曲安奈德和霉酚酸酯纳米粒子的制备及其生物学特性评价

目的:探讨治疗甲状腺相关眼病(TAO)药物曲安奈德(TA)和霉酚酸酯(MMF)聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸(PEG-PLGA)纳米粒子的最佳制备工艺及体外释放性能,评价其经眶周注射治疗TAO的安全性。方法:以PEG-PLGA共聚物为原料,采用乳化法分别制备TA纳米粒子(TA NPs组)和MMF纳米粒子(MMF NPs组),以包封率为评价指标进行工艺优化。采用透射电子显微镜观察纳米粒子形态表现,采用Zetasizer粒径电位分析仪检测各组纳米粒子的粒径和电位。在体外眶周组织模拟液中,采用紫外分光光度法检测各组纳米粒子的释放性质,计算药物释放率,结合临床用药规则对药物的整体释放性质进行分析。人视网膜色素上皮hRPE-19细胞分为空白对照组、不同浓度TA组、不同浓度MMF组、不同浓度TA NPs组和不同浓度MMF NPs组,采用MTT法检测各组细胞活性,评价制剂的安全性。结果:制备载有TA和MMF的纳米粒子(TA NPs和MMF NPs),包封率分别为47.66%和16.52%,平均粒径约为600 nm,其电位均符合眶周注射的基本要求。透射电子显微镜下观察,TA NPs和MMF NPs表观圆整,均一化程度较高。体外释放体系检测TA NPs和MMF NPs的释放特性均符合临床上TAO治疗药物的给药特性,均可持续释放3周以上,其初始释放率不高,体外释放曲线较为平稳。MTT法检测,不同浓度TA组、MMF组、TA NPs组和MMF NPs组在较低浓度下无明显的细胞抑制;较高浓度下,与相同浓度TA组比较,40、80和160 nmol·L^(-1) TANPs组细胞活性明显升高(P<0.01);与相同浓度MMF组比较,50、100和200 nmol·L^(-1) MMF NPs组细胞活性明显升高(P<0.01)。结论:TA NPs和MMF NPs的物化表征参数符合眶周注射制剂的基本要求,且制备工艺简单,安全性良好,具有优良的载药和缓释效果,与TAO的临床用药治疗需求一致。