Fas/FasL和Caspase-3在二氮嗪强化Celsior液超时冷保存鼠心移植中的表达及其意义

目的研究心肌线粒体三磷腺苷敏感性钾离子通道(mitochondrial ATP-sensitive potassium channel,MitoKATPC)开放剂二氮嗪(diazoxide,DE)添加入Celsior液中对大鼠供心超时冷保存的效果,并探讨其抗心肌凋亡作用的可能机制。方法SD大鼠112只,随机分成7组,每组16只(供者、受者各8只)。(1)Celsior组:保存液为单纯Celsior液;(2)DE组:保存液为30μmol/LDE+Celsior液;上述两组又以保存时间不同分为5 h、8 h、10 h组。(3)5-HD组:保存液为Celsior液+DE(30μmol/L)+5-HD(100μmol/L),保存时间为5 h。利用改良Heron法建立大鼠颈部异位心脏移植模型,观察移植术后5 min内心脏恢复跳动、心率表现;采用原位末端标记染色法检测心肌细胞凋亡,用免疫组织化学方法检测心肌Fas/FasL和Caspase-3蛋白的表达情况;以及用电镜观察心肌超微结构等。结果(1)除5 h保存时间的心脏外,DE各组心脏移植术后30 s复跳率较相应Celsior液组显著提高;DE组心率明显较Celsior液组快(P<0.05),DE 10 h组与Celsior 5 h组无明显区别(P>0.05);(2)与Celsior液组相比,DE处理明显降低各组心肌细胞凋亡指数(P<0.05),减少Fas/FasL和Caspase-3蛋白的表达(均为P<0.05);DE10 h组与Celsior5 h组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05);(3)5-HD可取消上述DE的作用;(4)DE各组和Celsior 5 h组心肌超微结构保护相对较佳:肌纤维排列整齐,肌节清,线粒体肿胀不明显,嵴结构较为清楚;Celsior 10 h组心肌结构尚清楚,但肌纤维疏松,个别区域肌丝肌节溶解,线粒体肿胀较明显,嵴模糊。结论DE强化Celsior液冷保存的鼠供心,可能通过激活MitoKATPC,明显抑制Fas/FasL和Caspase-3蛋白的表达,保护线粒体功能和结构的完整,从而使心肌细胞凋亡减少,减轻缺血再灌注损伤,使得DE强化Celsior液超时(10 h)冷保存的鼠供心移植安全有效。

二氮嗪对低温保存诱导的心肌线粒体氧自由基的清除作用

目的观察二氮嗪(diazoxide,DE)对不同时程低温保存诱导产生的大鼠心肌细胞线粒体内氧自由基的清除作用。方法根据不同的低温保存时程,SD大鼠随机分9组,每组8只。利用Langendorff离体鼠心灌注法停搏大鼠心脏,然后在4℃单纯Celsior保存液或加入DE(30μmol/L)的Celsior保存液中分别保存0h、3h、6h、9h或12h后,检测心肌细胞线粒体内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(maleic dialdehyde,MDA)含量的变化。且同步观察电镜下心肌超微结构的变化。结果①与对照组比较,随着冷保存时间的延长,心肌细胞线粒体内SOD活性随之降低,MDA含量随之升高,电镜结果显示心肌细胞线粒体超微结构随之破坏加剧;②与相应低温保存时程的单纯celsior液组比较,在保存液中加入DE后,上述各项指标均有明显改善,且以冷保存6h和9h后最为显著。结论DE在大鼠心脏长时程低温保存期间可通过直接清除自由基及提高线粒体SOD活力而减轻由长时程低温保存导致的心肌细胞线粒体的损伤。

