褐藻寡糖的酶法制备及其在水产养殖中的应用

褐藻寡糖(AOS)是一类由2~10个单糖分子经相同或不同糖苷键连接而成的低分子量聚合物。褐藻胶裂解酶是酶法制备AOS的重要工具,酶法制备的AOS在纯度、性能、结构方面优于其他方法制备的AOS。文章综述了褐藻胶裂解酶的来源、结构及酶学性质,总结了酶法制备的AOS在饲料添加剂、微藻培育、免疫调节、抗氧化和抗菌等水产养殖方面的应用,对褐藻胶裂解酶的研究方向以及AOS在水产养殖中的应用前景进行了展望,为褐藻胶裂解酶、AOS在水产养殖中的应用提供参考。

壳聚糖酶的结构特征及其应用

随着酶学研究和微生物学的发展,壳聚糖酶已从多种菌株筛选、分离和鉴定出来,通过基因工程和蛋白质工程的方法进行系统的酶学性质表征,可获得一系列高活性的壳聚糖酶。文章系统总结和归纳壳聚糖酶的研究进展状况,介绍壳聚糖酶的微生物来源、分类、酶学性质、三维结构和催化机制及其应用研究,指出其在科学研究上的瓶颈并提出展望。

盐藻钙依赖蛋白激酶基因DsCDPK的表达分析

以盐藻总RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增了盐藻DsCDPK基因的cDNA序列,将其克隆到pMD^(TM)19-T simple载体上,经测序获得的克隆片段全长1650 bp,与已发表的盐藻DsCDPK(GenBank:JQ964113)的编码区序列同源性达100%。将DsCDPK基因的开放阅读框与质粒pET-32a(+)连接,构建原核表达载体pET-32a-DsCDPK。将该重组质粒转化到大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导融合,蛋白在大肠杆菌BL21中得到成功表达。通过SDS-PAGE检测发现,融合蛋白为部分可溶性表达,将上清蛋白经过His柱纯化后获得了纯度较高的可溶性融合蛋白,Western杂交检测显示,融合蛋白能被抗His单克隆抗体特异性识别,初步证明该融合蛋白就是带有His标签的DsCDPK蛋白。采用实时荧光定量PCR方法分析了高盐胁迫下DsCDPK基因的表达模式。试验结果表明,盐藻DsCDPK基因为盐胁迫上调基因,在高盐(3.0 mol/L NaCl)胁迫下,DsCDPK基因表达量显著增加,盐胁迫1 h时表达量达到最高,为正常生长状况(1.0 mol/L NaCl)下的3倍,差异达到极显著水平(P<0.01)。该研究成果为进一步阐明盐藻钙依赖蛋白激酶基因的功能及作用机制奠定了基础。

EZAL-MY96乳酸菌种菌株分离鉴定

目的 :对引进法国罗地亚EZAL -MY96直投式酸奶发酵剂 (DVS)进行菌株分离鉴定。方法 :利用半选择性培养基进行发酵剂菌株分离 ,并采用糖发酵实验和RAPD指纹图谱进行鉴定。结果 :EZAL -MY96中球菌的平板菌落与光镜显微观察、糖发酵实验和RAPD指纹图谱均只有 1种情况 ,而杆菌均有 2种情况。结论 :从EZAL -MY96菌种中共分离到 3株菌 ,其中 1株鉴定为嗜热链球菌 ,1株为德氏乳杆菌保加利亚亚种 ,另

DVS乳酸菌种在我国的应用及其开发研制

DVS发酵剂是高度浓缩和标准化的冷冻或冷冻干燥型发酵剂,它可直接加入到热处理的原料乳中进行发酵。本文总结了丹麦汉森公司、法国罗地亚公司、丹麦丹尼斯克公司等生产的菌种的种类、组成、特性、包装、运输、保藏及其应用概况。并简要介绍了DVS乳酸菌种的菌株分离鉴定、超浓缩培养、冷冻干燥、复合发酵、成本核算和未来发展趋势,为我国DVS菌种开发研制提供了有关的数据信息。

我国北方刀额新对虾高产养殖技术

刀额新对虾（Mmetapenaeus ensis）俗称基围虾,属节肢动物门,甲壳纲,十足目,游泳亚目,对虾科,砂虾,新对虾属。它具有杂食性强、广温、广盐和生长迅速、抗病害能力强等优点。在海区8～29℃均有分布,养殖水温以18~25℃为宜。刀额新对虾（下简称基尾虾）是广盐性种类,盐度范围可在0~34。耐温范围10~37℃,最适温度17~32℃,耐低氧能力比其他虾类强。

