妊娠期糖尿病大鼠胰腺组织中p-PERK、ATF4和CHOP蛋白的表达

目的:探讨磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(p-PERK)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、ATF4蛋白的表达与高脂高糖诱导的妊娠期糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的关系。方法:30只雌性SD大鼠分为模型组(高脂高糖喂养)和对照组(普食喂养),每组15只,妊娠第21天行静脉糖耐量及静脉胰岛素释放实验;取胰腺组织行HE染色和病理组织学观察,TUNEL法检测胰岛β细胞凋亡情况,免疫组化法检测胰腺组织中p-PERK蛋白的表达,Western blot检测胰腺组织中ATF4及CHOP蛋白的表达。结果:模型组大鼠第一时相胰岛素分泌受抑制,胰岛素分泌峰值延迟;病理组织学可见模型组大鼠胰岛形态欠规则,数目减少不明显,部分细胞空泡变性,毛细血管扩张、充血,有出血发生。模型组大鼠胰腺组织细胞凋亡率较对照组升高(t=21.164,P<0.001)。与对照相比,模型组大鼠胰腺组织p-PERK、ATF4及CHOP蛋白表达水平明显升高(t=44.178、49.249、39.664,P<0.001);模型组大鼠胰腺组织中ATF4与CHOP蛋白的表达呈正相关(r=0.810,P=0.004)。结论:PERK、ATF4可能参与妊娠期糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的发生。

妊娠期糖尿病大鼠胰腺组织中GRP78、TRAF2、Caspase-12蛋白的表达

目的:探讨内质网应激(ERS)及肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)、Caspase-12与妊娠期糖尿病(GDM)的关系。方法:60只健康雌性SD大鼠随机分为4组:高脂高糖饮食受孕组(HP)、高脂高糖饮食未孕组(HV)、普通饮食受孕组(NP)、普通饮食未孕组(NV),分别给予相应处理。测定妊娠末期空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、血脂,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),采用HE染色观察胰腺组织形态学改变,TUNEL法检测胰岛细胞凋亡指数(AI),免疫组化法测定GRP78表达,Western blot法测定TRAF2、Caspase-12蛋白表达。结果:妊娠和高脂高糖饮食均可使大鼠FBG、FINS、HOMA-IR和血脂升高,二者具有协同作用(P<0.05)。妊娠第21天时,HP组胰岛出现不同程度萎缩,细胞数量明显减少,可见核固缩和核裂解;妊娠、高脂高糖饮食均可导致大鼠胰腺组织中GRP78、TRAF2、Caspase-12表达升高,并且二者具有协同效应(P<0.05)。结论:妊娠和高脂高糖饮食均参与了ERS,ERS可能通过TRAF2-Caspase-12信号通路诱导胰岛细胞凋亡,继而参与GDM的发生发展。

阿托伐他汀对局灶性脑缺血大鼠脑组织血管新生的影响

目的观察阿托伐他汀对局灶性脑缺血大鼠脑组织血管新生的影响并探讨相应机制。方法选用雄性SD大鼠90只，按照随机数字表法分为假手术组、模型组、治疗组，每组再分为3个亚组：1d组、3d组、7d组，每亚组10只。模型组及治疗组大鼠按照大脑中动脉栓塞法制备局灶性脑缺血模型，假手术组只分离血管，不结扎，不插线。建模后3h，治疗组给予阿托伐他汀钙片4mg／（kg·d）灌胃，其余2组在相应时间给予等量生理盐水灌胃。大鼠建模后3h及给药后1d、3d、7d给予神经功能评分；同时间点采用免疫组化染色法检测新生血管内皮细胞标志物CD105、葡萄糖调节蛋白78（GRP78）：RT-PCR检测血管内皮细胞生长因子（VEGF）mRNA；Western blotting检测凋亡蛋白Caspase-12。结果（1）模型组和治疗组大鼠建模后3h神经功能评分差异无统计学意义（P〉0．05），其余时间点评分差异均有统计学意义（P〈0．05）。（2）各时间点模型组大鼠微血管密度均较假手术组大鼠增加，治疗组大鼠均较模型组大鼠增加，差异均有统计学意义（P〈0．05）。（3）VEGF mRNA表达随时间延长逐渐升高：各时间点模型组大鼠均较假手术组大鼠表达增加，治疗组大鼠均较模型组大鼠表达增加，差异有统计学意义（P〈0．05）。（4）GRP78、Caspase-12表达随时间延长逐渐降低；各时间点模型组大鼠均较假手术组大鼠表达增加，治疗组大鼠均较模型组大鼠表达降低、较假手术组表达增加，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论局灶性脑缺血大鼠脑组织血管新生明显，且阿托伐他汀可增强此效应，其机制可能为减弱内质网应激，减少内皮细胞凋亡。