原代培养人脐动脉内皮细胞的生长与增殖

在未用贴附基质和生长因子情况下,成功地培养了人脐动脉内皮细胞(human umbilicalartery endothelial cell,HUAEC)。接种密度为1×10~5/cm^2。采用HE染色、显微计量法及透射电镜术研究了内皮细胞的形态、生长行为与增殖。(1)接种后24h已出现岛状细胞团;48h细胞团增大,可区分出细胞密集的中央区及细胞密度较小的周边区;72h大部分细胞团已汇合;216h内皮细胞衰退、脱落。(2)HUAEC呈较长的多边形,相邻细胞间以短突相连,内胞质呈颗粒状弱嗜碱性,外胞质扁薄。(3)一个细胞团所含平均细胞数,24h为17.39±3.79个;48h为131.14±22.83个,72h为454.16±111.39个,表明在接种后72h内细胞倍增9次。(4)在细胞呈指数生长的24～72h时出现许多无丝分裂像,但未见有丝分裂像;至120h细胞生长缓慢时才出现有丝分裂像。(5)电镜下可见内皮细胞含Weibel-Palade小体。

中药当归配伍丹参复方对兔髂动脉球囊内皮剥脱术后血小板粘附的影响

通过扫描电镜观察了中药复方制剂（当归配伍丹参）对兔髂动脉球囊内皮剥脱术后血小板粘附的影响，同时测定了血浆超氧化物歧化酶（SOD）活性及脂质过氧化物（LPO）、前列环素（PGI2）／血栓素A2（TXA2）和环磷酸腺苷（cAMP）水平。结果表明，当归配伍丹参有增加SOD活性、升高PGI2、cAMP水平和PGI2／TXA2比值、降低LPO和TXA2水平、抑制球囊内皮剥脱术后血小板粘附的作用，与对照组比较，有显著性差异（均P＜0．05～0．01）。结果为中药用于临床防治PTCA后急性血栓形成和慢性再狭窄等并发症提供了理论依据。

复方当归对实验性PTCA后动脉内膜保护作用的扫描电镜观察

目的 :研究PTCA后防止动脉再狭窄。方法 :用PTCA导管的气囊剥脱兔腹主动脉内皮。损伤后给药组 (6只 ) ,于损伤后立即由PTCA导管注入复方当归液 16ml(2 5 %当归注射液 15ml+ 2 0 %丹参注射液 1ml) ,以后每日经耳静脉注射给药 1次 ,最后 1次给药为取材当日。损伤组 (6只 ) ,于损伤后 ,与损伤后给药组同期注射生理盐水 16ml。两组分别于损伤后 2 4h及 96h取出腹主动脉 ,制作标本 ,供扫描电镜下观察。结果 :气囊已造成兔腹主动脉内皮剥脱。损伤组损伤后 2 4h及 96h时 ,动脉内皮下层的裸露胶原组织上有大量血小板附着。而损伤后给药组于损伤后 2 4h及 96h时 ,血管内皮下层光滑 ,只有极少数血小板附着。结论 :复方当归液具有防止血小板在胶原组织上附着的作用 ,对保护血管内膜 。

复方首乌对受损内皮促修复及释放PGI_2的作用

在体外培养内皮细胞单层上造成机械损伤（８．６４±１．１２）ｍｍ２。损伤后继续培养２４ｈ，收集上清液用放射免疫法测定其中６－酮－前列腺素Ｆ１α（ＰＧＦ１α）的含量，同时取出有内皮生长的玻片，染色后在光镜下观察内皮的生长情况。结果为：损伤组ＰＧＦ１α含量显著低于对照组，内皮修复现象不明显；损伤加药组（损伤内皮后，培养液内加入复方首乌液，继续培养２４ｈ），ＰＧＦ１α显著高于损伤组（Ｐ＜０．０１），损伤区两侧的内皮细胞开始修复损伤，表现为内皮细胞形成生长锥向损伤区生长，并出现明显的增殖现象，以上结果提示复方首乌液对受机械损伤的内皮有促进修复及合成并释放ＰＧＩ２的作用。

自体皮肤移植后色素沉着的研究

应用组织化学及超微结构方法对豚鼠自体皮肤移植后不同时期表皮内黑色素细胞和角质形成细胞的形态结构及变化规律进行观察比较。结果表明,自体皮肤移植后不同时期表皮内黑色素颗粒及黑色素细胞密度的变化,在色素沉着过程中起重要作用。

培养人脐动脉内皮细胞的组织化学和免疫细胞化学的研究

用细胞化学方法研究了体外培养人脐动脉内皮细胞的Ｍｇ－ＡＴＰ酶及碱性磷酸酶活性，并与人脐带切片中血管内皮以及大鼠脑、心、肾及肝等切片中血管内皮有关酶相比较。同时，用免疫细胞化学方法检查了培养脐动脉内皮细胞的Ⅷ因子相关抗原。结果显示∶（１）培养４８及７２ｈ的脐动脉内皮细胞、人脐带血管及大鼠脑、心、肾、肝血管内皮都呈Ｍｇ－ＡＴＰ酶阳性。（２）碱性磷酸酶在上述各标本的血管内皮均呈阴性反应。（３）培养的人脐动脉内皮细胞呈Ⅷ因子相关抗原阳性。以上结果提示∶（１）体外培养人脐动脉内皮细胞和体内重要器官血管内皮的功能有相似性，是一种较为理想的研究人类动脉血管内皮生理功能和疾病的细胞模型。（２）Ｍｇ－ＡＴＰ酶可作为脐血管内皮以及脑、心、肾、肝等器官血管内皮的标志酶之一。

原代培养人脐动脉内皮细胞的超微结构

对不用贴附基质和生长因子情况下原代培养７２ｈ的人脐动脉内皮细胞（ＨＵＡＥＣ）进行了透射电镜观察。电镜下ＨＵＡＥＣ形态不规则，细胞器丰富。核周有散在的滑面内质网、粗面内质网及较多的线粒体，后者有些为板层状嵴，另一些为管泡状嵴。细胞膜下可见微管，胞质内有大量循同一方向排列的微丝。ＷｅｉｂｅｌＰａｌａｄｅ小体内含涡旋状排列的细管。胞质内含丰富的糖原颗粒。细胞核内常染色质较多，异染色质主要分布于核膜下。有时可见处于无丝分裂状态的细胞，核已分裂为二，但二者间仍有核膜相连。内皮细胞间以紧密连接或中间连接的方式相连。以上结果表明：人脐动脉内皮细胞在体外培养条件下代谢功能旺盛，且具有参与脂类代谢的细胞器，细胞以无丝分裂方式增殖。