雄性大鼠四肢骨生物力学性能增龄性变化

目的探讨雄性大鼠肱骨、股骨和胫骨生物力学性能增龄性变化规律及其在年龄推断中的应用价值。方法根据不同周龄,将90只健康雄性SD大鼠分为2、4、6、8、17、26、52、78和104周龄组,每组10只。过量麻醉处死大鼠后分离肱骨、股骨和胫骨并剔除附着软组织,利用游标卡尺测量上述骨骼长度及中段(受压部位)直径,利用电子万能材料试验机进行三点弯曲试验以检测极限载荷和极限载荷下位移。结果不同周龄组雄性大鼠肱骨、股骨和胫骨极限载荷组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。随着周龄增长,肱骨、股骨和胫骨极限载荷均呈先增大后减小趋势,且都在52周龄组达峰值,52周龄前与周龄呈强正相关(r=0.884、0.933、0.929,P<0.05)。极限载荷下位移除股骨组间差异有统计学意义外(P<0.05),肱骨、胫骨均无统计学意义。股骨极限载荷下位移与周龄呈弱正相关(r=0.406,P<0.05)。52周龄前大鼠肱骨、股骨、胫骨、3种骨骼综合极限载荷自动线性建模的年龄预测准确度分别为78.2%、86.8%、84.1%、88.3%。肱骨、股骨、胫骨长度与极限载荷呈强正相关(r=0.904、0.897、0.814,P<0.05)。肱骨、股骨、胫骨中段直径与极限载荷呈强正相关(r=0.759、0.814、0.745,P<0.05)。结论雄性大鼠肱骨、股骨和胫骨极限载荷随周龄增长先增大后减小,在52周龄前与周龄呈正相关,可用于年龄推断。3种骨骼极限载荷综合推断年龄准确度最高,其次为股骨。肱骨、股骨、胫骨长度/中段直径均与极限载荷呈强正相关。

基于双硫死亡的心肌缺血再灌注损伤相关风险基因筛选及分析

目的:筛选基于双硫死亡的心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)相关风险基因及探索其可能的作用途径。方法:用R语言limma分析并筛选MIRI相关风险基因24 h组与Control组之间的差异表达基因。基于GO和KEGG数据库利用R语言cluterProfiler包对其进行功能富集分析。根据双硫死亡基因集以及GSE160516的表达数据,利用R语言GSVA包中的ssgsea法对其进行富集分析,并利用Venn图获得心肌缺血再灌注中双硫死亡相关基因的表达。用R语言psych包中的corr.test计算双硫死亡相关基因与凋亡因子、线粒体、铁死亡及炎症等相关基因的相关性,并绘制热图。利用R语言Mfuzz包来进行不同时间点心肌缺血再灌注转录组数据的表达模式聚类分析并利用Venn图获取时序性差异表达的双硫死亡基因。结果:本研究共筛选出17个差异表达双硫死亡相关基因,经过双硫死亡相关基因与炎症、凋亡、铁死亡、线粒体基因相关性分析,以及双硫死亡相关基因与心肌缺血再灌注时序性分析的差异表达基因筛选,最终得到双硫死亡相关基因Flna、Myl6、Tln1在MIRI不同时间的特异性表达。结论:Flna、Myl6、Tln1在MIRI中可能起着关键作用,其基于双硫死亡同时与线粒体相关基因密切相关,可作为MIRI患者风险因素的筛选指标。

