不同温度胁迫条件下太平洋牡蛎挥发性化合物的变化

为探究温度胁迫后太平洋牡蛎挥发性成分的变化,该研究采用感官评定、气相色谱-离子迁移谱(Gas Chromatography-Ion Mobility Spectroscopy,GC-IMS)、气相色谱-质谱联用(Gas Chromatography-Mass Spectrometer,GC-MS)结合多元统计分析的方法,对不同温度胁迫条件(12、22、32℃)的太平洋牡蛎挥发性成分进行了检测,同时测定了其存活率以及脂肪酸含量的变化。结果显示,胁迫6 d后,低温12℃组的存活率达到97.90%,n-3型多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated Fatty Acid,PUFA)含量升高。感官评定、GC-IMS以及GC-MS结果显示辛醛等鱼腥味醛类成分含量下降,而呈紫罗兰气味的(E,Z)-2,6-壬二烯醛升至12.15%,提供了愉悦的气味。高温32℃胁迫后存活率降至26.00%,n-3 PUFA含量下降从46.07%下降至39.59%,同时饱和醛等腥味醛类含量显著上升,加重了太平洋牡蛎的腥味,导致牡蛎的品质严重下降。最后通过统计分析筛选6种关键成分:己醛、辛醛、(E,Z)-2,6-壬二烯醛、(E)-2-壬烯醛、(E,E)-2,4-庚二烯醛以及3-辛酮。温度对太平洋牡蛎的存活率、n-3 PUFA含量及挥发性成分有较大影响,该研究为提升太平洋牡蛎品质提供了有益参考。

促进风光装备产业集群发展 加快国家清洁能源基地建设的对策研究

“双碳”背景下,我国在风光装备产业领域优势明显,拥有强大科研实力、大规模市场需求,具备良好基础条件、发展潜力和市场前景。同时也面临:核心技术有待突破,指标、分配方式有待明确;装备升级、循环再利用机制有待完善;国际“贸易保护主义”蔓延,影响出口等“瓶颈”,应充分发挥装备产业基础完善、科创资源富集等优势,抢抓机遇期,以科技创新为核心,加快核心技术攻关,加大引导基金支持力度,组团“走出去”,提升产业国际竞争力。

膳食GM1对AD小鼠神经节苷脂代谢的调控作用

为探究外源单唾液酸四己糖神经节苷脂(monosialotetrahexosyl ganglioside,GM1)对阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)小鼠内源性神经节苷脂(gangliosides,GLS)代谢的调控作用。采用淀粉样蛋白和人早老蛋白1(APPswe/PSEN1dE9,APP/PS1)双转基因小鼠作为AD模型,首先利用Morris水迷宫观测摄食GM1对APP/PS1小鼠行为学的影响;进而利用液相色谱-质谱法(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)分析GM1对APP/PS1小鼠脑皮质中GLS总体水平及各亚类水平的影响,采用多元统计分析探究GLS分子种变化。最后利用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测GLS合成与分解基因的mRNA表达。结果表明,GM1能够改善APP/PS1小鼠的空间学习与记忆能力、提高脑皮质中GLS总含量、回调APP/PS1小鼠脑皮质中GLS各亚类含量。摄食GM1能够显著上调GLS合成基因(st3gal5p1、st8sia1、b3galt4、st3gal2和soat)的mRNA表达水平,下调GLS分解基因hexa的mRNA表达水平。综上,膳食GM1可以调控AD小鼠脑内GLS的代谢。

液相色谱-串联质谱法测定海参和海胆中的单唾液酸神经节苷脂

建立液相色谱－四极杆串联质谱法定量检洲海参和海胆中单唾液酸神经节苷脂的分析方法，采川Sven－nerhohu法从海肌或海参样中提取神经节苷脂，经c8引相萃取柱净化，采用APS－2NH，柱（150mill×2．1mｍ，3μm）．以已腑和50mmol／L乙酸铵溶液（pH5．6）为流动相．梯度洗脱。样品中每种成分的定量在多反应监测模式下进行、该方法具有极高的灵敏度，定量限可低至纳克级。非硫酸酯化单唾液酸神经节汗脂（NMG）和硫酸哺化单唾液酸神经节苷脂（SMG）在1～40ng进样垃范剧内毕现良好的线性关系；定昔结果显示所测海参样品中美国红参的NMG龠艟最商，海胆样品中紫海胆的SMG含菌最高；海胆中总的单唾液酸神经节苷脂含量（4．30～6．40mg／g）明显高于各海参样品（8～J31μg／g）。该方法稳定可靠。

