分支杆菌分泌蛋白研究进展

对近年来分支杆菌分泌蛋白研究进展进行了简要综述。利用杂交技术将牛分支杆菌基因组和结核分支杆菌复合物基因组相比较,显示在牛分支杆菌基因组中共有11处基因缺失;早期滤液成分是分支杆菌在生长期间分泌的相关蛋白群,目前的研究倾向于将存在于结核分支杆菌培养滤液中的蛋白分为3个主要的群。结核分支杆菌全基因组测序的完成,使得分支杆菌分泌蛋白质研究从分离鉴定到功能研究都有了很大的进步。相信随着研究的深入,更多的分泌蛋白质将被发现。

应用基因分型技术研究牛结核分枝杆菌分子流行病学(英文)

牛分枝杆菌是引起牛结核病(bTB)的病原体,侵染宿主广泛,可感染多种家畜和野生动物,对人类和动物健康构成巨大危害。随着多年不懈的研究,有关分枝杆菌分子流行病学的知识积累不断增加。作者对近年来应用新的基因分型技术研究牛结核分枝杆菌分子流行病学方面的一些研究进展。这些技术包限制性片段长度多态性分析(RFLP)、PCR介导的间隔区寡核苷酸分析(spoligotyping)、数目可变串联重复位点(VNTR)等。主要用于对人、牛、家畜以及野生动物的结核病分子流行病学进行分析和监测。另外,还利用一系列敏感的基于PCR的技术从分枝杆菌杆菌复合体(NTM)中对菌型进行鉴别。对分枝杆菌感染分子流行病学的全面了解,有助于对本病扩散传播机制的深入研究。可为制定科学防治结核病的措施做出贡献。

猪传染性胃肠炎病毒呼吸道途径侵染后在体内的动态分布

应用猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)分别对25日龄和40日龄的SPF仔猪进行气管内注射攻毒。攻毒后每24h致死1头仔猪,用免疫荧光染色检测各脏器内病毒的消长情况,并采血检测抗体。结果,在25日龄的仔猪中,仅3头出现腹泻症状,且很快耐过;剖检可见不同程度的肺部病理变化;攻毒后24h气管和肺脏样品的IFA呈阳性,抗体效价随着时间的延长而增高。40日龄仔猪临床表现和剖检变化基本正常。所有的胃肠道样品的IFA均为阴性。结论气管内注射后,TGEV可在呼吸系统中增殖,但未能在消化道系统中检出。

血卟啉衍生物的抗菌活性研究

目的研究不同浓度血卟啉衍生物(HpD)对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的光动力杀伤作用。方法配制不同浓度HpD,分别加入大肠杆菌和金黄色葡萄球菌悬液中,分别用400nm波长光照强度20J/cm2激光照射后,将菌液涂布于LB固体培养基上,进行菌落计数。结果 HpD光动力作用对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制效果与HpD浓度呈现剂量依赖关系,当光照强度为20J/cm2时,40μg/mlHpD浓度作用下,大肠杆菌的灭活率为81.4%,金黄色葡萄球菌的灭活率为93.69%。结论在400nm波长激光照射下,HpD对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制作用,且对金黄色葡萄球菌的抑制效果均优于比大肠杆菌。

涤纶/左旋聚乳酸静电纺人造小血管的性能

背景:小口径人造血管常用生物材料左旋聚乳酸,在体内的降解速率不能与损伤缺失小血管的组织细胞修复速率相匹配,且绝对力学强度不够高,不能满足病变血管的修复要求。目的:观察不同质量混纺比的涤纶/左旋聚乳酸静电纺人造小血管生物力学性能及生物相容性。方法:将涤纶和左旋聚乳酸在质量配比为10∶0,7∶3,5∶5,3∶7,0∶10条件下,通过双头静电纺丝制备纳米纤维人造小血管。结果与结论:涤纶/左旋聚乳酸静电纺混纺结构在纳米级条件下,涤纶与左旋聚乳酸不会发生化学反应,维持各自特性,其力学性能较纯左旋聚乳酸有较大改善,且具备孔隙率高,透水率低的特点,既利于细胞生长,又不会导致液体大量渗透。质量混纺比为5∶5时制备的涤纶和左旋聚乳酸人造血管各方面性能较优,其生物相容性可通过调节工艺参数细化纤维来改善。

