种植年限对头花蓼土壤微生物群落的影响

【目的】探明不同种植年限头花蓼土壤微生物(细菌和真菌)群落组成及物种多样性的变化趋势,从土壤微生物的角度探究其连作障碍机制,为贵州头花蓼产业的可持续发展提供理论依据。【方法】采用Illumina测序技术,以头花蓼与玉米轮作地块土壤为对照(CK),通过对头花蓼连续种植2年(T2)、3年(T3)和4年(T4)地块土壤微生物进行测序分析,研究种植年限对头花蓼土壤微生物群落的影响。【结果】随连作年限增加,细菌群落丰度呈上升趋势,丰度从1620.30升至1787.22,物种多样性逐渐趋于平稳;真菌群落丰度呈下降趋势,丰度从635.00降至612.89,物种多样性变化不大。细菌群落:门水平下,变形菌门与酸杆菌门为优势菌群,相对丰度总占比>64%;变形菌门相对丰度显著降低(从40.80%降至34.80%),酸杆菌门显著增加(从24.20%升至29.10%);变形菌门(40.80%、40.20%、37.60%和34.80%)、浮霉菌门(1.50%、1.50%、2.60%和2.50%)在不同连作年限间相对丰度存在显著差异;属水平下,uncultured_bacterium_c_Subgroup_6所占比例最大,为10.66%~20.50%。真菌群落:门水平下,子囊菌门和担子菌门为优势菌群,其相对丰度总占比>61%,较CK逐年下降;被孢霉门和壶菌门在连作第4年(T_(4))几乎完全消失。属水平下,被孢霉属占比最大,为2.66%~14.30%,在连作第3年(T3)出现多孢囊霉属真菌。【结论】连作加大了头花蓼土壤中微生物群落差异。随着连续种植年限增加,变形菌门细菌、被孢霉门被孢霉属真菌等相对丰度逐渐降低,酸杆菌门细菌、子囊菌门镰刀菌属真菌等相对丰度逐渐增加,可能是头花蓼连作障碍发生的原因之一。

基于ITS和matK序列的苗药朱砂根遗传多样性分析

为探究朱砂根的遗传多样性,对收集的16个居群的69份朱砂根样品ITS和matK序列进行双向测序,应用Genious 11.0软件分析2个序列的结构变异,应用MEGA 11.0软件基于Kimura-2-Parameter(K2P)模型,计算居群间遗传距离,采用邻接法(NJ)分别构建系统发育树。结果表明,朱砂根ITS与matK序列长度分别为447~451 bp、844~861 bp, GC含量分别为55.30%~56.30%,33.70%~34.40%,变异位点分别为24个、43个,单倍型多样性分别为0.947、0.917,核苷酸多样性分别为0.013 14、0.006 00;朱砂根ITS序列居群间遗传距离在0.000 4~0.032 0之间,平均遗传距离0.018 4;matK序列居群间遗传距离在0.000 0~0.019 6之间,平均遗传距离为0.008 6。系统发育结果表明,ITS和matK序列都将16个居群的朱砂根聚为2支,且遗传距离较小。研究表明,不同居群的朱砂根具有较为丰富的遗传多样性,且遗传距离与居群地理空间距离有关。ITS较matK序列变异更丰富,更适宜对朱砂根遗传多样性评价、分子标记开发与基源鉴定等研究。

基于ISSR分子标记的苗药朱砂根遗传多样性研究

为了探究不同居群朱砂根遗传多样性水平及亲缘关系,以24份不同居群朱砂根为材料,采用ISSR分子标记技术对其进行筛选分析,结果从100条引物中筛选到14条扩增效果好、多态性高的ISSR引物,对24个朱砂根居群进行遗传多样性分析,共检测到75条扩增位点,平均每条引物扩增5.4个位点,74个为多态性位点,多态性比率(PPB)为98.67%;其中,UBC841扩增位点最多(8个),UBC820、UBC821、UBC844、UBC887扩增位点最少(4个)。观测等位基因数为2,有效等位基因数为1.0868~2.0000,Nei's基因多样度为0.0799~0.5000,Shannon's指数最大,为0.6931;遗传距离与地理距离无显著相关性。研究表明,朱砂根种质资源遗传多样性高,ISSR分子标记可用于朱砂根亲缘鉴定。