6种海藻凝集素的提取及凝集活性比较

海藻是富含多种生物活性物质并具有广泛生物功能的海洋生物资源。选择角叉菜、松节藻、海带、裙带菜、条斑紫菜和萱藻为原料提取其活性物质凝集素,并对其凝集活力进行测定和分析。结果表明:用生理盐水提取海藻凝集素的效果较好,其中海带粗提液中凝集素的凝集活性好。可为进一步开发和利用经济藻类提供参考依据。

教师资格“国考”的革新及对师范教育的影响

随着我国教师资格"国考"的全面推动与展开,对传统的教师资格认证造成了极大的冲击。改革后,不区分师范生和非师范生,要想成为老师,必须参加"国考",取消师范生毕业就可以申请教师资格的"特权";教师资格证也不是终身有效,三年有效,五年一审,打破了教师终身制;考试难度加大,增加考试科目,注重实践等。这一系列的转变势必对师范教育造成重大影响,使师范教育面临着机遇与挑战。

北方四季气候变化对刺参养殖的影响与管理对策

北方一年四季，气候变化显著，会给参圈环境带来显著的变化，每一阶段的变化都会对刺参产生影响[1]。为了更好地应对这种气候变化，参圈在每个季节的管理显得尤为重要。

EZAL-MY96型发酵剂中3株菌株的生化特性分析

对EZAL-MY96发酵剂中3个乳酸菌菌株的生化特性进行了分析。测定3株菌株的生长曲线;采用pH计、乳酸测定试剂盒、硫酸苯酚法、黏度计和气相色谱仪分别对3株菌在pH变化、合成乳酸、多糖、黏度和乙醛进行了测定与分析。结果表明,乳酸是影响发酵液pH值的主要物质,多糖质量分数不是影响发酵液黏度的主要因素,3株菌株均是菌数达到对数生长期最高点时合成的乙醛量达到最大值。

6种海藻凝集素的提取及凝集活性比较（英文）

海藻是富含多种生物活性物质并具有广泛生物功能的海洋生物资源。选择角叉菜、松节藻、海带、裙带菜、条斑紫菜和萱藻为原料提取其活性物质凝集素,并对其凝集活力进行测定和分析。结果表明:用生理盐水提取海藻凝集素的效果较好,其中海带粗提液中凝集素的凝集活性好。可为进一步开发和利用经济藻类提供参考依据。

幼儿园园本课程资源开发与利用

近几年来,伴随着我国幼儿园课程改革的日益深入,越来越多的教育研究者和教育实践者开始更多地将目光投向幼儿园园本课程的开发上。由于园本课程资源和园本课程开发二者是相辅相成、息息相关的,园本课程资源的地位与作用也越来越重要。不同地区可供开发利用的课程资源各有不同,课程开发在内容的选择上也是千差万别。而园本课程资源开发与利用的方法和途径,更是会直接影响到园本课程资源作用发挥的效果。

大连沿海地区刺参高产养殖技术

刺参养殖业经历了十几年的发展，养殖规模在不断的扩大，产量也在不断地提高。由于刺参自然生长地域的限制，参圈价格随着投资资本的增多也水涨船高。为了追求高的利润，高产成为众多刺参养殖者追求的目标。从2008年至2011年对辽宁省大连市沿海地区参圈进行了大量的连续调查，

发挥地方资源优势 建立特色幼儿园——瓦房店市幼儿园园本课程资源的开发与利用

瓦房店市有其独特的地方教育资源,应从瓦房店市幼儿园的实际情况出发,根据地方资源特色进行合理开发利用,更好地发挥当地园本课程资源的优势,建立特色幼儿园。一、园本课程资源开发利用的原则瓦房店市素有'历史悠久,源远流长;物华天宝,资源丰富;风景秀丽,引人入胜;人杰地灵,英才辈出'的美誉。瓦房店市是著名的'苹果之乡'和'轴承之乡'。除此之外,还有独特的地方民间艺术、风俗习惯,旅游景点。

依托实验教学中心培养学生实践创新能力研究

为完善教学实验室开放管理制度,高效利用实验教学示范中心资源。将实验室分成本科教学为主型、教学科研兼顾型、大型和精密仪器共享型三种类型,采取不同的实验室开放模式,并制定与之配套的实验室管理细则。实现各类实验室的合理有序开放和精细化管理,提高教学实验室及大型精密仪器的使用效率,解决学生课外实践活动对实验室场所的需求。上述措施有效提高了学生的实践创新能力。

