水稻悬浮细胞的超低温保存研究

本研究分析了水稻悬浮细胞的生理状态和各种冷冻前处理等因素对超低温保存后细胞存活率的影响。结果表明,继代后培养3—5天,处于对数生长期的细胞,采用二步冷冻法,超低温保存后存活率最高。电镜超微结构观察显示,0.5mol/L山梨醇预培养,10%DMSO+0.5mol/L山梨醇复合保护剂处理,液泡显著变小,数目明显减少,从而降低了细胞内自由水含量,增强细胞的抗冷冻能力。在上述合适的前处理和冷冻-化冻条件下,超低温保存水稻悬浮细胞的恢复生长率为58%,恢复生长的细胞转移到分化培养基上,可再生健壮绿苗, 移植到盆钵,在温室中长成正常结实的植株。

植物组织和细胞的玻璃化冻存研究

利用液氮超低温(-196℃)冻存是进行植物组织和细胞长期、稳定保存的有效方法。它不仅在常规育种中可以克服各种珍稀、濒危植物资源自然繁衍的困难,而且能在现代生物技术研究中保存各种培养细胞和优良中间实验材料,从而为实验细胞库的建立创造条件。

线粒体疾病与核基因-线粒体基因的表达调控

线粒体与疾病是当前生物医学领域最前沿之一。本文简单介绍线粒体生物医学的基础知识、线粒体疾病的遗传模式,综述了近年来在线粒体DNA(mtDNA)突变和疾病、核基因突变和疾病等领域的研究进展,着重阐明核基因(特别是核修饰基因)调控mtDNA突变致病表达的分子机制。

水溶性 C_(60)-脂质体的循环伏安特性研究

本文通过卵磷脂包装技术，制备了水溶性Ｃ６０－脂质体，采用微电极循伏安法，在室温下，支持电解质为０．０５ｍｏｌ／Ｌ（ｎ－Ｂｕ）４ＮＢｒ／ＰＢＳ的水溶液中，于－０．７８Ｖ（ｖｓ．Ａｇ／ＡｇＣｌ）处记录到一对显著的、可逆氧化还原峰．

大麦悬浮细胞抗酸铝特性的研究

以对酸铝敏感的大麦品种“早熟3号”的幼胚为外植体，建立胚性悬浮细胞系。比较了不同PH值和Al3＋浓度（0，10，30，50PPm）对细胞生长的影响，表明A13＋对细胞具有明显的毒害作用，浓度越高，毒性越大。50PPmA13＋也许是大麦悬浮细胞系的致死浓度．另一方面，细胞具有自我调节和改变培养液微环境PH值的能力，以缓解A13＋的毒害。

肥厚型心肌病的致病分子机制研究进展

肥厚型心肌病(Hypertrophic cardiomyopathy,HCM)是以左心室及室间隔不对称肥厚为基本特征的原发性心肌病,其发病率约为0.2%,是青少年和运动员心源性猝死的最常见原因。HCM的发病年龄、发病程度和猝死风险等临床表型具有多样性,通常呈常染色体显性遗传。目前已报道的HCM相关突变超过900种,主要定位在β肌球蛋白重链基因、肌球蛋白结合蛋白C基因、心脏肌钙蛋白T基因等13个心脏肌节蛋白基因;另一方面,越来越多的研究显示线粒体基因突变与HCM发生相关。文章在简单介绍HCM形态学特征及临床表型的基础上,着重综述了HCM的致病分子机制及其最新研究进展。

C_(60)对体外培养癌细胞的光致作用研究

研究结果表明用C60 磷脂酰胆碱与体外培养的HeLa细胞融合后 ,以 4 0 0 0lx光强度激发C60(C60 浓度 2 0mg/L)对HeLa细胞具有显著的光致杀伤作用 .生化测定证实光激发C60 导致膜蛋白巯基含量减少、膜脂过氧化、丙二醛含量增高 ,SDS PAGE证明膜蛋白交联 ,荧光偏振显示膜流动性降低 ,电镜超微膜结构破坏 ,经MTT法检测 ,大部分细胞死亡 .C60 的强烈光致作用证实了Arbogast等认为光激发C60 可产生单线态氧的观态 .

