烟碱对心肌缺血／再灌注损伤大鼠炎症细胞因子的影响

目的 探讨烟碱对心肌缺血/再灌注（I/R）损伤大鼠炎症细胞因子的影响.方法 50只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、I/R组、烟碱高剂量（400μg/kg）组、烟碱低剂量（40μg/kg）组及α-银环蛇毒素（α-BGT,1μg/kg）组5组,每组10只.采用结扎心脏左冠状动脉前降支30 min、再灌注90 min制作大鼠心肌I/R损伤模型;假手术组仅穿线不结扎.制模前30 min各药物组颈静脉注射相应剂量药物干预,假手术组和I/R组给予等量生理盐水.于再灌注末取右颈动脉血,测定肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-8（IL-8）、IL-10浓度和肌酸激酶同工酶（CK-MB）、心肌肌钙蛋白I（cTnI）活性;然后处死动物,取缺血区心肌组织测定髓过氧化物酶（MPO）活性;采用免疫组化和逆转录-聚合酶链反应检测心肌组织细胞间黏附分子-1（ICAM-1）蛋白及mRNA表达,并观察心肌超微结构.结果 与假手术组比较,I/R组血浆TNF-α、IL-8、IL-10、CK-MB、cTnI、心肌MPO活性及ICAM-1蛋白和mRNA表达均显著升高[TNF-α（ng/L）：158.7±32.7比31.5±5.8,IL-8（ng/L）：0.71±0.06比0.30±0.04,IL-10（ng/L）：69.0±7.8比41.4±4.3,CK-MB（U/L）：2 540±169比1 120±102,cTnI（μg/L）：26.2±4.6比0.9±0.2,MPO（U/g）：4.2±0.6比1.6±0.4,ICAM-1蛋白：0.210±0.025比0.100±0.018,ICAM-1 mRNA：1.82±0.23比1.18±0.20,P＜0.05或P＜0.01],病理学显示心肌组织损伤较重.与I/R组比较,烟碱高剂量组血浆TNF-α、IL-8降低[TNF-α（67.3±9.8）ng/L,IL-8（0.47±0.04）ng/L],IL-10升高[（147.5±12.5）ng/L],CK-MB、cTnI及心肌MPO活性、ICAM-1蛋白和mRNA均降低[CK-MB（1 282±145）U/L,cTnI（4.7±1.4）μg/L,MPO（2.5±0.4）U/g,ICAM-1蛋白0.140±0.026,ICAM-1 mRNA 1.31±0.25,P＜0.05或P＜0.01],心肌组织损伤减轻;而烟碱低剂量组和α-BGT组上述指标与I/R组比较差异无统计学意义.结论 烟碱可阻断内皮细胞表达黏附分子,阻断中性粒细胞黏附、游出,改善抗炎/促炎反应平衡,从而拮抗大鼠心肌I/R损伤时的过度炎症反应.

烟碱预先给药对心肌缺血再灌注大鼠心功能的影响

目的评价烟碱预先给药对心肌缺血再灌注大鼠心功能的影响。方法健康成年雄性SD大鼠60只，体重200～250g，采用随机数字表法，将其分为3组（n=20）：假手术组（S组）、心肌缺血再灌注组（IR组）和烟碱预先给药组（N组）。S组丝线穿过冠状动脉前降支但不结扎；IR组采用丝线结扎左冠状动脉前降支30min后再灌注120min的方法制备大鼠心肌缺血再灌注模型。N组结扎前30min，经右颈静脉注射烟碱400μg／kg，余操作同IR组，S组和IR组右颈静脉注射等量生理盐水。各组随机取10只大鼠于缺血前（T0）、缺血30min（％）和再灌注30min（T2）、120min（L）时经生物机能实验系统记录左心室收缩压（LVSP）、左心室舒张压（LVDP）、左室内压上升／下降最大变化速率（-4-dp／dtmax）、HR和MAP。各组其余10只大鼠于再灌注60min时采集右颈动脉血样，采用ELISA法测定血浆肌酸激酶同工酶（CK—MB）活性、心肌肌钙蛋白I（cTnI）和TNF-a浓度。结果与s组比较，IR组T2．，时MAP和LVSP、T1，3时HR、LVDP和±dp／dtmax降低，血浆CK—MB活性、crrnI和TNF-α浓度升高，N组T1．2时LVDP、T1．3时HR和±dp／dt～降低，血浆CK—MB活性、cTnI和TNF—Q浓度升高（P〈0．05）；与IR组比较，N组L时MAP、HR、LVSP、LVDP和±dp／dtmax升高，血浆CK-MB活性、cTnI和TNF-α浓度降低（P〈0．05）。结论烟碱预先给药通过激活胆碱能抗炎通路，抑制炎性反应，可显著减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤，从而改善心功能。

环磷酸腺苷葡甲胺预先给药对内毒素致大鼠急性肺损伤的影响

目的 探讨环磷酸腺苷葡甲胺预先给药对内毒素（LPS）致大鼠急性肺损伤（ALI）的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠54只,2-3月龄,体重200 - 250 g,采用随机数字表法,将其分为3组（n=18）：对照组（C组）、LPS组和环磷酸腺苷葡甲胺预先给药组（MCA组）.LPS组和MCA组股静脉注射LPS 10 mg/kg制备大鼠ALI模型,C组注射等容量生理盐水.MCA组于LPS注射前20 min时股静脉注射环磷酸腺苷葡甲胺2 mg/kg,C组和LPS组注射等容量生理盐水.于LPS注射前即刻、注射后2和4h时各取6只大鼠,采集腹主动脉血样行血气分析,记录PaO2和PaCO2,采用ELISA法测定血浆TNF-α和IL-10浓度.于LPS注射后4h时处死6只大鼠,取肺组织,电镜下观察病理学改变,采用ELISA法测定环磷酸腺苷（cAMP）的活性,采用Western blot法检测核蛋白NF-κB p65表达水平.结果 与C组比较,LPS组PaO2和肺组织cAMP活性降低,PaCO2、血浆TNF-α和IL-10的浓度及肺组织核蛋白NF-κB p65表达水平升高（P＜0.05）.与LPS组比较,MCA组PaO2、肺组织cAMP活性与血浆IL-10浓度升高,PaCO2、血浆TNF-α浓度和肺组织核蛋白NF-κB p65表达水平降低（P＜0.05）,病理学损伤减轻.结论 环磷酸腺苷葡甲胺预先给药可减轻LPS致大鼠ALI,其机制可能与增强肺组织细胞内cAMP水平,激活cAMP信号通路,抑制NF-κB活性,减轻炎性反应有关.