牛分枝杆菌Mb2277蛋白的表达及其反应原性初步研究

目的构建牛分枝杆菌Mb2277基因的原核表达载体,获得高纯度的融合表达蛋白,并对其表达产物的免疫原性进行初步研究。方法根据GenBank提供的M.bovisMb2277基因序列设计引物。以牛分枝杆菌(93006)DNA为模板,通过PCR方法扩增出Mb2277基因片段,以BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切PCR产物和pET28a(+),后将纯化的Mb2277基因克隆至pET28a(+)中,构建出原核表达质粒,再转化到E.coliBL21(DE3)表达菌株中,IPTG诱导后,收集菌体进行SDS-PAGE,进一步利用Western Blot对表达产物的反应原性进行研究。结果获得了牛结核分枝杆菌Mb2277原核表达质粒,IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析可见约25ku蛋白表达条带,Western Blot结果显示,表达产物与兔抗分枝杆菌抗体具有反应性。结论该蛋白具有较强的反应原性。

牛分枝杆菌Mb1761c蛋白的表达及其免疫原性初步研究

根据GenBank提供的M.bovis Mb1761c基因序列设计引物。以牛分枝杆菌DNA为模板,通过PCR方法扩增出牛分枝杆菌MB1761c基因片段,以BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切PCR产物和pET28a(+)后将纯化的Mb1761c基因克隆至pET28a(+)中,构建出原核表达质粒,再转化到E.coli BL21(DE3)表达菌株中,IPTG诱导后,收集菌体进行SDS-PAGE,分析可见约29ku特异性蛋白条带,Western blot分析发现,该融合蛋白具有较强的免疫原性,从而为进一步研究其亚单位疫苗及DNA疫苗奠定了基础。

基于网络药理学探讨黄芪改善原发性肌肉减少症的作用机制

目的原发性肌肉减少症,是一种与年龄相关的骨骼肌疾病。本文旨在探讨黄芪对原发性肌肉减少症的有效活性成分和治疗靶点。方法本研究采用网络药理学方法探究黄芪治疗肌肉减少症的作用机制。首先,在中药系统药理学数据库(TCMSP)和蛋白质数据库(Uniprot)中,筛选黄芪的有效活性成分及其对应基因靶点。接着,通过GeneCard、OMIM、PharmGkb、TTD这4个数据库,收集原发性肌肉减少症相关的基因靶点。然后,将药物基因靶点和疾病相关基因取交集,以构建黄芪-有效成分-肌少症-靶基因调控网络。在String平台绘制交集基因靶点的蛋白互作(Protein-protein interaction,PPI)关系图,通过基因本体(Gene ontology,GO)富集分析黄芪-原发性肌肉减少症交集靶点的特征生物学性质,并进行京都基因和基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路分析。结果从数据库中获得黄芪的20个有效活性成分,181个黄芪作用靶点,498个原发性肌肉减少症相关基因靶点,取交集后共获得16个关键靶点,对这16个靶点进行GO和KEGG通路富集分析发现,黄芪可能通过抗氧化、抗炎和调节免疫功能,以介导细胞对氧化应激的反应、细胞对化学应激的反应等信号通路发挥治疗作用。结论黄芪可能通过其多种有效成分作用于多个基因靶点,从而改善老年性肌肉减少症的症状。这为黄芪在临床治疗老年性肌肉减少症中的应用提供了理论支持。

一种具降压活性的新型血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂研究

目的:对一种新型的血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(R1)进行降压活性评价。方法:采用125I标记血管紧张素Ⅱ进行受体结合试验来检测化合物对血管紧张素Ⅱ受体的亲和力;采用无创尾动脉测压法检测R1在自发性高血压大鼠体内的降压活性。结果:受试化合物R1对血管紧张素Ⅱ具有很高的亲和性,其IC50值为1.17±0.32n M,在动物体内显示出高效、长效的降压活性,最大降压值达到43.22±6.86mm Hg。

