血清miR-155-5p和miR-146b-5p与继发性急性髓系白血病染色体畸变及预后的关系

目的探究血清微小RNA(miR)-155-5p和miR-146b-5p与继发性急性髓系白血病(sAML)染色体畸变及预后的关系。方法选择2017-05至2020-04空军军医大学第二附属医院血液内科收治的sAML患者26例,另外纳入同期在医院进行体检的健康人25名作为健康对照组。根据国际人类细胞遗传命名系统,将sAML患者分为染色体畸变组和染色体正常组。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-155-5p和miR-146b-5p水平,并记录患者随访期间的总生存期。结果与健康对照组相比,sAML组患者血清miR-155-5p显著升高[4.69(1.87,30.83)vs.1.13(0.79,1.78),Z=-4.070,P<0.001],而miR-146b-5p显著降低[1.79(1.55,2.44)vs.3.02(2.58,3.43),Z=-4.561,P<0.001]。二者联合诊断sAML的曲线下面积为0.922(95%CI:0.846~0.997)。与染色体正常组相比,染色体畸变组sAML患者血清miR-155-5p明显升高[19.26(4.45,46.65)vs.1.51(0.79,3.27),Z=-3.585,P<0.001],miR-146b-5p明显降低[1.55(1.50,1.97)vs.2.16(1.79,3.00),Z=-2.954,P=0.003]。血清miR-155-5p和miR-146b-5p水平识别染色体畸变的AUC分别为0.925(95%CI:0.826~1.000)、0.850(95%CI:0.703~0.997),联合AUC可提高至0.919(95%CI:0.812~1.000)。血清miR-155-5p和miR-146b-5p是染色体畸变的独立影响因素(P<0.05)。血清miR-155-5p高表达(≥4.27)和miR-146b-5p低表达(<1.62)患者的总生存率更低,中位生存时间更短(P<0.05)。Cox回归分析结果表明,血清miR-155-5p高表达和miR-146b-5p低表达是sAML患者死亡的独立危险因素(P<0.05)。结论血清miR-155-5p高表达和miR-146b-5p低表达与sAML患者染色体畸变和预后不良密切相关,二者有希望成为sAML染色体畸变和预后不良的风险预测指标。

AP2M1抑制弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞增殖和侵袭

目的探究接头相关蛋白质复合体2亚基μ1(AP2M1)对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖和侵袭的调控作用。方法将人弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞系OCI-LY8分为对照组、NC-LV组、AP2M1-LV组。用Lipofectamine 2000进行细胞转染。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭。Western blot检测AP2M1、表皮生长因子受体(EGFR)、p-磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和p-蛋白质激酶B(AKT)蛋白表达。结果与对照组相比,AP2M1-shRNA组细胞中AP2M1的mRNA和蛋白相对表达量均降低(P<0.05),相对细胞活力升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),迁移和侵袭细胞数量均升高(P<0.05);EGFR的蛋白相对表达量及PI3K和AKT的磷酸化水平均升高(P<0.05)。与对照组相比,AP2M1-LV组细胞中AP2M1的mRNA和蛋白相对表达量均升高(P<0.05),相对细胞活力降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),迁移和侵袭细胞数量均降低(P<0.05),EGFR的蛋白相对表达量及PI3K和AKT的磷酸化水平均降低(P<0.05)。结论AP2M1的过表达部分通过抑制EGFR/PI3K/AKT信号通路来抑制DLBCL细胞的增殖和侵袭。

异基因造血干细胞移植后血浆microRNA的表达与急性移植物抗宿主病的相关性研究

目的:探讨血浆microRNA(miRNA)在异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后发生急性移植物抗宿主病(aGVHD)与未发生a GVHD(non-a GVHD)患者的表达情况。方法:采用实时定量PCR(real-time PCR)的方法检测25例患者allo-HSCT移植前和移植后外周血血浆中miR-423,miR199a-3p,miR-93*和miR-377的表达水平。结果:miR-423,miR199a-3p,miR-93*在a GVHD患者中的表达量较未发生a GVHD的患者高(P<0.05),而miR-377在两组之间表达无统计学差异(P=0.0818)。结论:异基因造血干细胞移植后发生a GVHD患者的血浆中miR-423,miR199a-3p,miR-93*表达增高,这可作为为监测和诊断a GVHD的生物标志物。

