陕西秦巴山区林业生态综合治理模式研究

分析了秦巴山区特异的生态环境和现今林业发展面临的主要问题,提出了一些旨在改善当地生态环境的模式,并比较了相关模式的推广区域和生态效益,提出了以农林复合模式、建设经济型防护林、高山水源涵养林为主的多种模式综合治理的思路。

MicroRNA对基因表达调控的研究进展

MicroRNA（miRNA）是一类长约21～25nt的内源性单链小分子RNA（small RNA），可调节与其序列互补mRNA的表达，普遍存在于高等生物界，在不同物种间具有高度的保守性，表达具有细胞特异性或组织特异性。通过与mRNAs特异性的碱基配对，引导靶序列进入降解或（和）翻译抑制，以此参与个体发育、细胞分化、细胞增殖、物种进化以及疾病发生过程中的基因表达调控。该文简述了近年对miRNA的形成、功能、作用机制等研究的新进展，并对其在基因沉默中的作用作了重点概述。

牛的3种单个早期胚胎中基因表达的差异

为建立哺乳动物单个早期胚胎中基因表达的分析方法,解决胚胎实验中取材困难的矛盾,本研究以牛体内受精胚(invivo cultured,IVC)、体外受精(in vitro fertilization,IVF)和体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT)3种来源的7日龄囊胚作实验材料,通过单个胚胎直接裂解后进行逆转录结合随机引物指数扩增的方法富集相应cDNA。对克隆囊胚cDNA库中随机挑选的15个阳性克隆进行测序和EST分析。并运用特异性的引物,对哺乳动物胚胎发育的3个重要基因Nanog,Oct-4和Sox2的表达进行了扩增和表达检测。结果表明,在哺乳动物胚胎囊胚阶段,这3个维持细胞多能性的相关基因的表达都相当活跃;相对于体内胚和体外受精胚,克隆胚中这3种基因的表达明显偏低。本方法为牛植入前胚胎发育阶段特异性基因的筛选和基因表达模式的研究提供了有效的材料和技术途径。

不同培养基对杜仲愈伤组织诱导和生长的影响

以MS、LS、B5、N6、H、Nitsch、White、WPM为基本培养基,分别添加1.0mg/LNAA+0.3mg/LBA,进行不同培养基对杜仲嫩茎及幼叶愈伤组织诱导的研究;以MS、LS、B5、N6、H、Nitsch、White、1/2MS为基本培养基,分别添加0.5mg/LNAA+0.5mg/LBA,进行不同培养基对杜仲嫩茎及幼叶愈伤组织继代培养的研究。结果表明,MS培养基有利于杜仲幼茎愈伤组织的诱导,而B5培养基不仅对叶的愈伤组织诱导有利,对茎和叶愈伤组织的继代培养也是最理想的。

应用生物信息学寻找山羊新的microRNA分子及其实验验证

microRNA(miRNA)是一类长约22个碱基的非编码RNA分子,在转录后水平调节基因的表达及其在细胞的增殖、分化、凋亡等过程中起着重要的调控作用。根据miRNA分子具有一定的保守性,文章将人、小鼠、牛、猪和狗5种哺乳动物已知的miRNA分子与NCBI公布的与山羊具有极高同源性的绵羊基因组序列对比,获得11条miRNA候选分子,然后通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)验证,发现在山羊脑组织中这11条分子均有表达,肝脏组织中有5条分子表达,初步确定为山羊新的miRNA分子,为寻找山羊miRNA提供了新的思路。

