内毒素诱导肝细胞凋亡的机制及阳离子A的保护效应

为研究内毒素(ET)诱导肝细胞凋亡的作用机制及阳离子A(CA)对肝细胞的保护效应,采用ET所致家兔内毒素休克的模型,分别在3、4、81、2 h检测肝脏组织中一氧化氮(NO)水平的动态变化、肝细胞凋亡指数和肝细胞凋亡的形态学变化,并观察CA注射液对上述指标的影响。ET组中各时间段的肝组织中NO水平均显著升高(P<0.01),随着NO水平的增加,肝细胞凋亡指数先上升,然后下降,最后又上升到最高值;肝细胞及肝脏组织的损害程度也与此类似。CA组的NO水平则明显降低(P<0.05),肝细胞凋亡及病理组织学改变亦轻。提示NO参与内毒素休克的发病机制,介导了肝细胞的凋亡,同时,在一定范围内又有保肝作用。而CA可有效地中和血循环中的ET,减少肝脏中过量NO的产生,减轻炎症反应及其对肝脏的损害,对内毒素休克有一定的防治作用。

苏丹红Ⅰ对大鼠肝损伤及CYP 1A1表达的影响

为探讨苏丹红Ⅰ(SudanⅠ)对大鼠肝脏损伤及细胞色素CYP 1A1表达的影响,将实验动物随机分为两组:对照组(C组)和SudanⅠ处理组,其中SudanⅠ处理组分为4个剂量处理组:Ⅰ组(265 mg/kg)、Ⅱ组(530 mg/kg)、Ⅲ组(795 mg/kg)和Ⅳ组(975 mg/kg),连续饲喂10天后采集肝脏作为检测样本。常规病理组织学及超微结构观察SudanⅠ对肝细胞的损伤情况,运用免疫组化技术研究SudanⅠ对CYP 1A1表达的影响。组织病理学观察发现,SudanⅠ处理组肝细胞发生脂肪变性,超微结构变化为肝细胞胞浆内有脂肪滴,免疫组化试验结果显示:SudanⅠ处理组肝脏CYP 1A1基因表达蛋白的积分光密度极显著高于C组(P<0.01),且在一定剂量范围内呈上升趋势。结果表明,SudanⅠ能够上调CYP 1A1基因的表达,从而发挥各种毒性效应,最终导致肝脏损伤。

内毒素诱导的细胞凋亡和阳离子A的保护效应

为揭示内毒素(ET)诱导体内细胞凋亡的现象和阳离子A(CA)的保护效应,从家兔耳缘静脉注射400 U/kg ET建立内毒素休克模型,并设对照组和CA保护组,在第3、4、8和12 h分别收集外周血淋巴细胞(PBL)和肝细胞,电子显微镜观察PBL发生凋亡的形态学特征;运用缺口末端标记技术(TUNEL)观察肝细胞凋亡的形态学变化并计算肝细胞凋亡指数;采用流式细胞术(FCM)检测肝细胞的凋亡率。结果显示,PBL发生凋亡的超微结构特征表现为核染色质浓缩呈"新月体"状、"八字形"状或"花瓣"状等,在休克晚期出现凋亡小体;与对照组相比,TUNEL法检测到的肝细胞凋亡指数先上升到70%,然后下降到59%,后又上升到最高值86%,肝细胞及肝脏组织的损害程度也与此类似;FCM检测到肝细胞的凋亡率随着注射ET后时间的延长而增加(从10%增加到20%)。CA保护组中PBL的细胞病变较轻微、肝细胞的凋亡指数和肝细胞的凋亡率均出现不同程度的降低(P<0.01,P<0.05)。试验提示,ET能够诱导PBL和肝细胞的凋亡及功能损害,导致了内毒素性休克;而CA可有效地中和血循环中的ET,减少PBL和肝细胞的凋亡,对内毒素休克有一定的保护作用。