3种头花蓼材料农艺性状差异分析

目的:对3种头花蓼材料的农艺性状及生物量进行差异分析和评价,为头花蓼优良种源的筛选提供基础数据。方法:分别于生长期(S)和采收期(C)对3种头花蓼材料的22个指标进行观察测量,用SPSS 26.0进行差异性分析。结果:变异度和差异性分析结果表明,C-兴黔头花蓼长势最好,C-威蓼1号产量最高,S-腾冲5代和C-兴黔头花蓼农艺性状变异最丰富。本研究为贵州著名苗药头花蓼的优良种源筛选、栽培技术优化等提供了一定的参考依据。

箭叶淫羊藿不同部位含量差异研究

为了解箭叶淫羊藿根、根茎、叶、叶茎、叶柄、花叶、花茎、花柄共8个部位的含量差异,本研究采用HPLC法和UV法,对含量结果进行差异分析。分析结果表明,叶、根茎、根、叶茎等部位含量较高,其中以叶的含量最高,根与根茎的朝藿定C含量总体高于地上部位。本研究证明了2020年版《中国药典》所规定淫羊藿药用部位为叶的合理性。同时分析结果发现,根茎有开发作为药用部位的潜力。

苗药金钱豹生态适宜性区划分析

为分析影响金钱豹分布的主要生态因子,探究其生态适宜分布区域。该研究应用地理信息系统(ArcGIS)和最大熵(MaxEnt)模型对119个金钱豹地理分布点信息及37个生态因子进行生态位模拟,明确影响金钱豹潜在分布的主要环境因子及适生区。结果表明,影响金钱豹的生态适宜性的主要环境因子为最冷月最低温、昼夜温差月均值、年均降水量及海拔等因素。其中,最冷月最低温在5℃、昼夜温差月均值在6℃,年均降水量在1607 mm、海拔在731 m时最适宜金钱豹生长。金钱豹生长的潜在高适生区,主要位于贵州西南部、四川东部、云南东南部、广西、广东北部和福建中部。该研究基于MaxEnt模型建立的金钱豹潜在分布区分析数据,可为其资源保护与利用、栽培基地选择等提供参考。

珍稀濒危物种无距淫羊藿叶绿体基因组结构特征与系统发育分析

无距淫羊藿(Epimedium ecalcaratum G.Y.Zhong)为小檗科淫羊藿属形态特殊的类群之一,其分布狭窄,被IUCN列为濒危物种。本研究对无距淫羊藿叶绿体基因组结构及系统发育进行分析,以期为其遗传保护提供理论依据。结果表明,无距淫羊藿叶绿体基因组长度为164962 bp,包括大单拷贝区(LSC)80562 bp,小单拷贝区(SSC)17040 bp以及两个反向重复序列(IRa和IRb)各33680 bp,总GC含量为38.7%;无距淫羊藿叶绿体基因组共编码139个基因,包括94个蛋白编码基因,37个转运RNA基因,8个核糖体RNA基因。序列鉴定共发现3种类型的SSR,其中,单核苷酸68个、二核苷酸2个,复合核苷酸4个;21个基因包含1个或2个内含子;94个蛋白编码基因编码51997个密码子;系统发育分析结果支持淫羊藿属为单系,无距淫羊藿与分布较广的粗毛淫羊藿亲缘关系较近。

水分胁迫对朱砂根种子萌发及幼苗生长的影响

开展5个水分处理下的朱砂根种子萌发试验,测定比较其对种子萌发、幼苗生长情况和幼苗的3个生理生化指标的影响。结果表明,随着PEG-6000溶液浓度增加,朱砂根种子的发芽率、发芽势呈先上升后下降趋势,发芽指数和活力指数呈先下降后上升趋势;PEG-6000浓度为10%时,发芽率最高;PEG-6000浓度为5%时,发芽势最高,CK组的发芽指数和活力指数均高于其他组。CK组胚根最长,CK组与各试验组之间的胚根数、干重、相对含水量参数基本相同,差异不显著。水分胁迫促使朱砂根幼苗叶片数、须根数、鲜重和干重均有所增加,相对含水量、叶长、叶宽有所减小。幼苗的叶绿素含量和SOD活性随PEG-6000溶液浓度增加呈先上升后下降趋势,PEG-6000溶液浓度为5%时,幼苗叶绿素含量和SOD活性最高,MDA含量与PEG-6000溶液浓度大致呈正相关,CK组与试验组均具有显著性差异(p<0.05)。综上,朱砂根具有一定的抗旱能力,种子萌发需要适当的水分,其中PEG-6000溶液浓度为5%时最佳。