不同亚种牛卵母细胞克隆效率和胚胎移植效果分析

在体细胞核移植(克隆)试验中,作为受体细胞的卵母细胞是制约克隆效率的重要因素之一。本文通过对鲁西黄牛和荷斯坦奶牛进行活体取卵(OPU)试验,并以两个不同亚种的卵母细胞分别作为受体细胞进行奶牛体细胞克隆和胚胎移植试验,经卵母细胞克隆效率和胚胎移植效果分析,探讨以鲁西黄牛代替荷斯坦奶牛作为卵母细胞的供体的可行性。结果显示,夏季鲁西黄牛OPU的效果更好,用鲁西黄牛卵母细胞构建的重构胚的融合率显著高于荷斯坦奶牛;鲁西黄牛卵母细胞形成的克隆胚移植后,其妊娠率、产犊率和活产率与荷斯坦奶牛相当;采用不同亚种克隆胚和不同类型受体牛互相组合进行胚胎移植,结果表明亚种内移植组妊娠率明显高于亚种间移植组,而且亚种内移植组非妊娠牛的返情时间也明显推后。以上结果说明,鲁西黄牛可以代替荷斯坦奶牛作为卵母细胞的供体和胚胎移植受体牛;不同亚种受体牛与克隆胚的适当组合可以显著提高胚胎移植的效果。本研究为以后开展不同亚种间克隆提供了可行性参考。

环糊精及其衍生物在药学应用中的安全性综述

环糊精(CD)是由6~8个D-吡喃葡萄糖单元通过α-1,4-糖苷键聚合而成的环状低聚糖化物.改性环糊精具有低毒、易修饰等优良性质,并可通过与药物分子形成包合物而提高药物的溶解性、稳定性、安全性和生物利用度等.改性环糊精不仅能够以其本身或修饰CD的形式充当载体,还可通过聚轮烷、阳离子聚合物或纳米粒等形式构建有效的药物载体.作为一种新型的药物赋形剂,改性环糊精广泛应用于口服、静脉注射和皮下给药等多种药物剂型,因此,其在人体内代谢及生物安全性等方面仍需要进一步研究.本文综述了改性环糊精类药物的结构特点、应用领域、吸收代谢以及毒理学性质的研究进展,并对市场上具有代表性的两种CD药物的安全性进行了初步归纳分析,提出了改性环糊精类物质研究的重点与发展方向.

贵州龙宫风景名胜区水溶洞环境变化特征与预测研究

对比研究了贵州龙宫风景区1996年和2011年15年前后客流量、温度、湿度和CO2浓度等有关数据,分析其环境变化特征,揭示影响因素,预测其发展趋势。结果表明:(1)洞内CO2浓度比洞外高,洞深越深CO2浓度越高,2011年CO2浓度比1996年显著增大,总体说明游客数量对CO2浓度影响很大;(2)游客数量每增加1万人,则CO2浓度增加0.002%,年增加约0.0046%;大约经过13.5～18a,当年游客量达到135万人时,龙宫CO2浓度将超过CO2卫生二级标准;(3)各监测点各时段温度差异主要表现在洞外,洞内各监测点的各个时段基本无差异;(4)各监测点不同时段湿度无明显变化,仅存在洞内与洞外的差异。

利用RNA干扰技术抑制小鼠羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶基因的表达

目的为了探寻一种更有效的家族性高胆固醇血症(FH)基因治疗新途径,通过慢病毒介导RNA干扰的方法在H22细胞系及C57BL/6J纯系小鼠中抑制内源性羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CoAR)基因表达进行研究。方法从HMG-CoAR基因序列中选择三段作为靶序列(T1、T2和T3),并构建重组慢病毒RNAi载体;经体外包装后,分别感染H22细胞系及注射小鼠。通过qRT-PCR检测HMG-CoAR mRNA丰度;利用WesternBlot、ELISA方法分析HMG-CoAR的表达水平。结果与空载体对照相比,三个实验组中稳定转染细胞的HMG-CoAR表达水平显著降低(P<0.05),同时感染5天后小鼠的肝脏HMG-CoAR mRNA水平、蛋白含量以及血浆中HMG-CoAR表达均显著降低(P<0.05),其中T3位点的抑制效率最高,是空质粒对照的1/3。另外,对三个载体的持续性抑制能力分析显示,在处理后的至少50天内,三个实验组小鼠中HMG-CoAR表达量均有效地被抑制,其中T1靶点的抑制效果最为稳定,而T3靶点的波动最大,但抑制效率一直最高。结论三个重组慢病毒RNAi载体均可显著抑制内源性HMG-CoAR表达,可为下一步试图通过下调HMG-CoAR表达的方式,降低FH患者体内胆固醇水平的FH基因治疗奠定基础。

