. With glucose or gluconate as the co substrate, the 3HHx content in the copolyester produced by A. hydrophila 4AK4 was reduced slightly from 12% to 9%. However, the 3HHx content in the copolyester produced by E. coli JMU193 (pBH32) was significantly reduced from 9% to 2% with fructose as the co substrate. These results show that regulation of 3HHx content in PHBHHx can be achieved using genetically engineered E. coli. 展开更多
关键词 polyhydroxyalkanoates (PHA) poly(3 hydroxybutyrate co 3 hydroxyhexanoate) Aeromonas hydrophila recombinant Escherichia coli
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