黑骨藤追风活络胶囊对类风湿关节炎大鼠PI3K/AKT/HIF-1α通路的作用

目的:观察黑骨藤追风活络胶囊对类风湿关节炎大鼠PI3K/AKT/HIF-1α轴的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、黑骨藤追风活络胶囊0.315g/kg组、黑骨藤追风活络胶囊0.315g/kg+PI3K抑制剂LY2940020.01g/kg联合给药组。除空白组外,其余各组构建模型。给药5周内测量大鼠足跖厚度,脾脏HE染色观察病理表现,TUNEL法观察脾脏细胞凋亡,免疫蛋白印迹法检测脾脏Caspase-1、3和Cytochrome-C蛋白表达和检测关节滑膜组织p-PI3K、p-AKT、HIF-1α、Bax、Bcl-2蛋白,ELISA试剂盒检测血浆IL-2、IL-4、IL-17表达。结果:与模型组相比,空白组、黑骨藤追风活络胶囊组、联合给药组大鼠足跖肿胀度明显降低;脾脏病理表现明显改变;TUNEL染色显示空白组、黑骨藤追风活络胶囊组、联合给药组脾脏凋亡细胞平均光密度值表达下调;免疫蛋白印迹显示空白组、黑骨藤追风活络胶囊组、联合给药组脾脏内Caspase-1、3和Cytochrome-C表达下降,黑骨藤追风活络胶囊组、联合给药组滑膜组织内Bax表达上调,空白组、黑骨藤追风活络胶囊组、联合给药组p-PI3K、p-AKT、HIF-1α、Bcl-2表达下调;ELISA显示空白组、黑骨藤追风活络胶囊组、联合给药组血浆IL-2、IL-17表达下调,IL-4表达上调。结论:黑骨藤追风活络胶囊可能通过调节PI3K/AKT/HIF-1α轴对类风湿关节炎大鼠炎性反应起到抑制作用。

中国淫羊藿属药用植物引种后性状变异及分类

为探讨环境因子对中国淫羊藿属植物性状的影响,对引种到贵州正常生长3年左右的中国淫羊藿属药用植物12个种的植株性状变化情况进行观察。结果表明:移植后的淫羊藿属植物性状变化主要表现在株高、花果期、腺毛与非腺毛、花瓣、花药颜色等方面;一些种类性状稳定,几乎无变化;同时对中国淫羊藿属药用植物进行实验分类学研究。

七种中国淫羊藿属药用植物细胞分类学研究

该研究应用常规压片法对7种中国淫羊藿属药用植物进行了核型分析,为淫羊藿属药用植物的分类及选育等提供理论基础。结果表明:7种淫羊藿属植物体细胞染色体数目均为2n=2x=12,基数x=6;水城淫羊藿、腺毛淫羊藿、保靖淫羊藿、拟巫山淫羊藿、天全淫羊藿5个种均有4对m染色体和2对sm染色体,核型公式均为2n=2x=12=8m(2SAT)+4sm,其中水城淫羊藿、腺毛淫羊藿的核型分析为首次报道;镇坪淫羊藿、偏斜淫羊藿具有3对m染色体和3对sm染色体,核型公式为2n=2x=12=6m(2SAT)+6sm。拟巫山淫羊藿第2对染色体具随体,其余物种第1对染色体均有随体;腺毛淫羊藿、保靖淫羊藿、拟巫山淫羊藿、镇坪淫羊藿、偏斜淫羊藿、天全淫羊藿均属于Stebbins 2A类型,水城淫羊藿为Stebbins 1A类型。结合文献综合分析发现,该属植物不同种间的核型高度一致,核型稳定,种间核型差异小,核型结构与地理分布、形态特征相关性较小。因此,淫羊藿属是一个在核型进化上较为保守的植物类群,用核型分析对该属植物属下进行种类鉴定、遗传演化十分困难,即使是属内远缘物种,其核型系统学的意义有限,但在属上的分类级别有较大的参考价值。