气相色谱质谱联用及电喷雾质谱法分析多棘海盘车的脑苷脂结构

通过硅胶柱层析法分离得到多棘海盘车脑苷脂,并采用气相色谱质谱联用(GC-MS)及电喷雾质谱(ESI-MS)分析鉴定其结构。GC-MS分析表明,多棘海盘车脑苷脂AAC-1、AAC-2的糖基组成相同,均为葡萄糖;长链碱主要由d18∶2、d18∶3以及少量的d22∶1组成;两者结构最主要的差别在脂肪酸部分,AAC-1由C2位不含羟基的脂肪酸组成,而AAC-2则由C2位含1个羟基取代的脂肪酸组成。ESI-MS分析结果表明,AAC-1和AAC-2的分子量范围在740～850amu之间。通过GC-MS和ESI-MS结合使用,可快速推测出多棘海盘车脑苷脂基本结构及单体分子组成,对下一步的构效关系研究具有重要意义。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法分析水产品中脑苷脂的含量

建立一种高效液相色谱-蒸发光散射检测法分析水产品中脑苷脂含量的方法。以TSKgel CN-80Ts色谱柱为分离柱,以正己烷-异丙醇和二氯甲烷-甲醇为流动相,采用梯度洗脱方式,流速1.0mL/min,漂移管温度50℃,氮气流速2.4L/min,选用海参、海胆、海星、鱼肝、鱼脑等水产品为研究对象。结果表明:在优化条件下14min内完成分离,脑苷脂的线性范围为0.05～5μg,检出限为0.01μg(RSN=3),相关系数>0.99,平均加标回收率为94.28%,相对标准偏差为4.90%,方法稳定性良好;在所测水产样品中,海星脑苷脂含量最高为11.21mg/g,海地瓜脑苷脂含量最低为0.35mg/g。该方法可行、快速简便、准确可靠,提示包括海参在内的水产品可以作为功能性鞘糖脂的潜在资源。

太平洋鳕鱼脑中硫苷脂的分离纯化和分析

以太平洋鳕鱼为原料,从鳕鱼脑中分离硫苷脂,确立了提取及纯化的条件,并对硫苷脂的纯度和分子种进行分析。首先,采用氯仿/甲醇(2∶1,v/v)提取总脂。然后,依次采用氯仿/甲醇/水(7∶3∶0.3,v/v/v)洗脱硅胶柱层析,含0.2mol/L乙酸铵的氯仿/甲醇/水(30∶60∶8,v/v/v)洗脱DEAE Sephadex-A25离子交换柱层析,40%甲醇脱盐和100%甲醇洗脱反相C8柱层析,获得硫苷脂纯品。最后,利用500YMC Diol液相色谱柱(3.0mm×250mm,5μm)分离,以正己烷/异丙醇(70∶30,v/v),异丙醇/水/甲酸/氨水(100∶13∶1∶0.14,v/v/v/v)为流动相梯度洗脱,采用负电喷雾电离(ESI)和母离子扫描模式,用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法分析了鳕鱼脑硫苷脂的纯度和分子种组成,并比较了其与哺乳动物脑中硫苷脂分子种组成的异同。结果表明,本实验制得的鳕鱼脑硫苷脂纯度为90.74%,与哺乳动物类似,鳕鱼脑硫苷脂的长链碱基以鞘氨醇为主,主要分子种为d18∶1-C24∶1,但脂肪酸的羟基化程度略低,且含少量独特的分子种,如d18∶1-22∶1和d18∶2-25∶2。