鹅大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

为了对鹅大肠杆菌的临床治疗提供指导并为制备大肠杆菌自家灭活疫苗奠定基础,采集疑似病例的病料,用麦康凯培养基分离细菌,对分离的细菌进行形态学鉴定、生化鉴定、血清型鉴定、致病性试验及药敏试验。结果显示,所分离到的菌落呈粉红色、光滑湿润、边缘整齐;革兰氏染色为阴性小杆菌,两端钝圆,多单个存在;共鉴定出15株大肠杆菌,其中4株O35型,3株O78型,3株O26型,2株O7型,1株O109型,1株O141型,1株O2型;动物试验表明所鉴定的菌株对小鼠和雏鹅均有较高的致死率;体外抑菌试验结果发现强力霉素、阿莫西林对该场的鹅致病性大肠杆菌具有较强的抑制作用。本研究为有效防制鹅大肠杆菌病提供了理论依据,对于控制规模化鹅场大肠杆菌等细菌性疾病具有重要的应用价值。

一氧化氮介导内毒素所致的外周血淋巴细胞凋亡及阳离子A的保护作用

采用内毒素（ET）所致家兔ET休克模型，分别在相应处理后3、4、8、12h检测血浆中NO含量的动态变化；用荧光显微镜观察外周血淋巴细胞（PBL）的凋亡情况并计算凋亡指数；用琼脂糖凝胶电泳检测PBL凋亡的特征性DNA降解，并观察阳离子A（CA）注射液对上述指标的影响。结果显示，模型组中各时间段的血浆中NO含量均显著高于对照组（P〈0．01），随着NO含量的增加，PBL凋亡指数明显上升（P〈0．01），其基因组DNA在处理后3、4、8h均发生180-200bp及其整数倍的“阶梯状”断裂，12h出现“弥散状”条带；CA保护组中NO水平和PBL凋亡指数均出现不同程度的降低（P〈0．01，P〈0．05），并且在电泳结果中无明显的“梯状”条带。提示ET可使血液中NO含量升高。NO参与了ET休克的发病机制，介导PBL凋亡，在晚期介导PBL坏死；而CA可有效地中和血液循环中的ET，明显降低机体内NO的含量，抑制PBL凋亡和坏死，对ET休克有一定的保护作用。

内毒素对大鼠小肠黏膜组织的影响及多价阳离子A的保护效应

旨在揭示大肠埃希菌内毒素(ET)对大鼠小肠黏膜的结构、绒毛长度、上皮内淋巴细胞(IEL)的数量和分布的影响,并探讨多价阳离子A(CA)对上述指标的保护效应。选用72只140g^150g SPF级SD大鼠随机分为3组,即对照组、ET组和CA保护组,经相应处理后分别在3、4、8、12h采集十二指肠、空肠组织作为检测样本,制备病理组织切片,HE染色并利用图像分析系统进行分析。ET组十二指肠和空肠绒毛长度在3、4、8、12h均显著低于对照组和CA保护组(P<0.01),ET组十二指肠、空肠IEL数量在3、4、8、12h均显著低于对照组(P<0.01);CA保护组十二指肠和空肠IEL数量在4、8、12h均显著高于ET组(P<0.01)。结果显示,ET在不同程度上能够破坏小肠黏膜的正常组织结构,降低小肠绒毛长度,减少IEL的数量,从而影响小肠正常的吸收和免疫功能,而CA则能明显降低ET所导致的毒性作用,发挥其保护效应。

昆明地区猪戊型肝炎病毒感染的血清学调查

为了解昆明地区猪戊型肝炎病毒(HEV)感染的情况,从昆明地区12个规模化养猪场和部分散养户采集了270份猪血清,采用间接ELISA方法对血清样本进行抗HEV抗体检测。检测结果显示,235份规模化养猪场猪血清抗HEV抗体阳性率为59.15%,35份散养户猪群血清中抗HEV抗体阳性率为74.29%,其中3月龄以上的育肥猪HEV抗体阳性率较高,为75%。结果表明,昆明地区猪群普遍存在HEV感染,尤其是仔猪和生长育肥猪HEV的感染较为严重。

