UPLC指纹图谱结合化学模式识别评价不同产地五灵脂药材质量

目的:建立五灵脂药材的超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱,结合化学模式识别法评价不同产地五灵脂药材质量。方法:采用UPLC建立指纹图谱,色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3(150 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),检测波长为265 nm,流速为0.25 mL·min^(-1),柱温为30℃,进样量为1.0μL。结合相似度评价、聚类热图分析及正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)综合评价不同产地五灵脂药材质量。结果:建立的五灵脂药材UPLC指纹图谱共标定14个共有峰,指认出其中6个成分,分别为原儿茶酸、4-羟基苯甲酸、苯甲酸、槲皮苷、穗花杉双黄酮、扁柏双黄酮;22批五灵脂药材相似度为0.870~0.998;聚类热图分析将22批五灵脂药材分为两类,陕西省商洛市所产五灵脂可与其他产区样品完全区分;OPLS-DA共筛选出7个质量差异标志性成分。结论:建立的五灵脂药材UPLC指纹图谱及其化学模式识别方法稳定可行,可为五灵脂药材质量研究提供参考。

一测多评法同时测定丹参配方颗粒中7个酚酸类成分

目的建立一测多评法测定丹参配方颗粒中丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、丹酚酸E、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B的含量,验证其准确性及可行性。方法采用HPLC法,色谱柱为Waters Xselect HSS T3(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱;流速为1.2 mL·min^(-1);检测波长为286 nm。以原儿茶醛为内参物,计算其他6个成分的相对校正因子。同时采用外标法和一测多评法测定丹参配方颗粒中7个酚酸类成分的含量,比较两种方法的测定结果是否存在差异。结果丹参素、咖啡酸、丹酚酸E、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸B在各自质量浓度范围内与峰面积线性关系良好(r>0.999);相对校正因子分别为7.36、1.18、2.82、1.99、2.82、3.31。一测多评法与外标法测得12批样品中7个酚酸类成分的含量结果无显著差异,丹参素、咖啡酸、丹酚酸E、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B相对误差分别在0.43%~0.53%、0.00%~3.70%、0.00%~0.34%、1.71%~2.01%、2.53%~2.93%、1.69%~1.73%。结论建立的一测多评法测定丹参配方颗粒中7个酚酸类成分简便稳定,可用于丹参配方颗粒的定量分析及质量控制。

不同炮制时间地榆炭化学成分与粉末色度值的相关性分析

目的分析地榆炭炮制过程中饮片粉末色度值与化学成分的关联性。方法采用高效液相色谱法,建立地榆及不同炮制时间地榆炭饮片的特征图谱,采用分光测色仪测定地榆及不同炮制时间地榆炭饮片粉末的色度值[明暗度值(L^(*))、红绿色度值(a^(*))、黄蓝色度值(b^(*))、总色度值(E^(*)ab)],分析外观色泽指标与特征图谱的相关性。结果随着炮制时间的延长,地榆炭较地榆饮片特征图谱的相似度呈降低趋势;L^(*)、a^(*)、b^(*)、E^(*)ab呈减小趋势;HPLC特征图谱13个特征峰中峰5~10、12(阿魏酸)7个色谱峰单位峰面积逐渐减小,均与色度值L^(*)、b^(*)、E^(*)ab成显著正相关;峰2、3、11、13(鞣花酸)单位峰面积先增大后减小,除峰2外,单位峰面积均与色度值L^(*)、b^(*)、E^(*)ab成显著负相关;逐步回归分析结果显示,可通过色度值预测峰3、5~10、12(阿魏酸)、13(鞣花酸)9个色谱峰单位峰面积大小;聚类分析将16个样品分为2类;正交偏最小二乘法判别分析筛选出3个VIP值大于1的差异性成分。结论地榆炭饮片粉末的色度值与其化学成分的含量变化具有相关性,可作为地榆炭炮制过程中监测饮片质量的依据,以提高地榆炭饮片的质量水平及一致性,建议地榆炭饮片炮制终点为6~8 min(260~280℃)。

