贵州杂交黄牛MSTN基因cDNA克隆、生物信息学及多态性分析

为比较贵州杂交黄牛肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)性质、结构和多态性与本地黄牛的差别,该研究先通过RT-PCR克隆MSTN基因cDNA并进行生物信息学分析,再通过PCR-SSCP结合直接测序法筛查贵州本地黄牛和杂交黄牛MSTN基因外显子多态性。结果在贵州杂交黄牛MSTN基因CDS区序列发现4个突变位点,其中3个为错义突变:76 bp处G/A替换,引起天冬酰胺变为天冬氨酸;79 bp处G/A替换,引起丝氨酸变为甘氨酸;1066 bp处G/A替换,引起谷氨酸变为赖氨酸。267 bp处G/A替换与525 bp处A/G替换,为同义突变。MSTN蛋白基本理化性质和结构与普通牛基本一致,但有细微的差别;通过基因同源性和系统进化树,结合motif、蛋白保守域和结构域分析,可知MSTN基因在哺乳动物中高度保守,但也存在遗传多样性。贵州本地黄牛外显子发现3个SNP位点,分别为g.6279107 G>C、g.6281238 T>C和g.6283933 A>C,贵州杂交黄牛中未发现多态位点。单倍型分析共发现6种单倍型和14种双倍型,双倍型H3H5频率最高,且杂交牛的双倍型均为H3H5,之后可一步将此与生长性状进行关联分析研究。

低钙性笼养蛋鸡骨质疏松症PTH、CT及E_2的变化

将 1 8 0只 1 9周龄伊莎笼养蛋鸡随机均分为对照 ( A)、低钙 ( B)、低钙 ( C)、低钙 ( D) 4组 ,分别饲喂钙含量为 3.55%、2 .50 %、2 .0 5%、1 .2 7%的日粮 ,定期用放射免疫分析法检测血清甲状旁腺素 ( PTH)、血清降钙素 ( CT)和血清雌二醇 ( E2 )。结果显示 ,日粮钙含量越低的组 ,骨质疏松越明显 ,其 PTH和 CT上升越明显 ,而 E2 下降越明显。结论

SPA活体测定蛋鸡胫骨骨矿含量方法及其重复性、准确度的探讨

单光子吸收法 (SPA)是活体测定人或动物骨矿含量的非侵入性方法之一。用SPA活体测定蛋鸡胫骨骨矿含量 ,探讨其测定方法的可行性、重复性及准确度。结果表明 ,以胫跖关节内侧隆起作为定位标志 ,并以距此标志 3cm处作为胫骨骨矿含量的测试部位较为理想 ,其重复性 (CV)为 7 90 % ,准确度为 2 633% (r=0 992 6,P <0 0 1 )。本试验所建立的方法 ,为研究禽类骨骼代谢疾病 (如笼养蛋鸡骨质疏松症 )奠定了基础。

贵州小香羊FSH-β基因部分序列的RFLP多态性

为寻找与小香羊繁殖力相关的分子标记提供基础数据和科学依据,以贵州小香羊为试验材料,颈静脉采血后,提取血液全基因组DNA,根据NCBI Gene Bank山羊FSH-β基因序列(S64745.1)设计引物,采用限制性内切酶片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP)方法对FSH-β基因内含子1与内含子2的序列进行多态性检测。结果表明:在两段特异性扩增产物中存在限制性酶切位点,不存在RFLP多态性。

贵州黑山羊和黔北麻羊MSTN基因DraI酶切多态性分析

以贵州黑山羊和黔北麻羊为材料,根据山羊MSTN基因序列(GenBank登录号:EF588035)设计1对引物,用PCR-RFLP法对该序列进行多态性分析。结果表明:PCR扩增片段207 bp处存在TTTTA的插入,导致出现1个DraI酶切多态性位点,黑山羊纯合野生型(AA)为优势基因型,杂合型(AB)和纯合突变型(BB)为非优势基因型,A等位基因为优势基因;黔北麻羊纯合野生型(CC)为优势基因型,杂合型(CD)和纯合突变型(DD)为非优势基因型,C等位基因为优势基因。

贵州小香羊MSTN基因内含子2和外显子3的多态性

为贵州小香羊选育及进一步研究MSTN基因与贵州小香羊生长性状的相关性提供理论依据,采用PCR-RFLP方法对67只贵州小香羊MSTN基因内含子2和外显子3进行了多态性分析。结果表明,所扩增内含子2中存在Bsp1286I酶切多态位点,杂合型(AB)为优势基因型,无纯合野生型(AA)和纯合突变型(BB);所扩增内含子2和外显子3中存在BstBI酶切多态位点,杂合型(CD)为优势基因型,纯合野生型(CC)和纯合突变型(DD)为非优势基因型,D等位基因为优势基因,且含有2个TatI正常酶切位点,但不存在多态性,不存在BsmFI酶切位点。