内毒素信号转导机制的研究进展

细菌内毒素即脂多糖 (LPS)可激活单核 /巨噬细胞 ,产生一系列炎症反应 ,而LPS跨膜信号转导是引起细胞效应的关键。本文主要综述LPS结合蛋白 (LBP)、LPS受体 (mCD1 4、sCD1 4 )、Toll样受体 2、 4 (TLR2、TLR4)以及清道夫受体 (SR)、β2 整合素 ,L selectin在LPS激活细胞及信号跨膜传递中的重要作用。另外 ,对LPS介导的细胞内信号转导机制也进行了综述。深入研究LPS信号转导的分子机制 。

疯牛病致病机理研究进展

疯牛病即牛海绵状脑病是一种由朊蛋白感染引起的非炎性的致死性的脑退化性疾病 ,并可传染给人 ,引起人类的新型克雅氏病。疯牛病已经给英国养牛业造成了数百亿美元的直接经济损失 ,并有“东扩”蔓延的趋势 ,已对养牛业发展和人类健康构成巨大威协 ,成为国际兽医学界和医学界关注的热点。疯牛病的致病机理异常独特和复杂。文章对朊蛋白的结构、功能和增殖模式及其致病机理进行了综述 ,并对其研究方向进行了展望。

阳离子A对内毒素休克中一氧化氮水平的影响

探讨阳离子A(CA)对内毒素(ET)诱导的机体内一氧化氮(NO)水平的影响,采用ET所致家兔内毒素休克的模型,分别在3、4、8、12 h检测血液和肝脏组织中NO水平的动态变化,并观察CA注射液对上述指标的影响。于实验结束后取标本进行病理学检查。结果模型组中各时间段的NO水平均显著升高(P<0.01),其升高水平和组织、器官的损害程度相一致。CA组的NO水平则显著降低(P<0.01,P<0.05),病理组织学改变亦轻。说明NO参与内毒素休克的发病机制,而CA可有效地中和血循环中的ET,降低ET诱导的炎性因子的产生,并能有效地减少机体内过量NO的产生,减轻炎症反应及组织器官的损害,对内毒素休克有一定的防治作用。

动物病理学教学中学生创新能力培养的探索

在动物病理学教学中培养学生的创新能力,要以转变教育思想,更新教育理念为先导,从突出学生主体、优化课堂教学环节入手,开放思维方式,鼓励学生大胆质疑,更要注重动物病理学实践训练和创新型师资队伍的自身建设。

猪繁殖与呼吸综合征诊断技术研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是猪群中的一种免疫抑制性传染病,是严重危害我国养猪业的主要疫病之一,应用各种诊断技术对该病做出准确的诊断是预防和控制该病的前提。PRRS诊断技术包括检测病毒、检测血清抗体技术及分型诊断,涉及的技术和方法包括病毒分离、免疫组化、RT-PCR、间接免疫荧光试验、免疫过氧化物酶单层细胞试验、酶联免疫吸附试验和基因芯片技术等。每种诊断技术都有其各自的优势和局限性,应根据研究目的及工作条件等综合情况予以选择,文章就各种诊断技术的原理、方法及特点进行了概述和比较,并对今后的应用前景和发展趋势进行了展望。

猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2的原核表达及单克隆抗体的制备

以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)为模板,通过RT-PCR扩增编码非结构蛋白2(Nsp2)的基因,插入到pET32a表达载体中并在大肠埃希氏菌中进行表达。SDS-PAGE电泳结果显示融合表达的Nsp2分子量约为68 kDa,Western blotting分析该融合蛋白能与PRRSV阳性血清发生特异性反应。纯化融合表达产物Nsp2,按100μg/只的剂量与等量弗氏佐剂乳化,经腹腔免疫BALB/c小鼠3次后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,分别以Nsp2和His-Tag为抗原,通过间接EL ISA方法对融合细胞的上清液进行检测,筛选阳性克隆。经过3次亚克隆后,最终得到了6株能稳定分泌抗Nsp2抗体的阳性细胞克隆株。间接免疫荧光试验、Western blotting和间接ELISA试验鉴定这6株单克隆抗体均能够特异、单一地识别Nsp2,亚型鉴定结果显示6株单抗均属IgG2a型,其轻链均为κ链。所制备的这些单抗将为鉴定PRRSV Nsp2的B细胞抗原表位以及分析该蛋白的结构和功能奠定基础。