尿素包合法纯化孔石莼不饱和脂肪酸

用Folch法提取孔石莼总脂,经皂化后酸化制得脂肪酸,再对脂肪酸进行尿素包合,使其中饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸分离,从而提高不饱和脂肪酸的含量。在脂肪酸:尿素:无水乙醇比为1:2:20,温度为4℃,包合12h的条件下进行尿素包合结晶,效果较好,不饱和脂肪酸含量由72·43%增加到96·91%,其中十六碳四烯酸由13·63%增加到22·92%,增加68·16%,十八碳四烯酸由20·99%增加到38·82%,增加84·95%。

液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法高通量分析美国红参的脑苷脂分子种

利用液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法（LC—Q—TOFMS／MS）分析美国红参（Parastichopus californi-cus）脑苷脂的分子种组成。以氯仿-甲醇（2：1，v／v）溶液提取，经皂化和固相萃取柱（SPE）净化后，在正离子模式下。通过自动二级质谱方式同时获取样品脑苷脂分子的一级和二级质谱图。筛取含180Da中性丢失碎片的分子，再结合二级质谱中的长链碱和脂肪酸碎片，确定每种脑苷脂分子的结构。通过该法一次性共分析出123种美国红参脑苷脂分子种；含有的长链碱共18种，其中植物鞘氨醇型与鞘氨醇型长链碱的相对含量比为1：2；脂肪酸为18～25碳的饱和或单不饱和脂肪酸，以24碳脂肪酸为主，2-羟基脂肪酸占58．62％，饱和与单不饱和脂肪酸的相对含量比约为1：3。LC—Q—TOFMS／MS法分析海参脑苷脂分子种的灵敏度高，准确，简便，为海参脑苷脂的构效关系研究及功能食品开发提供理论依据。

冰岛刺参和南非花刺参脑苷脂分子种的比较

利用高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法（LC-Q-TOF）分析比较冰岛刺参（Cucumaria frondosa）和南非花刺参（Stichopus variegatus）脑苷脂的分子种组成。以氯仿-甲醇（2∶1,V/V）溶液提取,经皂化和SPE净化,在正离子模式下,通过自动二级（MS/MS）方式同时获取脑苷脂分子的一级和二级质谱图。筛取含180Da中性丢失碎片的分子,再结合二级质谱中的长链碱和脂肪酸碎片,确定每种脑苷脂分子的结构。研究表明：一次性从冰岛刺参中分析出56种脑苷脂分子,从南非花刺参中分析出109种脑苷脂分子;南非花刺参含长链碱种类较多,为15种,冰岛刺参含长链碱11种。冰岛刺参脑苷脂中鞘氨醇型长链碱占91.84%,南非花刺参脑苷脂中鞘氨醇型长链碱占85.97%;脂肪酸的组成均为17-25碳的饱和或单不饱和脂肪酸,且以24碳脂肪酸为主。冰岛刺参脑苷脂中2-羟基脂肪酸占总脂肪酸的33.50%,饱和脂肪酸∶单不饱和脂肪酸≈2∶3;南非花刺参脑苷脂中2-羟基脂肪酸占总脂肪酸的76.73%,饱和脂肪酸∶单不饱和脂肪酸≈2∶1。研究结果显示,在抑制肿瘤细胞增长、预防癌症方面南非花刺参脑苷脂较冰岛刺参脑苷脂可能具有更好的生物活性。本研究为不同海参脑苷脂的活性研究和营养评价提供了参考与借鉴。

马粪海胆单唾液酸神经节苷脂的结构鉴定

为研究马粪海胆(Hemicentrotus pulcherrimus)神经节苷脂的结构。首先,用Sevennerholm法分配提取其生殖腺,经正相硅胶柱、DEAE-Sephadex A25离子交换柱纯化后,得到2种神经节苷脂组分,分别为HPG-A和HPG-B。其次,进行酸解,获得唾液酸、中性单糖、脂肪酸和长链碱。然后,采用甲基化处理,经气相色谱-质谱联用法测定基本组成结构,经湿法消化和离子色谱法测定硫酸根含量。实验表明:HPG-A的唾液酸组成为N-羟乙酰神经氨酸(Neu5Gc)和少量N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac),而HPG-B为8位硫酸化的N-羟乙酰神经氨酸(Neu5Gc8S),且均以2-6键与葡萄糖相连;HPG-A和HPG-B神经酰胺(Cer)的主链长链碱(LCB)组成类似,主要为d16∶0和d18∶0;脂肪酸(FA)组成均以C22∶1和C22∶1h为主。鉴定出HPG-A为单唾液酸己糖神经节苷脂Neu5Gc2-6Glc1-1Cer和Neu5Ac2-6Glc1-1Cer的混合物,HPG-B为硫酸酯化单唾液酸己糖神经节苷脂Neu5Gc8S2-6Glc1-1Cer。本文为研究马粪海胆单唾液酸神经节苷脂的构效关系提供了理论依据。