顺应现代医学模式转变 加强医学生医患沟通能力培养

当今社会，医患关系处于日趋紧张的状态，相关部门数据显示，2014年全国发生医疗纠纷11.5万起，而究其原因，有社会舆论导向、医生本身、患者等诸多方面的综合因素。但任何问题的产生均具有两面性，其中一个重要的原因是医患之间缺乏良好的沟通，产生误解，造成患者对医生的不信任，并将这种不良情绪不断放大，最终导致医患纠纷，甚至上演恶性事件。因此，良好的沟通能力是诊断、治疗、治愈疾病的基础。在新形势下，仅拥有课本知识并不能成为一个优秀医生。医患沟通能力是一种核心的临床能力，是缓解医患矛盾、构建和谐医患关系不可或缺的关键要素，因此医学生医患沟通能力的培养已成为我国众多医学院校关注的焦点和重要的教学任务。

供者型CIK细胞输注对清除异基因造血干细胞移植后微小残留病灶的疗效

目的观察供者型细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine induced killer,CIK）细胞免疫治疗对异基因造血干细胞移植（allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT）后微小残留病灶（minimal residual disease,MRD）清除的疗效。方法回顾性分析我科2012年11月至2015年11月间的10例恶性血液病患者,其中急性淋巴细胞白血病5例,急性髓性白血病4例,慢性粒单细胞白血病1例。在allo-HSCT后出现分子生物学复发（7例）以及形态学复发（3例）后经减停免疫抑制剂、化疗、供者淋巴细胞输注等治疗后形态学缓解,但MRD仍阳性的患者,给予供者型CIK细胞输注治疗,分析其疗效。结果输注供者型CIK中位次数3（2~8）次。1例输注2次无效,最终血液学复发死亡;9例患者MRD转阴,其中1例输注10个月后再次复发死亡,1例因减停免疫抑制剂出现重度移植物抗宿主病死亡,另7例患者无病存活。输注CIK后中位随访时间为10（3~14）个月,中位生存时间8（3~14）个月,中位无病生存时间8（0~14）个月,其中5例患者输注CIK后无病生存时间长于移植后无病生存时间。结论供者型CIK细胞输注治疗对allo-HSCT后复发的患者可使其再次达到分子生物学缓解,减少血液学复发,提高造血干细胞移植疗效,且不良反应小。

8p11骨髓增殖综合征1例并文献回顾

8p11骨髓增殖综合征(8p11 myeloproliferative syndrome,EMS)是一组以白细胞计数明显增高、髓系细胞增生、嗜酸性粒细胞增多、淋巴瘤为特征的临床综合征。分子生物学定义是定位于8号染色体短臂(8p11-12)上的成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)基因与伙伴基因易位或插入而产生的侵袭性肿瘤。2008年WHO将本病定义为髓系、淋系肿瘤伴有成纤维细胞生长因子受体1异常。目前共发现14种与FGFR1重排相关的伙伴基因,其中最常见的是位于13q11-12上的ZNF198。EMS预后差,患者常在短期内迅速进展为急性髓系白血病,目前只有异基因造血干细胞移植能有效控制该病。现报告我科诊断的1例EMS病例,并就其分子生物学特征、发病机制和治疗等的研究现状进行讨论。

原发中枢神经系统淋巴瘤的临床特征及预后分析

目的:分析原发中枢神经系统淋巴瘤(primary central nervous system lymphoma,PCNSL)患者的临床特征和预后的影响因素。方法:收集2014年02月至2021年06月我院诊断的50例PCNSL患者的临床资料和生存情况。采用SPSS 26.0进行整理、统计和分析,将单因素分析结果有统计差异的变量作为Cox回归的自变量,分析预后的危险因素,并绘制生存曲线图。结果:50例患者中男性32例,女性18例,中位年龄61.5岁(24~73岁),ECOG<2分18例,≥2分32例,IELSG分组0~1分15例,2~3分27例,4~5分8例,以中危组的人数较多,占54.0%。病理类型以弥漫大B细胞淋巴瘤(非生发中心型)为主,占82.0%。Ki-67≥90%为14例。LDH≥250 U/L为15例。病灶数目以多发为主,占66.0%,累及深部病灶26例,占52.0%。临床表现以颅内压升高为典型表现,22例(44%)为持续长时间头痛、头晕伴恶心呕吐。治疗方案为单药MTX 19例,R+MTX 15例,R+MTX+BTKi 16例。单因素分析显示,≤60岁、ECOG<2分、未累及深部病灶、IELSG分组低危组、LDH<250 U/L的患者3年生存率高于对照组,治疗方案为R+MTX+BTKi的中位生存时间为(66.69±4.18)个月,R+MTX组为(44.93±8.25)个月,MTX单药组为(28.58±6.50)个月。Cox比例风险回归分析显示,大于60岁、多发病灶、累及深部病灶以及单药治疗的患者其死亡风险相对较高。结论:PCNSL的预后与年龄、病灶数目、累及深部病灶情况和治疗方案的选择有关,BTK抑制剂的加入能够改善疾病预后。