贵州忍冬属药用植物种类与地理分布的研究

通过分类学研究,确认贵州忍冬属药用植物资源种类与地理分布。方法:通过野外产地的调查、标本采集和现有馆藏标本的鉴定、分类鉴定以及相关文献的查阅相结合的方法。结果:报道了贵州忍冬属药用植物的26个种,其中包括1亚种5变种的地理分布、生境及药用等情况。结论:为进一步开发利用贵州忍冬属药用植物资源提供科学依据。

贵州淫羊藿属药用植物实验分类学研究

淫羊藿属植物在贵州的分布较广,经调查,贵州有淫羊藿属药用植物17种2变种,是西南地区的分布中心。本文对12个不同生境的贵州淫羊藿属药用植物进行引种栽培试验,观察植株性状变异情况。结果显示,12个贵州淫羊藿属药用植物种移植后性状变化主要表现在:植株高度、花果期、被毛、花萼、花瓣、花药颜色等方面。此研究为进一步分析环境因素对淫羊藿属植物性状变化的影响提供了参考。

牛皮消糖类成分分析(摘要)

牛皮消(Cynanchum Cauclatum Max-im)属萝摩科一年生草本植物。味甘苦,具有利尿、祛风渗湿、消食行气、止痛等功效,用于止牙痛、喉痛效果显著。对牛皮消化学成分的研究报道甚少。我们于1987～1988年对其糖类成分进行分析,结果如下:

基于ITS 2序列的15种淫羊藿属药用植物分类鉴定研究

为探讨内转录间隔区2(ITS2)序列及其二级结构在15种淫羊藿属(Epimedium)中的鉴定效率。利用试剂盒提取叶片总DNA,对ITS2序列进行PCR扩展与测序,计算K2P遗传距离,构建系统发育树,预测其二级结构。结果表明,ITS2序列在15种淫羊藿属植物中的通用性好,扩增成功率与测序成功率均为100%。从K2P种间和种内遗传距离看,ITS2在淫羊藿属中的种间变异较小,部分种类种内遗传距离大于种间遗传距离,鉴定成功率约为60%。采用比对法(Blast)分析,ITS2鉴定效率为75%。由ITS2系统进化树可知,淫羊藿属与鬼臼属各为一支,易于分开。除薄叶淫羊藿、竹山淫羊藿、巫山淫羊藿外,其余种类均能较好的进行聚类;除粗毛淫羊藿、保靖淫羊藿外其余均不能与NCBI下载到的序列进行较好聚类。研究表明,15种淫羊藿属植物ITS2序列在ML系统进化树中具较好的鉴别能力,但淫羊藿属各样本种内与种间遗传较为混乱,遗传距离复杂,ITS2二级结构形态结构亦较为相似,将各种间进行区分存在一定难度,不适合单独作为该属条形码使用。

粗毛淫羊藿叶绿体基因组及其结构分析

本研究通过Illumina HiSeq X-Ten高通量测序平台对粗毛淫羊藿的叶绿体基因组进行测序,并应用生物信息学分析工具对其结构特征进行比较分析。结果表明,粗毛淫羊藿叶绿体基因组大小为156894 bp,具有被子植物典型的环状四分体结构,大单拷贝区(large single copy,LSC)长度为88496 bp,小单拷贝区(small single copy,SSC)长度为16685 bp,2个反向重复区(inverted repeat sequence,IRa/IRb)长度为25809 bp;粗毛淫羊藿叶绿体基因组有133个基因,其中包括85个蛋白编码基因、10个rRNA基因和38个tRNA基因,44个外显子,23个内含子。研究结果丰富了淫羊藿属物种的叶绿体基因组资料,可为淫羊藿属物种的分子标记开发、系统学研究与药材的混伪品鉴定提供参考。

