Vinculin促小鼠肝星型细胞活化作用

目的研究Vinculin在小鼠肝纤维化模型中的表达及作用。方法成年雄性昆明小鼠25只,随机分为对照组(n=10)和实验组(n=15)。实验组皮下注射四氯化碳-粟米油混合液(6 mL/kg),2次/周,对照组皮下注射同等剂量的粟米油。造模8周后取小鼠中叶肝组织行HE染色及Masson染色检测小鼠肝脏结构变化,免疫组织化学检测Desmin,Vinculin在肝内的表达及细胞定位。人源性肝星形细胞系LX-2瞬时转染Vinculin siRNA,qPCR及蛋白质印迹检测敲减Vinculin对desmine、α-SMA的表达的影响,ELISA检测敲减Vinculin后Ⅰ型胶原纤维的生成变化。结果 CCl4处理8周后,小鼠肝脏汇管区及肝小叶周围胶原纤维增多,局部有假小叶生成趋势,免疫组化结果显示与对照组相比desmin及Vinculin阳性细胞数量增多(差异有统计学意义,P<0.05),Vinculin特异性表达于活化肝星形细胞胞膜上;qPCR结果显示敲减星形细胞Vinculin表达后,desmine和α-SMA表达量下降(差异有统计学意义,P<0.05),Ⅰ型胶原纤维表达量无明显下降。结论 Vinculin介导肝星形细胞的活化。