异基因造血干细胞移植治疗难治/复发急性髓系白血病的疗效及预后因素分析

目的:探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗难治/复发急性髓系白血病(AML)患者的疗效及影响预后的相关因素。方法:回顾性分析2013年12月至2020年6月在我院接受allo-HSCT治疗的80例难治/复发AML患者的临床资料,主要观察患者总体生存(OS)率、无病生存(DFS)率、复发率及移植相关死亡(TRM)率,并分析影响移植预后的危险因素。结果:纳入研究的80例患者移植后均获得造血重建,3年OS、DFS率分别为(48.8±6.3)%和(40.8±6.7)%,3年累积复发率为33.8%(95%CI:0.254-0.449),3年累积TRM率为15.0%(95%CI:0.114-0.198)。单因素分析结果显示,移植前未达完全缓解、合并DNMT3A R882突变和移植后合并II-IV度急性移植物抗宿主病(aGVHD)是影响患者OS和DFS的预后不良因素。多因素分析结果显示,合并DNMT3A R882突变和移植后合并II-IV度aGVHD是影响患者OS(HR=0.253,95%CI:0.092-0.695,P=0.008;HR=5.681,95%CI:2.101-15.361,P=0.001)和DFS(HR=0.200,95%CI:0.071-0.569,P=0.003;HR=7.117,95%CI:2.556-19.818,P<0.001)的独立危险因素。细胞遗传学高危组患者的复发风险为71.4%(95%CI:0.610-0.836),较中危组患者的23.3%(95%CI:0.147-0.370)和低危组患者的23.5%(95%CI:0.127-0.437)明显增加(P=0.006)。结论:Allo-HSCT是挽救性治疗难治/复发AML患者的有效手段,合并DNMT3A R882突变和移植后合并II-IV度aGVHD是影响难治/复发AML患者移植预后的独立危险因素。

自体造血干细胞移植治疗弥漫大B细胞淋巴瘤患者的疗效分析

目的:比较一线与挽救性自体造血干细胞移植(auto-HSCT)治疗弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者的临床疗效。方法:回顾性分析30例年龄≤60岁的DLBCL患者的临床资料,根据移植时机将患者分为一线auto-HSCT组(15例)和挽救性auto-HSCT组(难治复发患者,15例),进行疗效分析。接受一线auto-HSCT的患者需满足以下任意一条:aaIPI评分≥2分,Ann-Arbor III-IV期,大包块(直径≥10 cm)或c-myc/BCL-2双表达。结果:所有患者移植后中位随访时间为26(3-103)个月。截至随访终点,共23例患者存活,死亡7例,7例均死于疾病复发和进展导致的多脏器功能衰竭。7例死亡患者从移植到死亡的中位生存时间为6(3-11)个月。其中一线auto-HSCT组的15例患者,2例复发,复发率为13.3%,死亡1例,死亡率为6.7%,14例存活,总生存(OS)率为93.3%。挽救性auto-HSCT的15例患者中,6例因疾病进展或复发而死亡,死亡率为40%,9例存活,OS率为60%。两组间患者死亡率有统计学差异(6.7%vs 40%,P=0.006)。一线auto-HSCT组3年无进展生存(PFS)率为93.3%,3年OS率为93.3%。挽救性auto-HSCT组3年PFS率为58.7%,3年OS率为59.2%。一线auto-HSCT组3年OS及PFS均明显高于挽救性auto-HSCT组(P=0.03,P=0.04)。最常见的不良反应为血液系统不良反应,所有患者均出现Ⅲ-Ⅳ级粒细胞减少。非血液学不良反应主要为胃肠道不良反应及口腔黏膜炎。两组患者不良反应无明显统计学差异。结论:一线auto-HSCT可作为具有不良预后因素的DLBCL患者的巩固治疗方案,auto-HSCT可进一步改善挽救化疗敏感的难治复发DLBCL患者的预后。