大麦幼穗的玻璃化法超低温保存及冻后植株再生

大麦（Ｈｏｒｄｅｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ）幼穗经添加０．５ ｍ ｏｌ／Ｌ蔗糖的２ ｄ 预培养，用玻璃化保护剂ＰＶＳ２ 冰浴处理５ ｍ ｉｎ，直接投入液氮贮存；快速化冻，洗去保护剂后恢复培养，三个品种“８１Ｇ１”、“戈贝纳”和“旭９”的存活率分别为１００％ 、８２．５％ 和５０％ 。存活的幼穗能形成愈伤组织并再生植株。不经预培养，几个品种的幼穗均不能存活。存活率低的品种，其抗脱水力和抗冻力均较差。和传统的二步冷冻法相比，玻璃化法具有存活率高。

鸡传染性支气管炎病毒嗜腺胃毒株(ZJ971)株S2基因的克隆及序列分析

采用特异性引物对鸡传染性支气管炎病毒 (IBV )嗜腺胃毒株 (ZJ971毒株 )进行 RT- PCR扩增 ,将扩增到的 S2基因 c DNA克隆入 p Bluescript SK质粒载体中 ,经鉴定后测序。结果显示 ,扩增的 ZJ971毒株 S2基因全长为 1872 nt,编码 1条由 5 30个氨基酸组成的多肽 ,与 Beaudette株、M41株、Ark99株比较 ,其核苷酸同源性分别为 97.34 %、97.72 %、96 .30 % ;3′端核苷酸相对于 5′端保守 ,在 5′端第 184～ 2 83位之间的核苷酸为高可变区。同时 ,IBV - ZJ971株S2基因第 16 2 1位的碱基由 G突变为 T,导致

玻璃化法液氮冻存大麦和水稻的胚性悬浮培养细胞

大麦和水稻的胚牲悬浮细胞系不仅是全能性原生质体的主要来源,而且它本身也可作为植物基因转移的受体.为解决生物工程中优良实验材料的长湖保苟问题。我们进行了胚性悬浮培养细胞的液氮超低温保存研究.

C_(60)对小鼠S_(180)肉瘤光动力学作用模型的建立

为验证C60 对活体肿瘤的光动力学损伤作用,我们从两方面进行实验 :C60 对荷瘤小鼠的S180实体瘤的光动力学杀伤作用和C60 对离体S180 肿瘤细胞的光动力学杀伤作用。在小鼠的瘤体上注射C60 光敏剂 ,在511nm和578nm混合黄绿色激光照射下 ,激发C60,产生大量的单线态氧 ,杀伤活性肿瘤。在激光光强为500mW ,C60 浓度为30μg/ml时 ,荷瘤小鼠寿命平均延长5天 ,瘤径减小1cm,瘤重减轻0.8克 ,在活体水平上验证了C60 的光动力学作用 ;另外,在离体的S180 肿瘤细胞中加入细胞培养物和C60 脂质体光敏剂 ,用碘钨灯照射激发C60。经MTT法和FDA -PI双色荧光分光光度法检测 ,离体S180 肿瘤细胞也明显被杀伤。C60 具有强的光敏剂作用 ,它不仅在活体水平上可以杀伤S180 实体瘤而且对离体的S180 实体瘤细胞有强的杀伤作用。