心脏移植与肿瘤

器官移植术后,受者需长期使用免疫抑制剂治疗,其免疫功能受到抑制,机体识别和清除突变细胞的免疫监视功能遭受破坏,故容易发生恶性肿瘤。随着移植学科的不断发展,移植受者与移植器官的存活率均明显提高,移植受者发生肿瘤的几率亦逐渐增多。术后肿瘤的发生率因受者移植术时的年龄、使用的免疫抑制剂，以及移植器官的不同而有差异，其中非肾移植受者的危险性远较肾移植受者高。1993年Penn等H0研究发现，在各种器官移植术后肿瘤发生率排序中，心脏移植术后肿瘤发生率位居第2位。近年若干学者相继报道心脏移植术后肿瘤发生率为4％～18％，

同种原位心脏移植术(附1例报告)

为抢救1例终末期扩张型心肌病患者的生命,进一步提高我国心脏移植的水平,在实验研究与技术操练的基础上,进行了同种原位心脏移植术。术后患者心功能良好,恢复正常生活与工作。对手术指征、供心选择、操作要点、心肌保护中冠状静脉窦温血持续逆灌注的应用、三联免疫抑制疗法剂量的掌握及抗感染等问题进行了探讨。

二氮嗪在长时程心脏低温保存中的作用

延长心脏的体外有效保存时间对临床心脏移植具有重要意义。本文旨在研究线粒体ATP 敏感性钾通道开放剂二氮嗪(diazoxide, DE)在离体大鼠心脏长时程低温保存中的作用。SD 大鼠随机分成 5 组,包括对照组(单纯 Celsior 保存液), DE 组(Celsior 液中含 15、30 或 45 μmol/L 的 DE)和 DE+5-HD 组 [Celsior 液中含 30 μmol/L 的 DE 和 100 μmol/L 的 5- 羟基葵酸盐(5-hydroxydecanoate, 5-HD)]。利用 Langendorff 离体鼠心灌注法, 观察心脏在 4℃条件下保存 10 h 后, 复灌期血流动力学恢复、冠脉流出液中心肌酶漏出量及心肌水含量变化, 并做心肌超微结构检查。结果显示:与对照组比较,DE 处理后,复灌期的左心室舒张末期压力明显降低,心率、左心室发展压、左心室压力变化率、冠脉流出量等的恢复率在多个复灌时间点上优于对照组,且能显著减少复灌过程中心肌酶(乳酸脱氢酶、磷酸肌酸激酶及谷草转氨酶)的漏出量,降低心肌水含量;其中30 和45 μmol/L DE 组的保护作用优于15 μmol/L DE 组;电镜结果显示DE 对长时程低温保存心脏的超微结构有较好的保护作用。DE 的上述作用可被线粒体ATP 敏感性钾通道的特异性阻断剂 5-HD 所取消。以上结果提示:DE 可通过激活线粒体 ATP 敏感性钾通道显著改善离体大鼠心脏长时程低?

胸腔镜下胸交感神经切除术治疗手汗症110例

目的 评价胸腔镜下胸交感神经切除术 (TES)治疗手汗症的疗效及并发症。 方法 采用胸腔镜下胸交感神经切除术治疗手汗症 110例 ,均采用两侧胸交感神经链同一体位下一期切除。 结果 手术有效率 10 0 % ,术后住院时间 1～ 7天 ,平均 3.2天 ,所有病例术后双手立即干燥、红润。随访 82例 (74 .5 % ) ,随访时间 1～ 75个月 ,平均35个月。 3例术后再发手掌多汗 ,但较术前明显减轻 ,且有逐渐减少趋势。并发症 :肺大泡破裂 1例 ,术后气胸 7例 ,单侧轻微 Horner综合征 2例 ,胸腔积血 1例 ,鼻炎 1例 ,4 5例术后出现躯体部代偿性多汗 ,部分患者术后感觉胸背部疼痛。 结论 TES治疗手汗症疗效确切 ,安全可靠 ,但应考虑到可能发生的副作用、并发症 ,仍须严格掌握适应证。