冠状动脉粥样斑块内CD45表达水平与病灶结构变化的关系

目的通过检测冠状动脉粥样硬化病灶内CD45蛋白表达水平,分析其与病灶结构变化的关系,探讨CD45在人冠状动脉粥样硬化病灶发生发展中的作用。方法收集贵州医科大学法医司法鉴定中心司法鉴定中尸体检验及组织学检查确认有冠状动脉粥样硬化病例的冠状动脉组织,根据冠状动脉病变情况将其分为对照组、单纯动脉粥样硬化组(单纯As组)和动脉粥样硬化并继发病变组(As并继发病变组),常规石蜡切片HE染色观察各组冠状动脉的组织结构,免疫组织化学染色法、蛋白免疫印迹法及实时荧光定量PCR检测CD45蛋白的表达分布及水平,分析CD45表达水平与粥样硬化病灶结构变化的关系。结果与对照组比较,有动脉粥样硬化及并发继发病变的冠状动脉斑块内纤维帽厚度变薄,病灶厚度、坏死灶厚度及血管腔面积增加(P均<0.05)。与对照组比较,有动脉粥样硬化及并发继发病变的血管组织CD45蛋白表达显著升高(P<0.05),且As并继发病变组显著高于单纯As组(P<0.05)。与对照组比较,有动脉粥样硬化及发生继发病变的冠状动脉病灶内CD45的表达显著升高(P<0.05),且As并继发病变组显著高于单纯As组(P<0.05),CD45阳性蛋白表达主要分布于斑块肩部和底部的白细胞(棕黄色着色)。与对照组比较,有动脉粥样硬化及并发继发病变的血管组织CD45 mRNA表达显著升高(P<0.05),且As并继发病变组显著高于单纯As组(P<0.05)。病灶内CD45表达水平与病灶结构变化具有相关性。结论人冠状动脉粥样斑块内CD45分子作为炎症反应的标志物,其表达水平反映病灶内的炎症反应程度,而病灶内炎症反应程度能影响病灶结构,从而导致斑块稳定性改变。

酒精对小鼠海马组织树突棘形态可塑性及记忆功能的影响

目的探讨酒精对小鼠海马组织树突棘形态可塑性及记忆功能的影响。方法15只野生型C57BL/6雄性小鼠随机分成对照组(Control,Con组)、单纯酒精处理组(Ethanol,Et组,给予小鼠20%乙醇2 mL/kg、每天1次,持续2周)及EHOP016治疗组(Et+EHOP016组,给予小鼠20%乙醇2 mL/kg后,立即灌胃EHOP016、持续2周),采用Morris水迷宫实验检测小鼠记忆能力,卢色黄胞内注射检测小鼠海马区域树突棘数量,免疫蛋白印迹法检测小鼠海马脑区Ras相关的C3肉毒杆菌毒素底物1-三磷酸鸟苷(Rac1-GTP)、C3肉毒杆菌毒素底物1总蛋白(Total Rac1)、突触素I(Synapsin I)、突触体素(Synatophysin)和突触后致密蛋白95(PSD95)表达。结果与Con组比较,乙醇处理可明显激活海马Et组小鼠树突棘数量减少、Synapsin I及Synatophysin水平降低,水迷宫实验显示小鼠记忆能力降低;与Et组比较,EHOP016组小鼠海马组织Rac1-GTP水平明显降低、减轻酒精导致的小鼠记忆能力的损伤、抑制酒精导致的成熟型树突棘数量的减少、上调酒精导致的突触相关蛋白的减少。结论酒精可能通过激活Rac1来减少树突棘数量,从而导致记忆功能损害。