贵州规模养殖场黑山羊主要疫病的血清学调查

了解贵州规模黑山羊养殖场疫病的防控情况,为建立无重大疫病黑山羊养殖场提供参考,采用凝集试验、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验方法对随机采集的83份黑山羊血清样品进行羊布鲁氏杆菌、羊传染性胸膜肺炎、口蹄疫、山羊痘血清学调查。结果表明,83份黑山羊血清样品的布鲁氏杆菌病平板凝集试验的阳性率为13.25%,试管凝集试验的阳性率为10.84%;羊传染性胸膜肺炎MMC血清的抗体阳性率为6.94%,MO血清抗体阳性率为8.33%;O型口蹄疫血清抗体阳性率为15.28%,亚洲Ι型口蹄疫血清抗体阳性率为11.11%,A型口蹄疫血清抗体阳性率为0,口蹄疫隐性感染阳性率为0;山羊痘抗体阳性率为61.11%。结论:调查的黑山羊群存在不同程度的布氏杆菌和传染性胸膜肺炎病原感染,口蹄疫和山羊痘的免疫情况不太理想,需要加强相关免疫,及时淘汰布氏杆菌感染羊只或隔离治疗传染性胸膜肺炎病原感染羊只。

已烯雌酚对贵州香猪睾丸一氧化氮合成酶活性的影响

采用比色法测定已烯雌酚(diethylstilbestrol,DES)对性未成熟贵州香猪睾丸一氧化氮合成酶(Nitrioxide syn-thase,NOS)活性的影响.结果表明:DES能够使贵州香猪睾丸一氧化氮合成酶(Nitrioxide synthase,NOS)活性显著增强(p<0.01).睾丸中NOS和cNOS的活性在DES用量为0.3 mg/kg时最强(p<0.01);当增大到3 mg/kg用量时,二者活性又降低(p<0.01).诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的活性在DES为0.03 mg/kg时最强(p<0.01);当DES在0.3 mg/kg和3 mg/kg时,其活性显著降低(p<0.01).DES使附睾中NOS活性显著减弱(p<0.01),随着DES用量的增多,附睾中NOS活性增强.主要表现在对结构型一氧化氮合成酶(cNOS)活性有显著增高作用(p<0.01),但其活性还是低于对照组(p<0.01).研究结果认为DES能增强性未成熟贵州香猪睾丸中NOS的活性而抑制附睾中NOS的活性.

雷山小香羊促黄体素β亚基基因SphⅠ酶切多态性分析

为了给雷山小香羊品种遗传资源的合理利用及进一步选育提供科学依据,同时为更全面地了解其种质特性提供基础性资料,利用PCR-RFLP技术对67只雷山小香羊促黄体素β亚基基因进行了SphⅠ内切酶酶切位点多态性分析。结果表明,所扩增的促黄体素β亚基基因序列中仅有1个SphI酶切位点,且不具有多态性。

黔北麻羊MSTN基因的多态性分析

为给黔北麻羊品种遗传资源的保护及进一步选育提供科学依据,利用BsmAI、MspI、EcoRI、MvaI、XmnI、MnII等6种限制性内切酶对黔北麻羊MSTN基因部分内含子1、2和外显子2进行PCR-RFLP多态性分析。结果表明:在扩增的MSTN基因1 241bp序列中含有BsmAI、EcoRI、MvaI和MnII 4个酶切位点,但均不具有多态性;未发现MspI和XmnI酶切位点。

上海地方猪种抗腹泻基因与免疫相关因子分析

为鉴定上海地方猪种上海白猪、枫泾猪和沙乌头猪中抗腹泻基因抗原加工相关转运体1(transporterassociated with antigen processing 1, TAP1)、α(1, 2)岩藻糖转移酶1[α (1, 2)-fucosyltransferase 1, FUT1]、天然抗性相关的巨噬细胞蛋白1(natural resistance-associated macrophage protein 1, NRAMP1)、黏蛋白4(mucin 4,MUC4)和黏蛋白13(mucin 13, MUC13)基因的有效遗传标记,为上海地方猪种资源特性提供参考,应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism, PCRRFLR)和序列测序分析上述基因的多态性,结合部分免疫相关因子,探讨对3个上海地方猪种免疫力的影响。结果显示,3个猪种中TAP1和MUC4基因均具有抗腹泻基因型GG,而仅在枫泾猪和沙乌头猪中检测到MUC13基因抗腹泻基因型GG,在3个猪种中均未检测到FUT1和NRAMP1基因抗腹泻基因型AA。上海白猪、枫泾猪和沙乌头猪TAP1基因处于中度多态,上海白猪的MUC4基因处于低度多态,枫泾猪和沙乌头猪的MUC4基因处于中度多态,上海白猪MUC13基因处于中度多态,其中上海白猪和沙乌头猪的TAP1基因不满足HardyWeinberg平衡,枫泾猪的MUC4基因不满足Hardy-Weinberg平衡。上海白猪MUC13基因AA型的白细胞介素12(interleukin-12, IL-12)水平显著高于AG型,枫泾猪TAP1基因AA型的肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor, TNF-α)指标显著高于GG和AG型,沙乌头猪TAP1基因AG型的IL-12指标显著高于GG型。以上研究结果对上海白猪、枫泾猪和沙乌头猪的抗腹泻育种和分子选育具有一定指导意义,为今后上海各地方猪种抗腹泻育种工作奠定了基础。

