抑制RAB27a能够抑制三阴乳腺癌细胞的增殖、侵袭和粘附

目的抑制在外泌体分泌过程中发挥核心作用的RAB27蛋白家族的表达,以探究其对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞生物学功能的影响。方法利用荧光定量PCR和蛋白印迹法对比3株三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MDA-MB-468、Hs578T和正常乳腺上皮细胞系MCF10A的RAB27家族基因和蛋白表达以及外泌体的分泌情况;使用siRNA干扰技术分别抑制3株三阴性乳腺癌细胞中RAB27a和RAB27b的表达,并采用荧光定量PCR和蛋白印迹法检测抑制效率,随后使用蛋白印迹法检测这3株三阴性乳腺癌细胞RAB27a和RAB27b分别被抑制后外泌体的分泌情况。用细胞增殖、细胞侵袭和细胞粘附实验评价RAB27a和RAB27b分别被抑制后对这3株三阴性乳腺癌细胞生物学功能造成的影响。结果三阴性乳腺癌细胞和正常乳腺上皮细胞相比外泌体分泌更加旺盛(P<0.001),并且RAB27a和RAB27b的表达在基因和蛋白水平上均显著上升(P<0.01)。分别抑制3株三阴性乳腺癌细胞RAB27a的表达后,外泌体分泌显著下调(P<0.001),抑制RAB27b的表达对外泌体分泌无显著影响。并且外泌体分泌显著下调后,与外泌体分泌未受到显著影响的三阴性乳腺癌细胞相比,癌细胞增殖能力、细胞侵袭能力和细胞粘附能力均显著下调(P<0.01)。结论在三阴性乳腺癌细胞外泌体分泌过程中起核心作用的是RAB27a,抑制RAB27a能够抑制三阴性乳腺癌细胞的增殖、侵袭和粘附。

探讨Rab27蛋白家族在三阴性乳腺癌细胞耐药机制中的作用

背景三阴性乳腺癌由于分子表达模式的原因只能使用化疗和免疫治疗,但许多患者因为多药耐药的出现导致化疗失败。Rab27家族与外泌体的释放密切相关,目前已知大部分增强化疗药物外排的机制均由外泌体介导,但该家族两个成员Rab27a和Rab27b在三阴性乳腺癌细胞多药耐药过程中的具体作用尚不明确。目的本研究通过抑制Rab27蛋白家族的表达,探究其在三阴性乳腺癌细胞耐药过程中发挥的具体作用及分子机制。方法采用siRNA抑制三阴性乳腺癌细胞中Rab27a和Rab27b的表达后,蛋白印迹法检测外泌体的分泌情况。检测Rab27a和Rab27b分别被抑制后在不同浓度顺铂、阿霉素和紫杉醇处理下的细胞活力,随后分别检测三种药物处理下抑制Rab27家族后肿瘤细胞的凋亡与坏死情况。最后检测分别抑制Rab27a和Rab27b的三阴性乳腺癌细胞耐药相关基因的表达情况。结果抑制三阴性乳腺癌细胞Rab27a的表达后,外泌体分泌显著下调,抑制Rab27b的表达对外泌体分泌无显著影响。抑制Rab27a和抑制Rab27b均会降低三阴性乳腺癌细胞对顺铂、阿霉素和紫杉醇的耐受程度,提高肿瘤细胞在这几种药物处理下的细胞凋亡率,降低耐药相关基因IL-6、EGR1、ABCC3和ABCC6的表达,抑制Rab27b对肿瘤细胞耐药产生的影响明显强于抑制Rab27a。结论 Rab27家族与三阴性乳腺癌细胞耐药密切相关,Rab27a可能通过直接影响外泌体的分泌参与耐药机制。Rab27b与Rab27a的分子机制不同,它可能通过调控其他耐药相关基因的表达从而参与三阴性乳腺癌细胞的耐药机制。

从高考历史思考历史教学

2015年的高考,其历史试卷留给人们的思考是不尽的。传统的历史教学与新课程改革意义上的历史教学是否就是完全意义上的抵触,又有无其完美的切合点。相关的问题,作为一线教师思考得比较多,当然也思考出不少指导今后课程教学的比较切合实际的命题。

依托情境创设提升历史课堂实效

历史情境教学法即从历史教学的实际需要出发,设置符合中学生实际心理需求的历史情境,激发学生学习历史的兴趣和求知欲,增强学生自我态度体验,做到认知活动和情感活动的统一,在积极主动参与中逐渐形成历史学科核心素养,并实现学生历史学习过程的身心愉悦、心理机能全面和谐发展的有效教学模式。教师通过这种教学设计的优化,教学方法的改良,能够提高历史课堂实效。