一种沙坦类降压新化合物的药理活性研究

目的对一种新型的血管紧张素II受体拮抗剂进行降压活性评价。方法采用放射性受体结合试验研究化合物对血管紧张素II受体的亲和性;采用无创尾动脉测压法进行动物体内降压活性研究。结果受试化合物对血管紧张素II具有很好的亲和性,其IC50值为3.55±0.11 n M,在动物体内显示出高效、长效的降压活性,最大降压值超过40 mm Hg。

一种卟啉衍生物光动力治疗肿瘤的初步研究

该文对一种卟啉衍生物(Hp D-TM)作为光动力抗肿瘤药物进行初步研究,为光动力治疗肿瘤寻找理想的光敏剂。在体外,通过MTT实验对Hp D-TM对大鼠脑胶质瘤C6细胞的暗毒性和光毒性进行了评价。在体内,通过在昆明小鼠皮下接种大鼠脑胶质瘤C6细胞,建立移植肿瘤模型,Hp D-TM的剂量是10 mg/kg,采用尾静脉注射,再以波长635 nm的He-Ne激光照射肿瘤局部,观察光动力治疗后肿瘤的生长速度和形态变化,并测定肿瘤大小。在体外,Hp D-TM能有效地抑制C6的生长。在体内,接受Hp D-TM光动力治疗的肿瘤生长速度明显减慢,肿瘤体积显著变小。研究表明卟啉类衍生物Hp D-TM用于PDT能有效地抑制肿瘤,有成为新型光动力抗肿瘤药物的潜能。

二氢卟吩衍生物对膀胱癌的治疗作用研究

在光动力学疗法(PDT)中,二氢卟吩及其衍生物作为光敏剂在抗肿瘤、抗病原微生物以及抗类风湿性关节炎等方面均具有良好的生物活性,现已成为光敏剂开发研究的一个重要领域。本文通过对二氢卟吩衍生物MMPP的紫外及荧光吸收光谱来研究其光谱特性,并在细胞水平上初步研究了化合物对膀胱癌的治疗作用。研究结果表明,该化合物对膀胱癌细胞(T24)具有较强的杀伤作用。

一种叶绿素衍生物的光动力抗肿瘤活性研究

本文对一种叶绿素衍生物(CHDM)作为光动力抗肿瘤药物进行初步研究,为光动力治疗肿瘤寻找理想的光敏剂。通过MTT实验对CHDM对人胆管癌QBC-939细胞的暗毒性和光毒性进行了评价。在体内,通过接种人胆管癌QBC-939细胞于裸小鼠皮下,建立移植肿瘤模型,CHDM以5 mg/kg的剂量,采用尾静脉注射,再以波长650 nm的He-Ne激光照射肿瘤局部,观察光动力治疗后肿瘤的生长速度和形态变化,并测定肿瘤大小。在体外,CHDM具有极低的暗毒性,在光照条件下能有效地抑制QBC-939细胞生长,且光动力效应具有药物浓度和光照剂量依赖性。在体内,接受CHDM光动力治疗的肿瘤生长速度明显减慢,肿瘤体积显著变小。实验研究显示CHDM有望成为新型光动力抗肿瘤药物,值得进一步研究。

光动力新药帕利泊芬研究进展

光动力疗法被广泛用于肿瘤临床治疗,应用前景广阔。近年来的研究表明帕利泊芬是一种水溶性良好的血管靶向光敏剂,静脉给药后可选择性地聚集于肿瘤细胞内,在光激活下释放大量活性氧,从而发挥抗肿瘤疗效。该药已在欧洲获准上市,用于前列腺癌的治疗。主要介绍帕利泊芬的发现历程与合成路线、药理作用以及临床研究进展,旨在为肿瘤光动力疗法的进一步探索提供参考。