NO对细胞凋亡的影响

NO对不同细胞的凋亡影响不同。NO诱导凋亡可通过氧化应激、干扰能量代谢、直接损害DNA、激活多聚 ADP——核聚聚合酶或使胞液 Ca2 +调节紊乱。另一方面 ,通过 c GMP依赖途径 ,抑制细胞色素 C释放、降低半胱天冬酶活性等 。

自由基与疾病研究进展

随着基础医学和生命科学的不断发展,人们对自由基的研究越来越多,其中就有大量关于自由基与疾病的研究。自由基作为机体的正常代谢产物,在平衡状态下,其在抗菌、消炎和抑制肿瘤等方面具有重要作用和意义;一旦平衡被打破,如机体受到疾病或某些外源性药物和毒物的侵害,自由基便会产生强大的伤害作用,造成生物膜的脂质过氧化损伤,引起酶、氨基酸、蛋白质的氧化破坏,对内脏器官、免疫系统的形态功能产生影响,从而引起机体疾病,甚至死亡。目前,研究发现很多疾病的发生发展都与自由基有关。文章就自由基的产生、种类、与疾病的关系及清除进行了综述。

大肠埃希菌外膜蛋白F与细菌耐药性研究进展

随着抗生素的广泛应用及滥用,大肠埃希菌对抗生素的耐药性已严重影响养殖业的发展。外膜通透性改变是耐药机制中的一种因素,而外膜蛋白(Omp)F表达变化可引起外膜通透性的改变。因此,弄清楚影响OmpF表达变化的因素对研发新药降低大肠埃希菌的耐药性有重要意义。论文从大肠埃希菌OmpF的结构、生理功能、调控系统及转录因子等方面与大肠埃希菌的耐药性关系进行综述。

生物素-亲和素标记技术

生物素-亲和素系统(BAS)是一种具有高亲和力、灵敏度高、特异性强和稳定性好等优点的信号放大标记技术,研究证明生物素与亲和素依靠接触表面均一的多层膜来维系其稳定的结合。随着不断的探索和研究,该技术现已发展出多种标记方法,例如桥-亲和素-生物素标记法、亲和素-生物素-过氧化物酶法、标记生物素-抗生物素法,由于该标记技术具有优秀的性质,因此很快渗透到多个学科,在细胞和抗原的定位和检测中体现出极其重要的作用。目前,BAS已广泛应用于免疫学、分子生物学和组织化学等领域,并取得较好的效果。文章对该技术的特点、方法和应用做了简述。

内源性气体信号分子H_2S研究进展

H2S是继NO和CO之后发现的第3种内源性气体信号分子。在机体内主要由胱硫醚-β-合酶(CBS)和胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)催化产生,广泛分布于机体各个部位。H2S在体内参与舒张血管、抑制平滑肌增殖等各种生理过程。并且在高血压、内毒素性休克、手术创伤等各种疾病病理过程中发挥着重要的作用。论文就H2S的生成、代谢、生理作用及其与疾病的关系等方面做了综述。

细胞凋亡的特征及其检测方法

细胞凋亡是动物机体组织清除受损、衰老或多余细胞的一种自杀性过程,它对于保持机体各组织器官正常生长、发育、结构、功能动态平衡和维持内环境相对稳定等都具有重要意义。发生凋亡的细胞大多数是生物个体中多余或老化的细胞,有些也是发生肿瘤时的细胞或受到病毒或细菌感染的细胞。根据不同的检测方法来检测不同类型的细胞凋亡,进而来研究细胞凋亡的现象和发生机制,为揭示机体与细胞凋亡的关系和疾病与凋亡的关系提供理论依据。文章对凋亡细胞的特征、细胞凋亡各种检测方法的检测原理和结构判定,分别进行了概述。