冰岛刺参缩醛磷脂和醚磷脂对神经生长因子诱导PC12细胞的促神经分化作用

目的:分离纯化冰岛刺参(Cucumaria frondosa)中的缩醛型磷脂酰乙醇胺(plasmenylethonoamine,pPE)和烷氧型磷脂酰胆碱(plasmanylcholine,aPC),并对其促进神经生长因子(nerve growth factor,NGF)诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(pheochromocytoma,PC12)细胞分化的神经营养作用进行探究。方法:以冰岛刺参为原料,通过柱层析分离法提取pPE和aPC,并通过液相色谱-质谱联用法测定其纯度;分析冰岛刺参pPE和aPC对PC12细胞存活率和分化率的影响,并统计分析细胞轴突长度和数目的变化;进一步通过实时荧光定量聚合酶链式反应、免疫荧光技术等方法检测PC12分化细胞中突触素和生长相关蛋白43(growth-associated protein 43,GAP-43)的表达量,明确冰岛刺参pPE和aPC对PC12细胞突触生长及分化的影响。结果:制备获得的冰岛刺参pPE和aPC纯度分别为91.0%和89.1%,两种不同结构的磷脂均可显著提高PC12细胞的分化率(P<0.05),通过促进突触素和GAP-43的表达促进细胞轴突生长,pPE的作用效果优于aPC。结论:体外细胞实验结果表明冰岛刺参pPE和aPC能显著促进PC12神经细胞分化及突触生长,且具有浓度依赖性和构效性。但详细的作用机制仍需进一步研究。

海洋棘皮动物神经节苷脂的研究进展

目的综述近年来国外海洋棘皮动物神经节苷脂的研究进展,包括其分离纯化和结构鉴定的一般方法,不同种类海洋棘皮动物神经节苷脂的结构对比及其生物活性与构效关系,以期为该领域的研究提供参考。

6种市售燕窝营养成分分析

燕窝是一种安全有效的防止流感病毒的天然物,有促进细胞生长和加强免疫力的功能。燕窝中含有丰富的活性糖蛋白（唾液酸糖蛋白）,钙、铁、磷、碘及维生素等天然营养物和矿物质。

海参皂苷单体Echinoside A在大鼠体内的消化吸收特性初步研究

目的以大鼠为动物模型研究了海参皂苷单体EchinosideA（EA）在体内的消化吸收特性。方法Wistar大鼠适应饲养1周后，按体质量分为10组，每组3只。禁食不禁水12h后，给大鼠分别按照30mg／kg·BW灌胃配置好的海参皂苷EA溶液1mL，分别在灌胃后0、0．5、1、2、3、4、7、9、11、24h取血，建立并优化血清中海参皂苷EA的HPLC-MS检测方法，检测不同时间节点大鼠血中EA含量。结果实验结果显示，海参皂苷单体EA液质检测的定量限（LOQ）为2．12ng，在0．3～20,ug／mL的浓度范围内线性良好（R。=0．9946）。海参皂苷EA灌胃后在血中迅速出现，在3h出现最高峰值，浓度达到0．83／μg／mL，之后在7h出现另1个较小峰，9h后恢复至4h水平（约0．24／μg／mL），直至24h。结论本文建立了血清中海参皂苷EA的液相色谱-质谱联用检测方法，发现海参皂苷单体EA可经消化道吸收，该结果为海参皂苷在保健食品及药物中的应用提供了科学依据。