用噬菌体展示筛选Gal-α-1,3-Gal的模拟肽

猪心移植是解决心脏移植供体少的有效方法 .由于猪心血管内皮细胞表面抗原半乳糖 α 1,3 半乳糖 (Gal α 1,3 Gal) ,能与人体内预存的天然抗体结合产生超急性排斥反应 (HAR) ,而无法应用于临床 .为了解决这一难题 ,应用噬菌体展示技术 ,筛选出一个能与抗B型血单克隆抗体 (mABanti B)特异性结合的阳性噬菌体克隆 ,应用酶联免疫吸附测定 (ELISA)和竞争性ELISA结果表明 ,所获得的阳性噬菌体克隆能特异性地与mABanti B结合 ,并且这种结合可被蜜二糖 (具有Gal α 1,6 Glc的结构 )所竞争抑制 .由此推测 ,筛选到的噬菌体阳性克隆很可能就结合在蜜二糖与mABanti B结合的位点 .同时 ,进行了阳性噬菌体克隆的抑制猪红细胞凝集活性试验 ,试验结果表明 ,此阳性克隆不仅可抑制Gal α 1,3 Gal与抗体的结合 ,也可抑制Gal α 1,3 Gal与西非单叶豆凝集素 (GS I B4)的结合 .此噬菌体阳性克隆测序后 ,得小肽序列为CCWLLRQPVRFVRSIRS .鉴于以上的结果 ,认为此小肽可以作为Gal α 1,3 Gal的模拟肽 。

胸腔镜下钛夹间断钳闭法治疗肺大泡破裂伴气胸

我科１９９３年１月～１９９７年８月，应用钛夹间断钳闭法治疗肺大泡破裂伴气胸４０例，取得满意疗效。１临床资料与方法１．１一般资料全组４０例，男３９例，女１例。年龄１５～７０岁，平均３１．６岁。左侧气胸１７例，右侧气胸１８例，双侧气胸５例；其中，双侧气胸...

胸腔镜外科的经验与体会

目的 探讨电视胸腔镜手术 (VATS)治疗胸部疾病的可行性。方法 实施VATS手术223例 ,其中216例经胸腔镜完成手术 ,7例术中转传统开胸术。手术治疗的疾病包括自发性气胸、手汗症、肺、胸膜、纵隔疾病及胸外伤等10余种。结果 手术时间平均51分钟 (61～147分钟 ) ,平均住院日7.6天(1～17天) ,发生胸部并发症10例。随访3～80个月 ,自发性气胸2例、手汗症和胸背部代偿性汗增多5例。结论 VATS治疗某些胸部疾病就操作技术而言是可行的 。

eNOS基因转移对山羊移植血管内膜增生的抑制作用

目的探讨eNOS基因转移防治移植静脉血管桥再狭窄的可行性。方法构建带有eNOS基因的复制缺陷型重组腺病毒载体(AdCMVeNOS)和腺病毒空载体(AdCMV)。取山羊颈静脉作血管桥,在体外转染AdCMVeNOS(实验组)和AdCMV(对照组),然后旁路移植到自体颈动脉上。术后30d免疫组化染色,测定静脉桥3H-TDR的掺入量和静脉桥内膜厚度及管腔狭窄面积百分比,观察eNOS基因在静脉桥中的功能表达和静脉桥新生内膜的增生情况。结果转染后30d,实验组静脉桥中外源性eNOS仍有功能表达;静脉桥3H-TDR掺入量与对照组相比明显减少(P<0.01);静脉桥平均内膜增生厚度和管腔狭窄面积百分比明显低于对照组(P<0.01)。结论eNOS基因转移可以有效抑制移植血管新生内膜的增生,对预防移植血管的狭窄有一定作用。

不同节段胸交感神经干切断术治疗手汗症疗效及术后代偿性多汗的比较(附1040例报告)