一线与挽救性单倍体相合造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血患者的疗效比较

目的:比较一线与挽救性单倍体相合造血干细胞移植(haplo-HSCT)治疗重型再生障碍性贫血(SAA)患者的疗效。方法:回顾性分析本院2013年5月1日至2018年12月31日因无同胞全相合供者而进行haplo-HSCT的重型和极重型再生障碍性贫血患者39例。一线haplo-HSCT组20例,中位病程1(1-3)个月;免疫抑制治疗(IST)失败后挽救性haplo-HSCT组19例,中位病程72(6-168)个月。所有患者均为骨髓联合外周血造血干细胞移植。预处理方案:Flu/Cy+ATG方案22例,Bu/Cy+ATG方案17例。结果:2组患者造血重建时间、感染发生率、Ⅰ-Ⅱ度及Ⅲ-Ⅳ度急、慢性移植物抗宿主病发生率差异均无统计学意义。一线haplo-HSCT组中继发性植入失败1例(5%),挽救性haplo-HSCT组中原发性植入失败2例(10.5%),继发性植物失败4例(21.1%)。挽救性haplo-HSCT组植入失败发生率高于一线haplo-HSCT组,比较差异有统计学意义(P=0.04)。中位随访时间为45(3-92)个月。一线haplo-HSCT组死亡率10%(2/20),挽救性haplo-HSCT组死亡率42.1%(8/19)。一线haplo-HSCT组预期5年无失败生存率(90%)明显高于挽救性haplo-HSCT组(57.4%),比较差异有统计学意义(P=0.02)。结论:一线haplo-HSCT治疗重型再生障碍性贫血患者,疗效好,安全性高,是治疗缺乏同胞全相合供者患者的有效手段。

初治弥漫大B细胞淋巴瘤患者MYD88基因突变的临床特征及预后分析

目的:探讨MYD88基因突变对初治弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)的临床特征及预后的影响。方法:收集2013年1月至2015年1月空军军医大学第二附属医院血液科的74例初治DLBCL患者,回顾分析MYD88突变组(MYD88mut)和MYD88野生组(MYD88wt)患者的临床特征及治疗效果。结果:74例DLBCL患者中,MYD88mut组和MYD88wt组患者性别、年龄、ECOG评分、LDH、Ann Arbor分期、结外侵犯及IPI评分比较差异无统计学意义。MYD88mut组主要为ABC亚型(75.00%)。12例MYD88mut突变均为错义突变,其中8例氨基酸改变为L265P。MYD88mut组2周期R-CHOP方案完全缓解率(complete remission,CR)为41.67%,部分缓解率(partial remission,PR)为33.33%,客观有效率(objective effective,OR)为75.00%。MYD88wt组分别为77.42%、11.29%和88.71%。2组比较,2周期CR率具有统计学差异(P=0.0304)。生存分析结果显示,MYD88mut组及MYD88wt组患者5年OS分别为54.98%与73.53%,PFS分别为48.61%与66.54%,2组比较,OS及PFS均具有统计学差异(P=0.0034,P=0.0319)。结论:MYD88突变主要存在于DLBCL的ABC亚型,且MYD88突变提示其预后不良。

异基因造血干细胞移植治疗成人Ph染色体阳性急性淋巴细胞白血病的临床疗效

目的:回顾性分析异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗成人Ph染色体阳性的急性淋巴细胞白血病(Ph^+ALL)的疗效。方法:收集本院自2011年9月至2018年12月行allo-HSCT的Ph^+ALL成人患者29例。移植前处于CR1 23例;CR2 3例;CR3 1例;未缓解(UR)2例。无关供者相合1例,同胞全相合5例,亲缘单倍体23例。骨髓+外周血造血干细胞移植14例,外周血造血干细胞移植15例。预处理方案:白消安/环磷酰胺(Bu/Cy)者1例,TBI/Cy者13例,TBI/Flu者7例,FBA者5例,CBA者3例。21例患者移植后使用TKI维持治疗至MRD阴性后1年。结果:26例获得完全造血重建,另3例患者获得ANC重建,未获得PLT重建。中位随访时间为13(3~54)个月,死亡10例(34.5%),死于疾病复发者6例,死于治疗相关并发症者4例(感染2例,严重肝脏GVHD 1例,TA-TMA 1例)。复发患者中均有相关高危因素(移植前未缓解及MRD阳性)。总生存率为65.5%。预期2年DFS 60%,预期2年OS 66%。移植后使用TKI维持组及不维持组预期2年DFS分别为78%vs 46%。结论:allo-HSCT是治疗急性淋巴细胞白血病患者的有效方法,移植后使用TKI维持治疗可提高移植疗效。

