精氨酸对引起采后蓝莓腐烂的链格孢靶标菌的抑制效果研究

目的旨在筛选引起蓝莓采后腐烂的链格孢靶标菌株,并比较L-精氨酸和山梨酸钾对其抑制效果,为蓝莓采后链格孢腐烂病的防控提供前期基础。方法通过组织分离法结合单孢分离法进行致腐菌的分离,采用ITS序列分析进行属水平鉴定,采用ATP序列分析结合形态学观察进行种水平鉴定,采用平板抑菌法比较L-精氨酸和山梨酸钾的抑菌效果。结果本研究分离获得的链格孢菌均有致病性,分别属于3个不同种群,分别为细极链格孢(Alternaria tenuissima)、互隔交链孢(A.alternata)和云南铁杉链格孢(A.dumosa)。以菌株B20190623E3(A.tenuissima代表菌株)、菌株B20190623B1(A.alternata代表菌株)、菌株B20190623C1(A.dumosa代表菌株)为靶标菌,发现L-精氨酸对供试3株靶标菌的EC50值均低于山梨酸钾。结论供试链格菌株均有致病性,其中引起蓝莓采后腐烂的优势链格孢种群为细极链格孢。云南铁杉链格孢为引起蓝莓果实腐烂的新纪录种。筛选获得了3株链格孢代表靶标菌。L-精氨酸对引起蓝莓采后腐烂的链格孢菌具有较好的抑制效果。

拟盘多毛孢属真菌侵染蓝莓的一个新纪录种:Pestalotiopsis kenyana

实验室前期对来自不同产区的蓝莓病样进行了病原菌的分离及其致病性测定,并根据其形态学特征及ITS序列进行了初步的属水平鉴定。其中,有5株拟盘多毛孢属的真菌在与已报道为害蓝莓的拟盘多毛孢种群进行系统发育树对比分析时,单独形成一个分支。为确定这5株菌的分类地位,采用形态学及分子系统发育法对供试菌株进行了鉴定。结果表明,这5株病原菌均为Pestalotiopsis kenyana,分生孢子大小为(20.7~28.8)μm×(4.7~7.2)μm,中间三色细胞同色,长为13.2~18.0μm,具2~3根顶端附属丝,1根基部附属丝。本研究是P.kenyana为害蓝莓在国内外的首次报道。

蓝莓灰霉病菌差异性比较及蓝莓品种抗病性鉴定

【目的】区分蓝莓灰霉病菌菌群形态差异、致病力差异,评价北方蓝莓主栽品种对该病的抗感差异。【方法】依据相同条件下菌落产孢产菌核特点进行菌群区分,离体、活体接种进行致病力测定,采用活体接种对14个北方地区主流品种进行抗病性评价。【结果】供试蓝莓灰霉病菌分为3个菌群,I型菌易产孢无菌核,II型菌不易产孢产菌核,III型菌易产菌核,菌核上产孢;各菌群代表菌株均有致病性,但存在差异;14个蓝莓品种对强致病菌株JLCC002表现出抗感差异。【结论】蓝莓灰霉病菌存在形态差异,供试菌株共分为3群;供试菌JLCC002对蓝莓茎、叶均有强致病力,以此作为靶标的抗病性试验中品种‘奥尼尔’、‘天赐4号’相对抗病,品种‘达柔’,‘爱国者’相对感病。

小叶锦鸡儿根瘤菌的分离及其16S rDNA PCR-RFLP分析

对辽宁地区与小叶锦鸡儿共生的根瘤菌资源进行了初步调查。采自5个不同地区样品的根瘤,通过分离、纯化、回接验证等试验共获得65株供试根瘤菌菌株。进一步选用4种限制性内切酶对供试根瘤菌进行了16S rDNA PCR-RFLP研究,结果表明其系统发育地位位于中慢生根瘤菌属(Mesorhizobiumspp.),并在96%相似性水平上分为5个不同的类群,分别由相应的rDNA图谱组合代表。丰富度及频度分析表明,组合15是辽宁省的优势群,组合18丰富度居第二位,但频度最高,也是辽宁省的主要类群。