虾夷马粪海胆CYP51基因cDNA的克隆及其SNPs分析

采用RT-PCR、PCR-SSCP等分子生物学技术和关联分析等方法对虾夷马粪海胆Strongylocentrotusintermedius CYP51基因的cDNA序列进行了克隆和单核苷酸多态性分析。结果表明:虾夷马粪海胆的CYP51基因包括一个1 491 bp的开放阅读框,编码496个氨基酸;其开放阅读框的第161个核苷酸处存在1个单核苷酸多态性,即核苷酸发生了A→G突变。关联分析结果表明,该单核苷酸多态性与虾夷马粪海胆的体质量、性腺质量之间存在显著相关性(P<0.05)。本研究中首次克隆了虾夷马粪海胆CYP51基因的cDNA序列并进行了SNPs分析,研究结果可为虾夷马粪海胆的分子标记辅助育种提供参考。

盐生杜氏藻MAPK基因的克隆及表达分析

克隆盐藻MAPK基因(命名为DsMAPK),为研究盐藻耐盐分子机制奠定基础。采用RT-PCR和RACE技术克隆DsMAPKcDNA全长,对其进行生物信息学分析,并通过QRT-PCR方法检测盐胁迫下该基因的表达情况。DsMAPK的cDNA全长序列为1861bp(GenBank AccessionJQ782412),包含一个开放阅读框,长度为1407bp,编码468个氨基酸;DsMAPK蛋白为亲水性蛋白,α-螺旋和自由卷曲是其蛋白质二级结构的主要结构元件,伸展链散布其中。据氨基酸序列同源性分析表明,DsMAPK和衣藻、团藻的MAPK蛋白具有较近的亲缘关系。盐藻在高盐胁迫下,DsMAPK基因表达显著上调,1h后达到最大值,为正常对照组的5倍,差异极显著(P<0.01)。DsMAPK基因可能在盐藻对盐胁迫的反应中起重要作用,是一种参与盐藻耐盐反应的早期快速反应基因。

杜氏盐藻新型遗传转化方法的建立(英文)

本研究采用LiAc/PEG介导法首次成功地将外源基因导入盐藻细胞,组织化学染色发现转基因盐藻为蓝色,表明外源的基因在盐藻细胞中得到了成功表达。同时还进行了生长状态、转化温度、质粒浓度等因素对转化率影响的研究,优化了转化条件。结果表明,盐藻处于对数生长早期、质粒DNA浓度为600μg/ml、转化温度29℃是最理想的转化条件,其转化率为74.8‰。PCR扩增和PCR-Southern杂交结果证明,目的基因已整合到基因组中,且能够遗传。

砂海螂群体表型性状和重量性状的相关及通径分析

从大连旅顺龙王塘海域的四龄野生砂海螂(Mya arenaria)群体中随机选取50个个体,测量其壳长(X_1)、壳高(X_2)、壳宽(X_3)以及重量性状活体重(Y_1)、软体重(Y_2)等5项性状,计算性状间的相关系数,采用相关与通径分析方法分析了表型性状对重量性状的影响。结果表明受测的5个数量性状间的相关性均达到显著水平(P<0.05),相关系数从0.676到0.931。表型性状对活体重和软体重具有相同的影响:对二者起直接作用最大的均是壳长,其值分别为31.80%和23.90%;对二者起间接作用最大的均为壳宽,其值分别为10.80%和8.40%;壳高的作用最小。多元回归分析分别建立了壳长(X_1)、壳高(X_2)、壳宽(X_3)与活体重(Y_1)和软体重(Y_2)关系的回归方程,分别为:Y1=1.421X_1+1.563X_2+0.722X_3-125.360,Y2=0.348X_1+0.390X_2+0.169X_3-28.119。研究结果为砂海螂选择育种提供了理论依据,即以提高活体重或软体重为目标,主要选择壳长,同时加强对壳宽的协同作用。

壳寡糖对中国对虾血细胞体外吞噬过程中活性氧作用的影响

病菌和外来异物入侵时,对虾血细胞在吞噬过程中存在利用活性氧杀菌防御机制。对中国对虾血细胞体外吞噬现象进行观察,利用化学发光法和NBT法检测血细胞体外吞噬过程中产生的活性氧,以研究不同浓度壳寡糖对活性氧作用的影响。结果发现,对虾的血细胞在体外具有一定的吞噬能力,吞噬率为42.7%±0.80%;吞噬指数为1.34±0.11;随着加入壳寡糖浓度的提高,化学发光法和NBT法检测数值具有相同的趋势,其中1.0mg/L,5.0mg/L以及10mg/L壳寡糖对活性氧的产生具有明显的增强效果(P<0.05)。结果表明,采用的化学发光法与NBT法可以检测出血细胞吞噬过程中产生的活性氧,并证实壳寡糖对对虾的血细胞产生的活性氧有不同程度的诱导增强作用。