BCL2L10基因表达及其启动子甲基化在骨髓增生异常综合征中的临床意义

目的探讨骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者骨髓细胞中BCL2L10的表达及其启动子甲基化状态的临床意义。方法采用real-time PCR方法对56例MDS患者(MDS组)以及30例非白血病患者(非白血病对照组)骨髓标本的BCL2L10基因表达水平进行定量检测,MDS患者按修正的国际预后积分系统(IPSS-R评分)分为低/中危MDS组(IPSS-R评分≤4.5,33例)和高危MDS组(IPSS-R评分>4.5,23例)。采用甲基化特性PCR分析BCL2L10基因启动子区甲基化状态,同时在临床MDS样本和GEPIA数据库中对比分析BCL2L10表达水平与疾病预后的关系。结果MDS组患者BCL2L10基因表达水平较非白血病对照组显著降低(P<0.05),高危MDS组患者骨髓标本中BCL2L10基因表达水平显著低于非白血病对照组和低/中危MDS组(P<0.05)。BCL2L10基因表达水平受甲基化调控,高危MDS组患者BCL2L10基因启动子区甲基化阳性率(56.52%)明显高于非白血病对照组(36.67%,P<0.05)及低/中危MDS组(30.30%,P<0.05);且BCL2L10基因启动子区甲基化状态与MDS患者的危险度分层密切相关(χ~2=5.79,P<0.05),而与年龄、性别无统计学差异(P>0.05)。在24例未予以甲基化药物治疗的患者中,BCL2L10高表达组患者3年生存率低于BCL2L10低表达组(83.3%vs 50.0%),采用GEPIA数据库对BCL2L10在急性髓系白血病中进行预后比较,同样发现低表达组的预后较高表达组差,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论BCL2L10基因表达水平及其甲基化状态可作为判断MDS预后的指标之一。

自体造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤疗效观察

目的探讨自体造血干细胞移植(auto-HSCT)治疗多发性骨髓瘤(MM)的疗效及安全性。方法回顾性分析2007年10月至2020年7月空军军医大学第二附属医院收治的33例初治MM患者的临床特点及治疗效果。结果截至随访结束,所有患者中位随访时间为45(17~135)个月。移植前完全缓解(CR)17例、非常好的部分缓解(VGPR)6例、部分缓解(PR)10例,移植后3个月CR 22例、VGPR 8例、PR 2例、PD 1例。30例患者移植后3个月≥VGPR率为90.9%,明显高于移植前的69.7%,差异有统计学意义(P<0.05)。3年总生存率(OS)为74.5%,3年无进展生存率(PFS)为59.1%。诱导治疗≤4个疗程共18例,该组患者3年OS为77.3%,3年PFS为60.1%。诱导治疗>4个疗程共15例,该组患者3年OS为70.0%,3年PFS为58.9%。诱导治疗≤4个疗程组与>4个疗程组患者的3年OS及3年PFS比较差异无统计学意义(P>0.05)。患者治疗的主要不良反应为骨髓抑制、黏膜炎、肺炎。结论自体造血干细胞移植治疗对适合移植的MM患者有效,可进一步提高缓解率和缓解深度,延长患者的PFS和OS时间。

PSC方案治疗复发难治结外NK/T细胞淋巴瘤鼻型的疗效观察

目的:探讨PSC方案治疗复发难治结外NK/T细胞淋巴瘤(ENKTCL)的疗效。方法:回顾性分析自2019年01月01日至2021年01月01日我科收治的ENKTCL采用信迪利单抗、西达苯胺联合培门冬酶(PSC)方案的治疗效果。结果:共收集到13例具有完整临床资料的复发难治ENKTCL患者,男女比例为5.5∶1,男性多见。中位发病年龄51岁(11~74岁)。复发ENKTCL 8例(61.54%),难治ENKTCL 5例(38.46%),13例R/R NKTCL中9例(69.23%)为结外累及。13例复发难治ENKTCL患者中,2周期CR为7例(53.85%),PR 3例(23.08%),ORR 10例(76.92%),其中1例患者CR后再次治疗2周期疾病进展家属放弃治疗死亡。随访至2021年1月31日中位OS为未达到,中位无进展生存(PFS)4个月。13例复发难治ENKTCL,采用PSC方案治疗后出现的主要不良反应有肝功能损伤、低蛋白血症、低纤维蛋白原血症、甲状腺功能减低及血液学毒性等。给予对症治疗后好转。结论:PSC方案治疗复发难治ENKTCL疗效确定,不良反应可耐受。