健康教育对突发性耳聋患者的应激反应状态及生活质量的影响

目的：探讨健康教育对突发性耳聋患者的应激反应状态及生活质量的影响。方法选择2011年2月~2013年11月在我院住院治疗的单侧突发性耳聋患者110例，随机分为干预组和对照组各55例，干预组实施认知行为教育、心理引导、放松训练指导为主要内容的健康教育，比较干预前后两组斯坦福急性应激反应问卷（SAS-RQ）、世界卫生组织生活质量测定简表（WHOQOL-BREF）、匹兹堡睡眠质量指数（PSQI）评分及疗效。结果干预后干预组SASRQ评分总分显著低于对照组（P〈0.05）。干预后干预组WHOQOL-BREF心理领域、社会关系、总体生活质量及健康状态评分均显著高于对照组（P〈0.05）。干预后干预组PSQI各维度评分均显著低于对照组（P〈0.05）。干预组与对照组显效率差异有统计学意义（P〈0.05）。结论突发性耳聋患者存在明显的生理和心理应激状态影响生活质量，健康教育有助于缓解其应激状态、改善睡眠、提高生活质量，促进突发性耳聋治疗效果提高。

大麦幼胚的超低温保存

大麦(Hordeum vulgare L.)幼胚经二甲亚砜(DMSO)和山梨醇复合保护处理,可以在液氮(-196℃)超低温保存.山梨醇预培养2天可以明显提高两步冷冻法冻存幼胚的存活率.4℃预处理4小时对胚存活率的影响不大,但它使幼胚分化能力下降,超低温冷冻对盾片的伤害小于对胚轴的伤害.快速冷冻法冷冻大麦幼胚取得良好的保存效果,冻存后的幼胚经过恢复培养,长出绿苗.

大麦胚性愈伤组织细胞ODO冷冻断裂面的扫描电镜观察

ODO冷冻断裂法是一项扫描电镜生物样品制备的有效技术,它在生物医学的形态学研究中发挥了重要作用,把这个技术用到植物离体培养物的超微形态研究,是一个新的尝试.大麦胚性愈伤组织用低浓度的戊二醛前固定,再用ODO冷冻断裂法制备扫描电镜样品.本研究主要观察了淀粉粒和淀粉质体在胚性愈伤组织细胞中的分布,因为淀粉粒沉积的变化和质体结构的变化是去分化和再分化过程中的重要特征之一.本文还图示了自制的冷冻断裂器,并对ODO冷冻断裂法的应用作了一些讨论.

糖尿病引发相关组织细胞异常凋亡病变之综述

糖尿病是一种代谢失调性内分泌疾病,会引发视网膜细胞、胚胎细胞、血管内皮细胞、肾细胞、神经细胞等组织细胞的异常凋亡和病变,其引发凋亡的机制主要与三条通路密切相关:线粒体通路、死亡受体通路和内质网通路.这三条通路间相互联系,并且与Pax 3蛋白分子、含半胱氨酸的天冬氨酸特异性蛋白酶家族分子及一些胞内信号转导分子构成一个复杂网络对组织细胞的凋亡进行调控.

线粒体基因编辑技术研究进展

线粒体DNA(mtDNA)突变会导致多种遗传病的发生。mtDNA编辑技术作为新兴的治疗手段基本基于蛋白质识别靶点,核酸识别型mtDNA编辑技术较少。以锌指核酸酶技术、转录激活因子样效应核酸酶技术、碱基编辑技术为代表的蛋白质识别型mtDNA编辑技术取得了一定进展,但识别序列设计复杂的弊端阻碍其进一步推广。CRISPR/Cas9等核酸识别型编辑技术以其结构简单、易于设计和修饰的特色展现出优越性,但缺乏将核酸递送进入线粒体的有效手段限制了其在mtDNA编辑领域的应用。随着对内源性、外源性导入途径的研究和DNA修复机制的深化理解,越来越多的证据表明核酸递送的可行性和核酸识别型mtDNA编辑技术的广阔应用前景。本文基于识别元件分类,总结了当前线粒体基因编辑技术的原理和发展现状,展望了核酸识别型mtDNA编辑技术的潜在价值。