一测多评法同时测定淡豆豉配方颗粒中6种异黄酮含量

建立超高效液相一测多评法(UPLC-QAMS)同时测定淡豆豉配方颗粒中大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素、染料木素的含量,验证其准确性及适用性。采用UPLC法,色谱柱为Waters CORTECS UPLC T3(2.1 mm×100 mm,1.6μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;流速为0.3 m L/min;柱温为30℃;检测波长为260 nm。以染料木苷为内参物,建立该成分与其他5个成分的相对校正因子,利用相对校正因子计算各成分的含量,同时对一测多评法的计算值和外标法的实测值进行比较。结果表明,相对校正因子的耐用性良好,一测多评法与外标法测得11批样品中异黄酮成分的含量结果无显著性差异。所建立的一测多评法简便稳定,结果准确,适用于淡豆豉配方颗粒的定量分析及质量控制。

熵权TOPSIS法结合多指标成分综合评价金钱草药材的质量

目的:建立金钱草药材的超高效液相色谱(UPLC)特征指纹图谱,同时测定其中3种有效成分的含量,并综合评价不同产地金钱草的整体质量。方法:采用UPLC法建立10批金钱草全草、茎及叶的特征指纹图谱并测定山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰素的含量。色谱柱为Waters CORTECS UPLC T3,流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液(梯度洗脱),检测波长为364 nm,柱温为30℃,流速为0.2 mL/min,进样量为1μL。采用《中药色谱特征图谱相似度评价系统(2012版)》进行相似度评价,确定共有峰;以山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰素、总灰分、酸不溶性灰分、二氧化硫残留量及醇溶性浸出物为指标,采用熵权优劣解距离法(TOPSIS)对金钱草药材的整体质量进行综合评价。结果:10批金钱草全草、茎及叶共有7个共有峰,指认了其中3个峰分别为山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰素。同一部位不同批次金钱草全草的相似度均不低于0.830;同一批次金钱草茎与叶的相似度为0.504~0.859,全草与茎的相似度为0.593~0.904,全草与叶的相似度为0.885~0.995。山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰素检测质量浓度的线性范围分别为0.3920~39.1970、0.3970~39.7034、0.3809~38.0930μg/mL(r均大于0.9990);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2%;加样回收率分别为96.43%(RSD=0.63%,n=9)、100.32%(RSD=0.46%,n=9)、101.80%(RSD=0.32%,n=9)。金钱草中上述3种成分的含量分别为0.0063%~0.0411%、0.0029%~0.0086%、0.0044%~0.0175%(茎),0.0248%~0.2905%、0.0009%~0.0090%、0.0013%~0.0124%(叶),0.0079%~0.1180%、0.0015%~0.0088%、0.0028%~0.0125%(全草)。不同产地样品间3种成分含量比较,差异均无统计学意义(P>0.05);金钱草不同部位中山柰酚-3-O-芸香糖的含量大小顺序依次为叶>全草>茎,槲皮素与山柰素的含量大多以茎中含量较高。熵权TOPSIS法结果显示,四川省中江县、双流县以及重庆市石柱县产金钱草的最优解欧氏贴近度均值分别为0.446、0.512、0.287。结论:所建特征指纹图谱和含量测定方法稳定、可行,结合熵权TOPSIS法所建的多指标评价模型可用于金钱草药材质量的综合评价;四川省产金钱草药材质量较优。

人参饮片、水煎液、配方颗粒的HPLC指纹图谱相关性研究

目的:建立人参饮片、水煎液及配方颗粒的HPLC指纹图谱,对其相关性进行评价。方法:采用HPLC法,色谱柱为XBridge BEH C_(18)柱(150 mm×3.0 mm,2.5μm),以乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速为0.45 ml·min^(-1),柱温为32℃,气体流速为3.0 L·min^(-1),漂移管温度为100℃。测定15批人参饮片、水煎液、配方颗粒的HPLC指纹图谱,利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012年版)进行相似度分析,并采用SPSS 20.0软件、SIMCA 14.1软件对指纹图谱信息进行皮尔逊相关性分析、聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)。结果:15批人参饮片、水煎液及配方颗粒HPLC指纹图谱均确定了9个共有峰,并指认1、2、3、4、8号峰分别为人参皂苷Rg_(1)、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rb_(1)和人参皂苷Rd。15批人参饮片、水煎液、配方颗粒的指纹图谱与相应对照指纹图谱的相似度均在0.95以上,三者对照指纹图谱的相似度均在0.98以上。CA和PCA结果表明人参水煎液和颗粒结果较接近。OPLS-DA发现4种成分是造成不同批次样品差异性的主要标志性成分。结论:建立的HPLC指纹图谱反映了人参饮片、水煎液及配方颗粒多成分的整体面貌,三者间的化学成分基本一致,可为人参配方颗粒质量控制提供借鉴。