干扰素γ诱导蛋白16(IFI16)在多发性骨髓瘤中的功能研究

目的:探究干扰素γ诱导蛋白16(IFI16)在多发性骨髓瘤(MM)中的生物学功能。方法:将人多发性骨髓瘤细胞(RPMI-8266)分为Control组(未转染的细胞)、NC-sh组(转染阴性对照shRNA慢病毒的细胞)、IFI16-sh组(转染IFI16 shRNA慢病毒的细胞)、NC-OE组(转染阴性对照过表达慢病毒的细胞)和IFI16-OE组(转染IFI16过表达慢病毒的细胞)。使用Lipofectamine 2000进行细胞转染,培养48 h后收集细胞。通过MTT法和集落形成实验检测细胞增殖。通过Annexin V-FITC和PI染色法检测细胞凋亡。通过Transwell检测细胞侵袭。通过qRT-PCR检测IFI16、Bcl-2、Bax、成纤维细胞生长因子(FGF)1、FGF2的m RNA水平。通过Western blot检测IFI16的蛋白表达水平。将裸鼠随机分为NC-sh组和IFI16-sh组,每组6只。NC-sh组和IFI16-sh组裸鼠分别皮下注射转染NC-sh和IFI16-sh的RPMI-8266细胞悬液。35 d后测量肿瘤体积和肿瘤重量。采用ELISA法检测Th1细胞因子[干扰素-γ(IFN-γ)、白介素(IL)-12]、Th2细胞因子(IL-4)和促炎因子[IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]的水平。结果:与Control组和NC-sh组比较,IFI16-sh组RPMI-8266细胞的IFI16 m RNA和蛋白相对表达量降低(P<0.05),相对细胞活力、集落数量和侵袭细胞数量均降低(P<0.05),细胞凋亡率和Bax m RNA相对表达量均升高(P<0.05),Bcl-2、FGF1和FGF2的m RNA相对表达量均降低(P<0.05)。与Control组和NC-OE组比较,IFI16-OE组RPMI-8266细胞的IFI16 m RNA和蛋白相对表达量升高(P<0.05),相对细胞活力、集落数量和侵袭细胞数量均升高(P<0.05),细胞凋亡率和Bax m RNA相对表达量均降低(P<0.05),Bcl-2、FGF1和FGF2的m RNA相对表达量均升高(P<0.05)。与NC-sh组比较,IFI16-sh组裸鼠的肿瘤体积、肿瘤重量以及肿瘤组织中IFI16的m RNA和蛋白相对表达量均降低(P<0.05),外周血IFN-γ和IL-12水平均升高(P<0.05),IL-4、IL-1β、IL-6和TNF-α水平均降低(P<0.05)。结论:IFI16是MM中的一种致癌基因,下调IFI16可抑制MM细胞的生长和侵袭,其机制与纠正Th1/Th2细胞平衡和抑制促炎因子活性有关。

人IL-3基因原核表达载体的构建及表达

目的:构建人IL-3基因原核表达载体pET32a-IL-3,并在大肠杆菌中诱导表达。方法:通过佛波酯(TPA)和植物球血凝素(PHA)刺激人T淋巴细胞系Jurkat细胞,增加IL-3mRNA表达水平,提取mRNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获得cDNA,以Jurkat细胞cDNA为模板,通过PCR方法扩增得到人IL-3基因,将其克隆入原核表达载体pET32a(+)中,将重组质粒转化入大肠杆菌宿主菌株BL21中,以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导融合蛋白表达,并通过改变IPTG浓度,诱导时间,诱导温度等条件最终实现蛋白的可溶性表达。表达产物用SDS-PAGE检测表达情况。结果:酶切鉴定和测序结果证明成功构建了原核表达载体pET32a-IL-3。SDS-PAGE检测结果证明实现了人IL-3基因在大肠杆菌中的可溶性表达。结论:成功构建了人IL-3基因的原核表达载体并在大肠杆菌中获得了良好的表达。