山羊支原体、革兰氏阳性杆菌、附红细胞体混合感染的实验室诊断

为查明某养殖小区饲养山羊的死亡原因,采集13份病羊的血清、2头病死羊的内脏病料和血涂片进行实验室检测诊断。结果:布鲁氏杆菌虎红平板凝集试验阳性率为0%(0/13);羊口蹄疫病毒非结构蛋白抗体阳性检出率为0%(0/13);山羊痘病毒血清免疫抗体阳性检出率为61.5%(8/13);山羊支原体阳性检出率为100%(2/2);姬姆萨染色镜检可见边缘不整齐的红细胞;细菌分离培养、革兰氏染色镜检出革兰氏阳性杆菌,分离细菌对氟苯尼考、利福平、多西环素敏感。结果表明:养殖小区山羊死亡原因是由山羊支原体、革兰氏阳性杆菌、附红细胞体混合感染所致。

雌激素及其受体对雄性哺乳动物生殖的作用

对雌激素及雌激素受体(ERs)在雄性动物生殖器官中产生、表达部位,ERs的结构,ERs在雄性生殖系统中的分布、作用机理和在生殖中的作用进行概述,以期能对同类研究提供参考依据。

中药治疗猪传染性胃肠炎的研究概况

本文通过对猪传染性胃肠炎的流行特点、临床症状、病理变化、临床诊断和中药治疗及其作用进行了阐述,经查阅大量资料的结果表明,中药治疗猪传染性胃肠炎效果较好、安全低毒、残留低、无耐药性。值得同行和养猪人员试验和推广。

十溴联苯醚暴露对肉鸡生长性能、血液生化指标、氧化应激及肝脏损伤的影响

为研究十溴联苯醚(BDE-209)对肉鸡生长性能、血液生化、氧化应激和肝脏损伤的影响,试验随机选取150只1日龄AA雄性肉鸡,随机分为5组,每组6个重复,每个重复5只鸡。对照组每天饲喂标准基础日粮,其他四组在基础日粮中分别添加0.004、0.04、0.4和4 g/kg BDE-209。试验期42 d。检测生长性能、器官指数、肝脏组织病理、血常规、血液生化及抗氧化等指标。结果显示:在BDE-209作用下,肉鸡的初始重、末重、平均日增重、日耗料量和料肉比等指标无显著变化。0.4 g/kg组肝脏器官指数显著降低,其他组织器官无显著变化;0.4和4.0 g/kg组肝脏组织中多见炎性细胞浸润、肝细胞水肿和胞质疏松等。与对照组相比,0.4 g/kg处理组白细胞计数(WBC)水平明显降低,4.0 g/kg处理组的血小板计数(PLT)水平也显著性降低;此外,0.4 g/kg和4.0 g/kg组天冬氨酸转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)及血清肌酸酐(CRE)水平显著升高,0.4 g/kg组谷氨酰胺转化酶(GGT)水平较对照组显著上升。血液氧化应激指标显示0.4和4.0 g/kg组总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性降低,0.04、0.4和4.0 g/kg组丙二醛(MDA)浓度升高。结果表明,BDE-209不影响肉鸡生长性能,高剂量BDE-209暴露会降低机体免疫机能,诱导炎症发生和氧化应激,损伤肝脏等组织器官。

多溴联苯醚在肝脏中的残留代谢及毒性作用研究进展

多溴联苯醚(polybrominated diphenyl ethers,PBDEs)是一类具有亲脂性、难降解、易沉积和高生物毒性的持久性有机污染物,在全球范围常被用作添加型溴代阻燃剂。近年来,PBDEs广泛暴露于环境介质和生命体内(植物、动物、人体)内,对生态环境和人类健康造成巨大的安全风险,引起机体多个器官的毒性作用。其中肝脏是PBDEs代谢及其毒性攻击的主要靶标器官之一,已有资料证明PBDEs易积聚在肝脏中,发生氧化脱溴、还原脱溴或CYP酶介导的生物转化等。故本文围绕PBDEs在肝脏中的污染暴露、代谢转化、毒性作用及致毒机理等方面进行综述,旨在为深入探索PBDEs的肝毒性相关研究提供科学的理论依据。

一例犬冠状病毒性腹泻的诊疗

犬冠状病毒性腹泻又称犬冠状病毒病,是由犬冠状病毒引起的一种临床上以呕吐、腹泻、脱水及易复发为特征的高度接触性传染病.该病对幼犬危害尤其严重,病死率很高,是目前对养犬业危害较大的疾病之一.本文通过对一例犬冠状病例的治疗,说明犬冠状防控的治疗方案、预防措施的制定与应用.