柱孢属(Cylindrocarpon)真菌和参类锈腐病的研究历史与现状

柱孢属(Cylindrocarpon)真菌是引致人参和西洋参锈腐病的重要病原菌。根据国内外相关文献和目前生产现状 ,综述了引起参类锈腐病的柱孢属真菌的分布与危害、形态与分类、致病性与寄主范围、病原生物学特性、发病规律及防治等方面的研究历史与现状 。

辽宁营口地区锦鸡儿与树锦鸡儿根瘤菌遗传多样性研究

对锦鸡儿与树锦鸡儿根瘤菌进行研究,以了解其系统发育地位及遗传多样性。通过分离、纯化、回接结瘤测定共获得了31株待测菌,并采用16S rDNA PCR RFLP及BOX-PCR等方法对这些菌进行了研究。结果表明,31株待测菌的系统发育地位全部源于中间根瘤菌属(Mesorhizobium spp.),并产生5种不同的rDNA图谱组合。BOX-PCR研究中,待测菌株呈现出较高的多样性,在80%相似性水平上,将待测菌归于17个不同的类型当中。

辽宁树莓灰霉病流行调查及原因分析

以树莓生产上常发生的树莓灰霉病为调查对象,对辽宁省树莓主栽区的5个树莓种植基地进行了病害调查。结果表明:2008年辽宁树莓灰霉病发生严重。笔者通过了解树莓灰霉病发生流行的特点,结合病害调查情况,分析了该病严重流行的原因并提出了相关的防治措施。

蓝莓镰孢菌叶枯病的病原菌鉴定

在江西蓝莓产区的病害调查过程中,发现一种由镰孢菌侵染的叶部新病害,主要引起叶片枯萎,进行病原菌的分类鉴定将为病原学及该病害综合防控提供前期基础。病原菌的分离采用二步分离法,组织分离之后采取单孢分离。致病菌的确定依据柯赫氏法则。病原菌的鉴定方法依靠表型特征鉴定,同时辅助ITS和TEF-1α序列进行分子鉴定。引致江西地区蓝莓叶枯病的致病菌为JX03Aa,经表型鉴定与分子鉴定表明该病菌为亚细亚镰孢菌(Fusarium asiaticum)。江西地区发生的蓝莓叶枯病由亚细亚镰孢菌侵染所致,蓝莓是亚细亚镰孢菌的新记录寄主。

长白山沿脉参类锈腐病菌比较生物学研究

长白山沿脉是我国人参和西洋参的主要栽培区,长期以来,参根锈腐病一直是该地区参类栽培中最为严重的病害之一.有关参类锈腐病菌具体种类的报道不尽相同,为此,作者分离了长白山沿脉不同地区的12个人参和西洋参锈腐病菌株,在病原形态学研究的基础上,测试比较了各菌株对温度、pH、光照等不同培养条件下的异同,以了解其生物学特性,并辅助形态分类.

灰葡萄孢不同发育表型指纹图谱研究

利用ISSR分子技术,筛选引物用于构建灰葡萄孢(Botrytis cinerea)不同发育表型群体的指纹图谱。从收集到的300株灰霉菌中选35株代表菌株,虽然其菌落形态有所差异,但经形态学鉴定、ITS鉴定、特异引物BC729鉴定及三基因(G3PDH、HSP60和RPB2)系统发育树分析均表明其为灰葡萄孢种群。在此前提下,筛选可用于区分不同发育表型的ISSR引物,引物所扩增的图谱要求稳定重复,主带明显,带间距宽。经筛选获得3条引物,名称分别为807、864和886,其最优退火温度分别为51℃、52℃和49℃。供试35个代表菌株经引物807扩增后出现3种不同类型指纹图谱,经引物864扩增后出现4种不同类型图谱,经引物886扩增后出现5种不同类型图谱。将以上3个引物的扩增图谱联合分析,本研究供试菌共出现9种图谱组合。9个图谱类型对应不同的菌落形态。灰葡萄孢种下存在高水平分化现象,由于其菌落形态受培养环境影响较大,仅凭形态区分容易造成误差,本研究搭建了一个灰葡萄孢种下发育表型的分子鉴定平台,为今后开展菌群鉴定与分析、不同研究条件下菌群比较、演化更替及发掘新菌群提供研究手段。