广金钱草种子质量分级标准研究

目的:制定广金钱草种子质量分级标准。方法:参照《农作物种子质量检验规程》中的方法,测定24批广金钱草种子净度、千粒重、含水量、发芽率和生活力5项指标,用SPSS软件对数据进行聚类分析,确定广金钱草种子质量分级标准。结果:24批广金钱草种子质量参差不齐,各项指标差异显著,发芽率和生活力是广金钱草种子质量分级的主要指标,千粒重、净度和含水量则为参考指标,广金钱草种子被划分为3个等级,其中三级种子为不合格种子。结论:建立了广金钱草种子质量分级标准,为广金钱草种子质量控制提供了依据。

狗脊炮制工艺优选及色度值测定

目的优选熟狗脊、烫狗脊的炮制工艺,并测定色度值。方法采用HPLC法测定各炮制品原儿茶酸、原儿茶醛、5-羟甲基糠醛的含有量;采用综合评分法,以原儿茶酸、原儿茶醛含有量为指标优选炮制工艺;采用色差仪获取炮制品色度值(L、a、b),考察原儿茶酸、原儿茶醛、5-羟甲基糠醛含有量与色度值的相关性;按照优选的炮制工艺,获得基准炮制品,确定各炮制品与基准炮制品的最大色差值。结果最佳蒸制时间为6 h,最佳烫制时间为24 min;炮制过程中色度值的变化与含有量具有较强的相关性,熟狗脊、烫狗脊与各自基准炮制品最大色差值分别为3.6、4.1。结论该方法稳定可行,可用于狗脊炮制。

百合浸出物提取方法的优化及其质量标准研究

目的优化百合浸出物的提取方法并建立其质量标准。方法以百合浸出物量、王百合苷B质量分数、特征图谱共有峰总面积、过滤速率为综合评价指标,比较热浸法和冷浸法下不同提取溶剂的提取效果,通过加权计算综合评分,优选百合浸出物最佳提取工艺及质量标准。结果加权计算结果显示,热浸法优于冷浸法,以热浸法75%乙醇最优。对12批不同产地百合浸出物量、王百合苷B质量分数及浸出物特征图谱进行测定,拟定百合浸出物提取方法及质量标准为:热浸法下,以75%乙醇为溶剂,醇溶性浸出物不少于7.0%,浸出物中王百合苷B质量分数不低于1.471%。结论百合醇溶性浸出物提取方法及特征图谱的建立,简单可行,可快速对不同产地百合药材质量进行评价,为进一步完善百合浸出物质量标准提供参考依据。

响应面法结合熵权法优选麦门冬汤颗粒的干法制粒工艺

目的优选麦门冬汤颗粒的干法制粒工艺。方法以颗粒的一次成型率、吸湿率、溶化率和脆碎度为质量指标,通过熵权法确定各质量指标的权重系数,并计算综合评分。先用单因素试验筛选出最佳辅料种类及配比,再用Box-Behnken试验对干法制粒的压轮压力、送料频率和压轮频率进行优化,并对优选的工艺参数进行验证。结果优选的最佳辅料及配比为浸膏粉∶乳糖=1∶1,最佳干法制粒参数为压轮压力15.6 MPa,送料频率20 r·min^(-1),压轮频率3 r·min^(-1)。验证试验的综合评分分别为0.931、0.906、0.912,RSD为1.4%。结论优选的麦门冬汤颗粒干法制粒工艺稳定可行,颗粒质量属性较好,可为麦门冬汤颗粒的工业化生产提供参考。

