嗜酸乳杆菌和青春双歧杆菌对牙周致病菌的拮抗作用

目的:研究体外共培养时,嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus,La)、青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescents,Ba)对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)、具核梭杆菌(Fusobacteriurn nuclearum,Fn)生长的作用,为牙周病生态防治提供实验依据。方法:La、Ba为作用菌,Pg、Fn为指示菌。采用杯碟法抑菌实验,观察抑菌圈形成情况。将指示菌菌液与作用菌无细胞提取液共培养2、6、24和48h,记录不同时间点菌液OD560值,了解作用菌代谢产物对指示菌的生长抑制作用。采用SAS9.0软件包对数据进行单因素方差分析。结果:杯碟法抑菌实验中,La仅对Pg的生长产生抑制作用,形成明显的抑菌圈。La无细胞提取液也能显著抑制Pg的生长(P<0.001)。Ba对2种牙周致病菌无拮抗作用。结论:La代谢产物中存在有效的抑菌物质,对Pg生长有显著拮抗作用,可望用于牙周生态防治。

新型高效AOS生物反应器处理畜牧场废水

介绍了新型生物反应器——ＡＯＳ污水处理系统的操作过程及现场运行结果。通过在香港元朗农场的现场运行结果表明，ＡＯＳ系统对高浓度猪场废水（ＢＯＤ５ ＞ ４ ０００ ｍ ｇ／Ｌ，ＴＳＳ＞ ２ ５００ ｍ ｇ／Ｌ）的ＢＯＤ５ 和ＴＳＳ去除率分别可达９８％ 和９７％ ，出水质量达到香港环保署制定的ＢＯＤ５ ＜ ５０ ｍ ｇ／Ｌ和ＴＳＳ＜ ５０ ｍ ｇ／Ｌ的直接排河标准。

鲜酵母中谷胱甘肽(GSH)分离纯化的初步研究

鲜酵母经醋酸溶液抽提后得含 GSH的抽提液。将对氨基苯汞乙酸连接到聚苯乙烯 -二乙烯基苯载体上 ,形成含有机汞的化学亲和树脂 ,用于吸附上述抽提液中的 GSH。以 0 .2 5mol/ L盐酸溶液进行洗脱 ,得到提纯的 GSH。 GSH用紫外分光光度法测定。样品的回收率为 83%。表明该方法是一种有效的分离纯化

酿酒酵母菌关键酶基因剔除对谷胱甘肽合成的影响

[目的]通过基因工程手段改良酿酒酵母菌以提高谷胱甘肽的产量。[方法]利用基因重组技术分别构建CYS3基因剔除菌和CYS4基因剔除菌,对比了野生菌与突变酵母菌的生长曲线,并定量检测2者中谷胱甘肽和氨基酸的含量,得出CYS3基因和CYS4基因剔除对谷胱甘肽和氨基酸代谢的影响程度。[结果]与野生菌株相比,CYS3基因剔除菌中谷胱甘肽含量降低了26.1%,CYS4基因剔除菌中谷胱甘肽含量提高了6.0%。[结论]综合CYS3和CYS4基因剔除和其他在谷胱甘肽代谢途径中关键酶基因剔除试验结果所得数据,可以建立酿酒酵母谷胱甘肽代谢网络系统生物学模型。

利用CRISPR/Cas9系统敲除大肠杆菌tnaA基因

大肠杆菌的tna A基因编码色氨酸酶,该基因的失活有利于大肠杆菌积累更多的L-色氨酸。利用CRISPR/Cas9系统介导的基因编辑技术对大肠杆菌tna A基因进行敲除。首先针对tna A基因设计CRISPR/Cas9作用靶点,构建gRNA表达质粒;随后人工设计同源修复供体基因序列,构建成完整的CRISPR/Cas9基因敲除系统;将该系统应用到大肠杆菌w3110-Δ中,经PCR和测序鉴定,证实目的基因tna A敲除成功,敲除效率75%。成功构建了大肠杆菌tna A基因敲除菌,为大肠杆菌L-色氨酸高产菌株的构建奠定了基础。

大肠杆菌BL21(DE3)氨基葡萄糖代谢调控相关基因的敲除及glmS在其中的表达研究

氨基葡萄糖(Glucosamine,GlcN)是一类广泛使用的保健品,对于人类软骨再生及关节炎的临床治疗都具有良好的疗效.为构建以代谢工程为基础的氨基葡萄糖生产菌株,采用λRed同源重组系统将大肠杆菌BL21(DE3)中甘露糖—磷酸转移酶系统操纵子(manXYZ)和乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)转运和代谢特异性系统操纵子(nagBACD-nagE)进行双剔除.随后构建含新型氨基葡萄糖合成酶基因(glmS)的表达载体pETG,并将它转化该双操纵子剔除菌株.结果表明,改造后的菌株不能以GlcN或GlcNAc作为碳源进行代谢生长.表达GlmS菌株的上清液经Ni-NTA亲和层析纯化,其酶活性达8.63U/mg,表明该菌株已具备发酵生产GlcN的初步特性.

天蓝色链霉菌产十一烷基灵菌红素的发酵条件优化

通过对天蓝色链霉菌(Streptomyces coelicolor ZB8)产十一烷基灵菌红素(Red)的摇瓶发酵条件进行的优化研究,初步确定了促使Red产率提高的培养基组成及培养条件,包括研究接种量、碳源、氮源、氨基酸、无机盐及初始pH等对Red合成的影响,并通过正交试验获得了最适培养基组组成.用该培养基培养Streptomycescoelicolor ZB8,经过5天发酵,Red色价可达309.3 U/mL,是未优化前Red色价(84.7 U/mL)的3.65倍.