蓝莓根癌病发生调查及病原鉴定

对辽宁、吉林、山东及黑龙江省的部分蓝莓苗圃及生产园中蓝莓根癌病发生情况、症状特点及危害程度进行了调查,结果表明蓝莓根癌病多见于苗圃及酸度不适的生产园中。在上述地区采集到57份蓝莓冠瘿瘤和10份土壤样品,经过菌株分离、回接寄主后获得19株致病菌。通过菌落形态、菌体特征、生理生化及16SrDNA序列比对,确定蓝莓根癌病是由根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)侵染所致。

人参锈腐病生防细菌的分离筛选与鉴定

从吉林和辽宁两省不同人参种植区土壤中分离出836株细菌,从中筛选出10株对人参锈腐病菌(Cylindrocarpon destructans)具有明显抑制作用的拮抗菌株。选择抑菌效果最好的菌株BS015(抑菌圈直径22.8mm),对人参几种常见病原菌进行抑菌谱试验。结果表明:菌株BS015对人参根腐病菌(Fusarium solani)、人参菌核病菌(Sclerotinia schinseng)、人参黑斑病菌(Alternaria panax)均有较好的抑菌效果,对人参立枯病菌(Rhizoc-tonia solani)抑制效果不明显。通过对其形态特征、生理生化及16S rDNA序列分析研究,菌株BS015为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。

保护地主要园艺作物灰霉病菌生物学特性比较研究

对保护地几种主要园艺作物的灰霉菌(Bortrytis cinerea)进行了生物学特性比较、致病性测定和可溶性蛋白质电泳研究,并用聚类分析的方法对菌株间的亲缘关系进行了分析。结果表明:5个灰霉病菌可分成3类,第1类为草莓灰霉菌和葡萄灰霉菌;第2类包括番茄灰霉菌和黄瓜灰霉菌;第3类为辣椒灰霉。葡萄灰霉菌和辣椒灰霉菌更容易侵染草莓,因此,在田间彼此应避免间作和复作,番茄和黄瓜可以选择其一适当与草莓进行间作和复作,番茄和黄瓜之间应避免间作和复作。

人参锈腐病拮抗生防菌的筛选与鉴定

从人参根际土壤中筛选到具有拮抗人参锈腐病菌(Cylindrocarpon destructans)生物活性的生防菌3株,其中菌株BS015和菌株HN01为细菌,抑菌圈直径分别为22.8mm和21.9mm。菌株Tri41为木霉菌,抑菌率达76.6%。对人参几种常见病原菌进行了抑菌试验,结果表明:对人参根腐病菌(Fusarium solani)、人参立枯病菌(Rhizoctonia solani)、人参黑斑病菌(Alternaria panax)、人参菌核病菌(Sclerotinia schinseng)均有一定的抑菌效果。结合16S rDNA分子鉴定和形态鉴定对3株菌株进行了鉴定,结果表明:菌株BS015为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),菌株HN01为多粘芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa),菌株Tri41为哈茨木霉(Trichdema harzianum)。

辽宁树莓病虫害调查初报

2008—2009年对辽宁省主要树莓试验和生产基地树莓病虫害发生、危害及种类进行了系统的调查。发现树莓病虫害共23种,其中侵染性病害7种,分别是树莓灰霉病、灰斑病、炭疽病、锈病、根癌病、根腐病和苗期立枯病;生理性病害2种,分别是冻害和日灼病;虫害14种,分别是美国白蛾、灰斑古毒蛾、折带黄毒蛾、舞毒蛾、黄刺蛾、梨剑纹夜蛾、甜菜夜蛾、黄褐天幕毛虫、侧斑异丽金龟、中华弧丽金龟、双斑萤叶甲、大青叶蝉、透翅疏广蜡蝉和蓟马。调查发现,发生较普遍的病害有3种,分别是树莓灰霉病、灰斑病和炭疽病;危害较严重的病害有3种,分别是树莓灰霉病、炭疽病、苗期立枯病。发生严重的虫害1种,为美国白蛾。