目的比较胸腔镜下不同节段胸交感神经干切断术治疗手汗症的疗效和术后代偿性多汗的差异。方法本院自1995年7月至2011年12月,收治的原发性手汗症患者共1040例。依据切断胸交感神经节段的不同分为两组比较分析。A组(不保留T2神经节段)503例,B组(保留T2神经节段)537例。对上述两组病例进行随访观察,评定与比较两组之间的疗效以及代偿性多汗的发生情况。结果 1040例患者随访到834例,随访率80.2%。到访两组手术成功率均为100%,术中、术后无严重并发症发生,术后12个月内两组代偿性多汗总体发生率37.8%(315/834)。两组代偿性多汗和重度代偿性多汗发生率的差异均有统计学意义(P<0.01或<0.05)。结论与经典的A组(不保留T2神经节段)胸交感神经干切断术相比,B组(保留T2神经节段)T3或T4胸交感神经干+旁路切断术式疗效确切,且能明显减少代偿性多汗的发生率,是一种较为合理的术式。

巨大心脏瓣膜替换术围手术期处理

为提高巨大心脏（ＣＴＲ＞０．７０）瓣膜替换术的手术疗效，作者回顾性分析了３３例病人的围手术期治疗经验及随访结果。３３例病人中，心功能Ⅲ级２２例，Ⅳ级１１例。其中属心源性恶液质７例，巨大左室（ＥＤＤ＞７０ｍｍ）１１例。手术方式：二尖瓣替换术（ＭＶＲ）１７例，主动脉瓣替换术（ＡＶＲ）３例，ＡＶＲ＋ＭＶＲ１３例，并行三尖瓣成形术１１例。术后早期死亡２例（６．１％），长期生存的３１例中，心功能Ⅰ级１３例，Ⅱ级１７例，Ⅲ１例，晚期死亡１例（车祸）。我们体会术前积极改善心脏功能，术中加强心肌保护并注意保留二尖瓣后瓣健索，术后加强对心、肺、肝等重要脏器功能的保护，是提高手术疗效的重要措施。

电视胸腔镜下胸交感神经切除治疗手汗症

手汗症行部分胸交感神经链切除能获痊愈,但需行两侧剖胸术,创伤大,病人往往不愿接受。电视胸腔镜外科(VATS)可不剖胸完成部分胸交感神经链切除术。我科自1995年7月起采用VATS部分胸交感神经切除术27例,并对手术径路及操作技术作了改进,取得满意效果,现报道如下。

脂肪源性干细胞输注剂量对抑制大鼠心脏移植急性排斥反应的影响

目的观察供体同系脂肪源性干细胞(ADSCs)对大鼠心脏移植急性排斥反应的抑制作用,并探讨其输注剂量对其抑制作用的影响。方法以Wistar、SD大鼠为供受体建立心脏颈部异位移植模型,术毕静脉输注不同剂量ADSCs。实验分组:(1)对照组,注射等体积3ml 0.9%Na Cl;(2)输注ADSCs,0.1×10~6/只组;(3)输注ADSCs,1×10~6/只组;(4)输注ADSCs,10×10~6/只组;每组12只。比较各组移植心脏存活时间和组织病理学改变,及检测血清中IL-2和IL-10的表达。结果对照组移植心脏平均存活6.2±1.2天,输注不同剂量ADSCs(0.1×10~6/只,1×10~6/只,10×10~6/只)各组移植心脏平均存活分别为10.0±1.3天,13.3±2.2天,21.0±4.9天。与对照组比较,输注各组移植心脏存活均得到显著延长(P<0.05)。病理学检查发现ADSCs输注组淋巴细胞浸润、心肌间质水肿、心肌细胞损害均较对照组减轻。与对照组比较,ADSCs输注组大鼠血清中IL-2浓度随着ADSCs浓度增加而逐步降低,且ADSCs 10×10~6/只组差异有统计学意义(P=0.021);IL-10浓度呈剂量相关性逐渐增高,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论静脉输注供体同系ADSCs,可以延长大鼠颈部移植心脏的存活时间,减轻急性排斥反应的程度,并具有一定剂量依懒性;其中以10×10~6/只剂量的抗排斥作用最显著。