AGREE Ⅱ评价肝脏弹性成像技术诊断肝纤维化的实践指南与循证解读

目的:评价已发布的肝脏弹性成像技术无创诊断肝纤维化的实践指南,并从循证方法学角度进行解读。方法:由2名研究者检索中英文数据库,截止日期为2020年9月1日。由3名研究者采用AGREEⅡ工具对纳入的指南进行质量评价。结果:共纳入9篇指南。3名研究者的组内相关系数为0.84±0.43,提示一致性很好。纳入指南的AGREEⅡ的6个领域得分的中位数分别为78%、30%、33%、81%、42%和47%。结论:现有指南质量参差不齐,指南的参与人员、制订严谨性、应用性和独立性存在不足,须依据更多高质量的临床研究证据,采用循证指南制定法修订。

SKA1通过Cdc42介导高尔基体堆叠调控胰腺癌细胞侵袭与转移

目的:探讨SKA1调控胰腺导管腺癌(PDAC)侵袭与转移的分子机制。方法:利用免疫组化染色法检测胰腺导管腺癌组织样本及癌旁组织中SKA1与下游分子Cdc42的表达水平、用免疫印迹方法在不同胰腺癌细胞系及正常胰腺导管上皮细胞中进行验证;利用慢病毒转染技术构建SKA1稳定敲减和过表达的胰腺癌细胞株;利用免疫荧光方法检测PDAC细胞内SKA1敲低或过表达对高尔基体结构的影响,及Cdc42抑制剂ZCL278对高尔基体结构变化的调控;并利用Transwell实验及细胞划痕实验检测ZCL278对SKA1促癌作用的影响;应用免疫印迹方法检测SKA1及Cdc42表达对自噬标志物的影响。结果:在胰腺导管腺癌组织与细胞中SKA1与Cdc42表达均显著高于正常组织或细胞,且二者表达呈显著正相关;并且发现SKA1低表达的患者具有更长的总体生存期,而Cdc42表达高低与总体生存期无关。接着我们发现SKA1可促进PDAC细胞内高尔基体堆叠,并且在SKA1过表达的细胞中Cdc42抑制剂ZCL278可以抑制这种堆叠现象。进一步我们发现抑制Cdc42可逆转SKA1过表达对胰腺癌侵袭与转移的促进效应,具有统计学差异,而在SKA1非高表达的细胞中无显著差异,最后我们发现Cdc42可受SKA1的表达调控诱导PDAC细胞发生自噬。结论:SKA1通过调控Cdc42介导的高尔基体致密堆叠进而影响胰腺癌发生自噬,最终促使胰腺癌细胞迁移和侵袭。