基于清风藤属植物DNA条形码的叶绿体序列筛选

基于叶绿体基因matK、psbK-psbI、psbA-trnH序列分析9种清风藤属植物DNA条形码可行性。结果表明,清风藤属3条叶绿体基因中,matK序列最长(805 bp);psbA-trnH序列的GC含量最低(29.7%),变异位点数(46)与简约信息位点数(32)最多。种间变异顺序为:psbA-trnH>matK>psbK-psbI;种内变异顺序为:psbA-trnH>psbK-psbI>matK。遗传距离分析、barcoding gap分析与Wilcoxon秩和检验分析结果显示,在9种清风藤属植物中,只有psbA-trnH序列种内最大变异小于种间最小变异,matK序列种间差异较大。从系统进化树分析结果看,3条序列均可以区分部分物种,matK序列鉴定效率较高。因此,3条序列均不适合单独作为该属植物的DNA条形码。在后续的研究中,建议以matK作为DNA条形码辅助序列与其它候选序列进行联合分析,以提高清风藤属DNA条形码鉴定效率。

DNA条形码技术在淫羊藿属植物分类鉴定中的可行性分析

目的拟探讨基于叶绿体基因片段psbA-trnH与matK序列的DNA条形码技术在淫羊藿属中的分类与鉴定中的可行性。方法选用不同来源的34个种,共计84份材料,对其psbA-trnH与matK序列片段进行PCR扩增、测序,分析其序列组成和结构特点,应用Kimura双因素模型(Kimura-2-parameter,K-2-P)计算遗传距离,同时应用邻接法(Neighbor-Joining,N-J)构建系统发育树。结果PsbA-trnH序列在34种淫羊藿属材料中的通用性较matK好;通过K-2-P模型评估,psbA-trnH鉴定成功率为36.7%,matK鉴定成功率为24.2%,2条序列遗传距离均存在一定gap;N-J进化树显示,matK序列N-J系统进化树鉴定效率为17.1%,psbA-trnH序列N-J系统进化树鉴定效率为25.7%。结论本研究丰富了淫羊藿属植物的分类鉴定资料,但在淫羊藿属中的分类与鉴定中,应用基于叶绿体基因片段psbA-trnH与matK序列的DNA条形码技术仍具有一定局限性。

基于FTIR的天南星及其混伪品鉴别

目的建立傅里叶红外光谱(FTIR)快速鉴别天南星及其混伪品。方法应用FTIR测定10种、30批天南星及其混伪品在4 000~400 cm^-1红外光谱范围的吸收情况,并对不同样品的红外光谱吸收峰特征进行比较与聚类分析。结果 30批样品的红外光谱在波数4 000~2 000 cm^-1内有2个共同吸收峰,无显著吸收差异;在波数2 000~400 cm^-1内吸收峰较多,具有明显吸收差异;16批不同产地的天南星红外光谱图较为相似,相关系数均大于0.9;在波数为1 323 cm^-1、1 736 cm^-1处的吸收可以将天南星与大部分同属混伪品进行区分。30批样品可分为3大类。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于天南星的质量控制。

药用蕨类植物骨碎补(Drynaria fortune)根茎繁殖研究

以中药材骨碎补基源植物槲蕨为试材,应用多重比较与主成分分析方法考察不同基质、激素类型及其浓度与处理时间对骨碎补根茎生根率、生根数、根长、叶片数、新茎数、新茎长与根系效果指数的影响。结果表明:以砂石或砂石∶壤土=1∶1繁殖基质,可有效提高骨碎补插穗生根率和生根数;当基质为砂石∶壤土=1∶1时更有利于根系的生长,提高根系效果指数、促进骨碎补插穗生长。生长调节剂在一定浓度范围内对骨碎补生长具有一定的促进作用,但高于一定浓度呈抑制趋势。主成分分析结果表明,浓度为100 mg·L-1处理综合得分最高,处理1.5~3.0 h可显著提高骨碎补插穗根系效果指数,促进骨碎补根系发育与茎叶分化。该研究提供了促进骨碎补根茎根系发育与后期生长方法,可为骨碎补的人工繁殖提供参考。