杆状病毒载体介导钠碘转运体基因放射治疗肝癌的实验研究

目的探讨以杆状病毒为载体、钠碘转运体(NIS)基因介导131I放射治疗肝细胞癌的可行性。方法通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统制备重组的绿色荧光蛋白(GFP)和NIS基因杆状病毒(Bac-GFP和Bac-NIS)。采用流式细胞仪检测在有无丁酸钠条件下HepG2细胞的感染效率和荧光表达强度,以及在高感染复数(MOI)杆状病毒条件下对HepG2细胞的毒性。进行Bac-NIS感染HepG2细胞的动态摄碘实验和高氯酸钠(NaClO4)摄碘抑制实验,以及Bac-NIS感染HepG2细胞的131I杀伤细胞克隆形成实验。结果 HepG2的感染效率和荧光强度随着Bac-GFP MOI的增加而增加,Bac-GFP对HepG2具有较高的感染效率(MOI=200时,感染效率为65%),丁酸钠可进一步提高HepG2的感染效率。在高MOI(MOI=400)条件下,未见Bac-GFP对HepG2的细胞毒性作用,与对照组(MOI=0)比较差异无统计学意义(P>0.05)。Bac-NIS感染的HepG2细胞表现出摄碘功能和NaClO4抑制的特性。细胞克隆形成实验表明,Bac-NIS感染的HepG2细胞克隆存活率明显低于Bac-GFP感染的HepG2细胞,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Bac-NIS可有效介导肝癌细胞的碘摄取,高效杀伤肿瘤细胞,为肝癌细胞的靶向基因放射治疗提供了实验基础。

重组杆状病毒载体介导报告基因在甲状腺癌细胞中的表达研究

目的探讨杆状病毒作为甲状腺癌基因转移和治疗载体的可行性。方法利用杆状病毒Bac-to-Bac表达系统制备携带绿色荧光蛋白(GFP)的重组杆状病毒(Bac-GFP)。分别以不同感染复数(MOI)的Bac-GFP感染滤泡状甲状腺癌细胞株FTC-133,流式细胞仪鉴定感染效率及GFP表达强度。以MOI为100的Bac-GFP感染FTC-133,荧光显微镜观察GFP表达持续时间;流式细胞仪检测不同浓度丁酸钠干预对感染效率及GFP表达强度的影响。MTT比色法检测不同MOI的Bac-GFP感染对FTC-133细胞存活的影响。结果成功制备重组杆状病毒载体Bac-GFP并感染FTC-133。感染效率随MOI的增加而提高;当MOI为100时,感染效率高达71.3%。丁酸钠可提高Bac-GFP对FTC-133的感染效率及GFP表达强度,但感染效率的提高无统计学意义。荧光显微镜观察显示,Bac-GFP感染FTC-133其GFP表达可持续2周。MTT检测显示,不同MOI的Bac-GFP感染FTC-133的细胞存活率比较差异无统计学意义(P>0 05)。结论重组杆状病毒Bac-GFP对FTC-133细胞具有较高的感染效率,报告基因表达时间较长且无明显细胞毒性,有可能成为甲状腺癌基因治疗的良好载体。

胰岛β细胞的分子核医学显像进展

糖尿病是严重威胁人类健康的常见病和多发病.糖尿病主要是由于胰岛β细胞选择性破坏或胰岛e细胞分泌胰岛素迟缓和胰岛素抵抗而使胰岛素相对不足所致.β细胞的数量只有减少50%～60%时才会出现相关的症状.由于胰腺位置较深,β细胞含量少,目前临床诊断主要采用有创性方法,且难于进行早期诊断.因此,通过无创性的方法进行β细胞相关代谢疾病的早期诊断,越来越受到人们的关注,影像学诊断也就成了关注焦点,但是如何进行β细胞数量和功能的评估仍是目前影像学诊断面临的重要课题.