一测多评法同时测定土茯苓配方颗粒中5种成分的含量

目的 建立一测多评法同时测定土茯苓配方颗粒中5种化学成分的质量分数。方法 采用UPLC法,以乙腈-0.2%乙酸溶液为流动相进行梯度洗脱;柱温为30℃;检测波长为291 nm;流速为0.4 mL/min。以落新妇苷为内标物,分别建立其与新落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷的相对校正因子和相对保留值,并计算各成分的质量分数,同时与外标法测定结果对比,验证所建立方法的可行性和准确性。结果 土茯苓配方颗粒中5种成分在各自规定的质量浓度范围内线性关系良好(r^(2)>0.999),平均加样回收率范围为93.44%~106.45%,RSD范围为0.96%~2.00%。新落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷的相对校正因子分别为0.988、0.869、0.965、0.946,相对保留时间分别为0.92、1.21、1.28、1.37,耐用性较好,4种成分的一测多评法与外标法测定结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论 建立的一测多评法准确稳定,可用于土茯苓配方颗粒中5种成分的含量测定。

基于UPLC特征图谱的辽藁本水提药渣利用价值研究

目的建立辽藁本药材UPLC特征图谱,比较分析辽藁本药材与水提后不同温度下干燥药渣的特征图谱差异性,为其水提药渣保存和二次利用提供参考依据。方法UPLC特征图谱采用YMC Triart-C18(2.1 mm×100 mm,1.9 m)色谱柱,以乙腈-0.1%乙酸为流动相,梯度洗脱,流速为0.35 mL/min,柱温为30℃,检测波长为254 nm。此外,采用不同温度对药渣进行干燥,测定其特征图谱并与原药材进行比较。结果建立了辽藁本药材UPLC特征图谱,共确定了5个共有特征峰,并指认了阿魏酸和藁本内酯两个色谱峰,药渣中藁本内酯存在大量残留,且不同干燥温度存在一定影响。结论该方法稳定可靠,可直观评价辽藁本水提药渣与原药材间的变化,同时优选了药渣干燥条件,为药渣后期的保存和二次利用提供了依据。

木香及其水提药渣的UPLC指纹图谱和含量对比研究

目的:测定木香药材和水提药渣的UPLC指纹图谱和含量,建立木香水提药渣利用价值的评估方法。方法:采用UPLC法对木香药材和药渣样品进行测定,分析各特征峰的残存量,并比较其木香烃内酯和去氢木香烃内酯的含量差异。结果:不同干燥温度木香药渣中木香烃内酯和去氢木香烃内酯峰残存量均较高,表明木香药渣具有二次开发前景。结论:本研究可作为木香水提药渣有效成分的多指标评价模型,并通过优选最适保存温度,为木香药渣进一步利用提供研究基础。

多指标权重分析法结合正交试验优选醋五灵脂炮制工艺

目的:优选醋五灵脂的炮制工艺。方法:建立超高效液相色谱指纹图谱,以醋五灵脂9个共有峰的主成分分析结果及外观性状为综合评价指标,采用正交试验考察米醋用量、电炒锅功率、炒制时间对醋五灵脂炮制工艺的影响,以综合得分为评价依据优选醋五灵脂炮制工艺。结果:醋五灵脂的最佳炮制工艺为每100 g五灵脂使用米醋10 g,电炒锅功率600 W,炒制时长10 min。结论:优选的醋五灵脂炮制工艺稳定可行,可为其饮片质量控制和产业化生产提供参考。

基于指纹图谱和多成分含量测定的白芍与炒白芍标准汤剂质量差异性研究

该研究通过测定白芍与炒白芍标准汤剂的出膏率、多成分含量、指纹图谱,比较二者质量的差异性。建立17批白芍炮制前后标准汤剂的UPLC指纹图谱,同时测定没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷的含量,对白芍与炒白芍标准汤剂峰面积进行独立样本t检验和正交偏最小二乘判别分析。白芍与炒白芍标准汤剂的出膏率无明显差异,炮制后标准汤剂中芍药内酯苷的平均含量增加了0.26%,没食子酸、儿茶素、芍药苷、苯甲酰芍药苷的平均含量分别降低了13.04%,27.94%,10.30%,18.79%。白芍标准汤剂指纹图谱标定了14个共有峰,炒白芍标准汤剂指纹图谱标定了16个共有峰,峰1与峰3为炮制后新增的色谱峰,其中峰3为5-羟甲基糠醛;独立样本t检验和正交偏最小二乘判别分析结果表明峰1、峰3、峰11、峰15是区分白芍与炒白芍标准汤剂关键的化合物,研究表明该方法可用于白芍与炒白芍标准汤剂、颗粒剂等制剂过程中各工序的量值传递和质量控制研究,同时为白芍生品与炮制品相关制剂的鉴别提供参考。