LDLR^(-/-)小鼠中脂代谢相关基因的表达

目的分析LDLR基因敲除小鼠体内脂代谢相关基因ApoB100、PPARα、LXRα以及ABCA1与野生型相比表达水平的差异情况。方法应用多重PCR的方法对LDLR-/-小鼠基因型进行鉴定;接着分别对LDLR-/-小鼠和野生型小鼠脂代谢相关基因的mRNA相对丰度以及蛋白表达水平进行qRT-PCR、ELISA分析。结果与野生型相比,LDLR-/-小鼠中ApoB100、PPARα的mRNA及蛋白表达均上调(P<0.05);ABCA1的表达水平下降(P<0.01),蛋白水平上的下降幅度更为明显;而LXRα不管在mRNA或蛋白水平上均检测不到差异表达。结论 LDLR基因功能的缺失对不同的脂类代谢相关基因的表达产生不同的影响。本研究有助于人们进一步了解家族性高胆固醇血症的发病机制,同时也为药物设计中靶位点的选择提供参考价值。

谈预拌混凝土的质量控制

本文从原材料、配合比、施工以及后期养护等几个方面总结预拌混凝土质量控制应注意的一些问题，并根据一些实践经验进行了简要的分析。

新型Y型聚乙二醇-尿酸氧化酶修饰物的制备及免疫原性和生物活性评价

目的制备一种新型支链(Y型)聚乙二醇(Y-shape polyethylene glycol,PEG)修饰的尿酸氧化酶,并对该修饰酶的体外酶活性和稳定性,在大鼠体内药效学、药动学和免疫原性进行评估,为其临床研究给药方案的设计和优化提供依据。方法运用凝胶电泳、高效液相色谱技术研究聚乙二醇修饰产物的理化特征,采用酶反应-紫外分光光度法对酶生物活性进行检测,结合ELISA方法分析修饰酶的免疫原性。以大鼠为模型,研究不同聚乙二醇修饰的尿酸氧化酶在体内的药动学。结果 Y型聚乙二醇尿酸氧化酶修饰物rUOX-mPEG2的表观相对分子质量比线性聚乙二醇修饰的产物rUOX-mPEG更大,聚乙二醇分子的修饰度更高,在相同温度和pH条件下的活性明显高于直链型聚乙二醇尿酸氧化酶修饰物。动物实验表明,该聚乙二醇-尿酸氧化酶修饰物在体内呈现良好的动力学特征,并在体内具有更长的药效维持时间。免疫原性实验结果也表明,Y型聚乙二醇修饰能有效降低免疫原性。结论 Y型聚乙二醇修饰尿酸氧化酶的酶学性质明显优于重组酶和直链型修饰的尿酸氧化酶,药效维持时间显著高于后者,免疫原性和国外品种采用的直链修饰尿酸氧化酶相当,且明显低于重组酶,在大鼠体内呈线性动力学特征。

小针刀筋膜切开法治疗腰肌劳损70例临床分析

对于腰肌劳损的治疗,临床中通常采用小针刀筋膜切开的方法进行治疗,本文旨在探讨该种治疗方法的临床应用效果。方法:选取我院的70例患者作为研究对象,将患者分成两个不同组别,采用不同治疗方法,对比两组患者获取的治疗效果。结果:在腰部活动情况与临床治疗效果上,观察组明显更优(P<0.05)。结论:针对腰肌劳损患者采用小针刀筋膜切开法进行治疗,可以使患者获取更加良好腰部活动情况,提高临床治疗有效率,具有一定的临床推广价值。