针灸联合高压氧治疗突发性耳聋的临床疗效及对血液流变学的影响

目的研究针灸联合高压氧治疗突发性耳聋的临床疗效及对血液流变学影响。方法选取针灸联合组114例和对照组100例,对照组采用常规药物治疗,针灸联合组在此基础上采用针灸联合高压氧治疗,比较两组2个疗程治疗效果及血液流变学指标。结果针灸联合组和对照组治疗2个疗程后听力均较治疗前明显提高(P<0.05),第1、2疗程结束针灸联合组听力均显著高于对照组(P<0.01)。针灸联合组和对照组治疗总有效率分别为95.61%和73.00%,针灸联合组治疗效果显著高于对照组(P<0.01)。针灸联合组治疗前后全血高切黏度、全血中切黏度、全血低切黏度、血浆黏度、红细胞压积、红细胞聚集指数、红细胞变形指数均有显著差异(P均<0.05),对照组治疗前后全血高切黏度、全血中切黏度、全血低切黏度、血浆黏度、红细胞压积、红细胞聚集指数、红细胞变形指数均有显著差异(P均<0.05),第1、2疗程结束两组全血高切黏度、全血中切黏度、全血低切黏度、血浆黏度、红细胞压积、红细胞聚集指数、红细胞变形指数比较均有显著性差异(P<0.05)。结论针灸联合高压氧治疗突发性耳聋可有效改善患者血液黏度和促进微循环,提高患者听力和治疗效果。

鼓室联合静脉地塞米松及传统方法治疗突发性耳聋临床效果研究

目的探讨突发性耳聋患者采用ITD联合静脉地塞米松及传统方法治疗后的效果。方法回顾性分析来我院治疗的67例(67耳)突发性耳聋患者的临床资料,将患者分为观察组Ⅰ(n=17)、观察组Ⅱ(n=16)、对照组Ⅰ(n=17)及对照组Ⅱ(n=17)。在常规治疗基础上对照组Ⅰ加高氧液,对照组Ⅱ加高压氧;观察组ⅠITD加高氧液,观察组ⅡITD加高压氧。结果四组治疗后PTA均低于治疗前(P<0.05)。观察组Ⅰ治疗总有效率高于对照组Ⅰ,对照组Ⅰ、对照组Ⅱ、观察组Ⅱ治疗后0.25 kHz纯音听阈均低于治疗前,观察组Ⅱ治疗后8 kHz纯音听阈低于治疗前(P<0.05);中重度、重度及全聋患者的临床治疗总有效率高于中度(P<0.05)。结论对突发性耳聋患者采用鼓室联合静脉地塞米松及活血化瘀中药、维生素、高氧液或高压氧进行治疗具有较好的临床效果。

健康教育对突发性耳聋患者生活质量及疾病认知水平的影响

目的探讨健康教育对突发性耳聋患者生活质量及疾病认知水平的影响。方法选择在我科住院的突发性耳聋患者60例作为研究对象,对患者进行系统化的健康教育,比较患者健康教育前后生活质量和疾病认知水平的差异。结果健康教育后突发性耳聋患者认知水平显著高于健康教育前(P<0.01);健康教育后患者在提高听力水平、心理状态、社会功能方面优、良比例显著高于健康教育前(P<0.01)。结论健康教育能够改善突发性耳聋患者的生活质量,提高患者对疾病的认知水平。

健康教育干预对梅尼埃病患者疗效及生活质量的影响

目的：探讨健康教育干预对改善梅尼埃病患者症状及生活质量的影响。方法选择2012年5月-2013年8月在我院治疗的梅尼埃病患者87例，分为干预组44例和对照组43例，干预组进行梅尼埃病健康教育，比较两组前庭症状指数（VSI）、眩晕障碍量表（DHI）、焦虑自评量表（SDS）、抑郁自评量表（SAS）改善情况。结果干预组干预后平衡、眩晕、头晕、恶心、视觉敏感、头痛及总分均显著低于对照组（P〈0.05）；干预组干预后DHI情感性、功能性、身体性评分均显著低于对照组（P〈0.05）；干预组干预后SDS和SAS评分均显著低于对照组（P〈0.05）。结论梅尼埃病对患者前庭功能、心理及生活质量造成明显影响，健康教育有助于改善前庭症状，减轻不良情绪，提高生活质量。