玉米弯孢菌叶斑病传播梯度模型

根据植物病害流行学原理 ,采用人工接种方法 ,在田间造成玉米弯孢菌叶斑病不同的发病梯度 ,分析连续 2年玉米弯孢菌叶斑病传播动态。利用SPSS统计软件构建了此病害的传播梯度模型 ,结果表明指数模型是沈阳地区玉米弯孢菌叶斑病传播梯度的最佳模型。接种 2个月 ,掖单 13玉米弯孢菌叶斑病传播梯度最佳模型是x =9.6 0 6×EXP(- 0 .2 82 9×d) ,海试 16最佳模型是x =7.15 4×EXP(- 0 .2 35 1×d) (x:病情指数 ,d :距菌源中心的距离 )。预测玉米弯孢菌叶斑病在 2个月最远传播距离为 2 8m ;传播速度为 0 .4～ 0 .5m/d。

五味子茎基腐病发生初报

通过对辽宁省多个地区的调查,发现此病害发生普遍,尤其是二年生的五味子茎基腐病发生严重。五味子茎基腐病在5月上旬开始出现,6月初为发生盛期。本文对五味子茎基腐病进行了症状描述,并对不同地点采集的病样分别进行木质部和韧皮部病原物的分离、纯化。对分离得到的菌株按照柯赫氏法则进行致病性测定并对病原菌进行鉴定,结果表明,此病害可由木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)、茄腐镰刀菌(F.solani)、尖孢镰刀菌(F.oxysporum)和半裸镰刀菌(F.semitectum)4种镰刀菌属真菌引起。针对此病害的发生特点,提出了相应的防治措施。

灰霉病菌(Botrytis cinerea)生物防治研究进展

综述了国内外利用相关拮抗微生物防治作物灰霉病菌的研究历史与现状 ,介绍了国内外用于防治灰霉病菌的几类主要微生物 ;阐述了灰霉病生物防治的主要机理 ;讨论了目前生物防治中存在的主要问题 ,并就应用前景作了评述 ,认为生物防治在未来作物灰霉病的防治和人类安全问题中将发挥重要的作用。

玉米弯孢菌叶斑病产量损失估计模型的研制

采用不同菌源梯度人工接种的方法 ,在田间造成玉米弯孢菌叶斑病流行动态不同的18个发病小区 ,分析各期病情指数与产量构成因子之间的相关性 ,结果表明 :玉米弯孢菌叶斑病对玉米百粒重、单穗重和产量都有显著影响 ,产量损失率与病情指数呈正相关 ,产量损失率最高可达38.24 % ,而病情指数对穗数没有直接影响。利用电子计算机SPSS统计分析软件构建了两个玉米弯孢菌叶斑病产量损失估计模型 :(1)关键期病情模型(CPM) ,L=2.8219+0.7402x1 (R=0.8799,SD=5.2149,N=18)。(2)多期病情模型(MPM) :L=1.073 +0.426x1 +0.170x2 (R=0.892,SD=5.2898,N=18)。式中 :L为玉米产量损失率 ;x1 为授粉期病情指数 ;x2

人参锈腐病拮抗细菌BS015最适发酵条件研究

通过单因子试验和正交试验方法对人参锈腐病拮抗细菌BS015摇床发酵条件和培养基配方进行了研究。结果表明:最适发酵条件为装液量20%,接菌量5%,pH7,温度28～30℃;发酵最适培养基配方为葡萄糖18 g/L、L-谷氨酸钠12 g/L、牛肉浸膏5 g/L、磷酸氢二钾4 g/L、硫酸镁1 mg/L、氯化钠3 g/L、硫酸锰5 mg/L。