LIM结构域蛋白FHL1C抑制Notch信号途径的转录激活研究

目的:克隆人表达FHL1C基因以及建立真核表达载体和慢病毒载体。方法:从人的骨骼肌细胞来源的cDNA中扩增并克隆人FHL1C基因的编码区,连接至pMD-18T载体酶切鉴定后测序。序列测定确认后,双酶切pMD18T-FHL1C回收片段,插入真核表达载体,构建真核表达载体pCMV-Myc-FHL1C酶切鉴定正确后,转染Hela细胞及Cos7细胞,用Western Blot检测其在转染细胞中的表达,用双荧光素报告基因系统检测其对Notch信号作用。构建FHL1C-IRES-GFP表达单元,建立慢病毒表达载体plen-ti6/V5-FHL1C-IRES-GFP,包装慢病毒后感染培养的细胞,用免疫荧光显微镜、Western Blot检测分析其在被感染的细胞中的表达。结果:通过PCR方法成功扩增了人FHL1C基因的编码区。通过转染Hela及Cos7细胞,使用Western Blot检测其蛋白水平表达,双荧光报告基因系统分析均能够下调激活的Notch信号。成功构建了FHL1C慢病毒表达载体pLenti6/V5-FHL1C-IRES-GFP,包装慢病毒,把获取的慢病毒感染细胞后通过荧光显微镜证实被感染的细胞绿色荧光蛋白正确表达,Western Blot检测证实其表达。结论:成功建立起FHL1C真核表达载体及慢病毒表达系统,为研究急性T淋巴细胞白血病与Notch信号转导通路之间的关系奠定了基础。

胃癌患者以慢性贫血为首发表现的高危因素Logistic分析

目的:探讨胃癌相关贫血的流行病学特征,为临床诊断和治疗提供参考。方法:回顾性分析2020年6月至2022年6月收治的400例胃癌患者的临床资料,并分析癌症相关贫血的发生情况,观察癌症相关贫血的分布。采用SPSS 23.0统计软件对数据进行分析。其中正态分布的计量资料以(^(-)x±s)表示,采用t检验;计数资料以[例(%)]表示,采用χ^(2)检验。单因素分析癌症相关性贫血的相关因素;多因素采用Logistic回归分析癌症相关性贫血的独立危险因素。P<0.05表示差异有统计学意义。结果:在400例胃癌患者中,248例发生了癌症相关贫血,发生率为62.0%。其中轻度64例,中度128例,重度32例,极重度24例。单因素分析显示,年龄、TNM分期、KPS评分、低蛋白血症和是否接受化疗,差异有统计学意义(P<0.05)。多变量Logistic回归分析显示,年龄>60岁、Ⅲ-Ⅳ期、KPS评分≤60、低蛋白血症和化疗是癌症相关贫血的危险因素。结论:胃癌相关贫血的发病率较高,主要为轻中度,其中年龄>60岁、TNMⅢ-Ⅳ期、KPS评分≤60、低蛋白血症和化疗是癌症相关贫血的危险因素。

维奈克拉联合阿扎胞苷抢先治疗异基因造血干细胞移植后复发的疗效

目的:观察维奈克拉联合阿扎胞苷抢先治疗急性髓系白血病/骨髓增生异常综合征异基因造血干细胞移植后复发的疗效。方法:回顾性分析我科2020年1月1日—2022年10月31日共17例异基因造血干细胞移植后出现微小残留病(minimal residual disease,MRD)阳性的急性髓系白血病/骨髓增生异常综合征患者,使用维奈克拉联合阿扎胞苷进行抢先治疗。结果:中位随访时间18(4~28)个月,所有患者使用维奈克拉联合阿扎胞苷1~5个疗程。17例患者中15例评价为有效,总有效率为88.2%。治疗有效的15例患者中,7例1个疗程后MRD阴性,5例2个疗程后MRD转阴,3例3个疗程后MRD转阴。2例评价为疗效不佳。随访期间共死亡3例:2例因疾病进展死亡;1例因合并感染死亡。抢先治疗后中位无复发生存时间为15(1~27)个月,中位总生存时间为15(2~27)个月。抢先治疗后预期2年无复发生存率为74.5%,预期2年总生存率为79.9%。结论:维奈克拉联合阿扎胞苷抢先治疗可使造血干细胞移植后分子生物学复发的患者再次达微小残留病阴性,延长移植后无复发生存率,提高造血干细胞移植的疗效,且不良反应小,耐受性良好。