人冠状动脉粥样硬化斑块内YKL-40、CXCL2、IFN-γ的表达及其与冠心病猝死的关系

目的 探讨YKL-40及其下游炎症信号分子γ干扰素(interferon-γ, IFN-γ)、CXCL2在人冠状动脉粥样硬化斑块内的表达及其与冠状动脉粥样硬化斑块结构、冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary heart disease, CHD)引起猝死的关系。方法 筛选尸检案例库中心脏冠状动脉标本66例,分为3组:CHD组24例、CHD猝死组24例、对照组18例。测量冠状动脉内膜(含病灶)厚度、纤维帽厚度、坏死灶厚度及血管腔狭窄程度4个形态学指标综合评价血管结构;检测冠状动脉粥样硬化斑块内YKL-40及其下游信号分子CXCL2、IFN-γ的表达水平及分布特点;分析冠状动脉粥样硬化斑块内YKL-40表达与冠状动脉粥样硬化斑块结构指标间的相关性,探讨其与SCD的关系。结果 同对照组比较,CHD组和CHD猝死组冠状动脉粥样硬化病灶的内膜厚度和坏死核心增厚、纤维帽变薄、血管狭窄程度增高(P<0.01)。CHD组和CHD猝死组冠状动脉血管YKL-40、CXCL2及IFN-γ的蛋白表达量明显高于对照组,而CHD猝死组高于CHD组(P<0.01)。CHD组和CHD猝死组冠状动脉内膜病灶内YKL-40表达的平均光密度值与内膜厚度、坏死灶厚度及管腔狭窄程度呈正相关(r=0.969,P<0.001;r=0.780,P<0.001;r=0.833,P<0.001),而与纤维帽厚度呈负相关(r=-0.916,P<0.001)。CHD组和CHD猝死组冠状动脉内膜病灶内YKL-40蛋白表达平均光密度值与CXCL2蛋白表达平均光密度值呈正相关(r=0.983,P<0.001),与IFN-γ蛋白表达平均光密度值呈正相关(r=0.973,P<0.001)。结论 人冠状动脉粥样硬化斑块内YKL-40表达水平增加,其表达水平与冠状动脉粥样硬化不稳定性事件的发生有关,其机制可能是通过调节CXCL2和IFN-γ的表达来发挥作用。

人冠状动脉内半乳糖凝集素3水平与斑块稳定性的相关性研究

目的:探讨人冠状动脉粥样斑块内半乳糖凝集素3(galectin-3)的表达水平与斑块结构及稳定性的关系。方法:收集尸检案例的冠状动脉标本84例,其中动脉粥样硬化但非冠心病猝死者22例(A1组),冠心病猝死但不伴有继发病变者20例(A2组),冠心病猝死且伴有继发病变者24例(A3组),无心脏疾病死亡者18例作为正常对照组(control组)。所有冠状动脉行常规HE染色检测内膜厚度、坏死核心厚度、纤维帽厚度和血管狭窄程度;以单核巨噬细胞表面标志物CD68标记病灶内的单核-巨噬细胞并计数,采用免疫组织化学、Western blot及RT-qPCR法检测冠状动脉组织中galectin-3、CD68和基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达,并分析其表达与斑块结构及其稳定性的关系。结果:同正常组比较,病变各组粥样硬化病灶内的内膜和坏死核心增厚,纤维帽变薄,血管狭窄程度增高(P<0.05);病灶内泡沫细胞数量增多(P<0.05);病灶内galectin-3、CD68和MMP-2蛋白及mRNA水平较正常组显著升高,且在A1组、A2组和A3组中呈递增趋势(P<0.05);病灶内galectin-3、CD68和MMP-2的表达与内膜厚度和坏死灶厚度呈正相关,与纤维帽厚度呈负相关。结论:人冠状动脉粥样硬化病灶内galectin-3表达升高,并与斑块结构稳定性相关。

人冠状动脉粥样硬化病灶内CD40L水平与病灶结构变化的关系

目的观察人冠状动脉粥样硬化病灶结构变化、CD40L、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达水平,探讨CD40/CD40L信号在人冠状动脉粥样硬化发生发展中的作用。方法收集不同程度粥样硬化的人冠状动脉血管60例作为实验组,以12例无病变的人冠状动脉为对照组,常规HE染色观察两组人群冠状动脉的组织结构并用图像分析软件检测病灶结构的相关指标,免疫组织化学染色检测CD40L、MMP-9蛋白表达水平,分析CD40L、MMP-9表达水平与动脉硬化病灶结构变化之间的关系。结果发生粥样硬化的冠状动脉CD40L表达均增强,其表达主要分布于斑块肩部和底部的泡沫细胞。同时病灶内MMP-9表达水平增高并与CD40L水平、病灶大小尤其是坏死灶的大小呈正相关,MMP-9表达水平与纤维帽厚度无明显相关性。随着MMP-9水平增高,纤维帽厚度/内膜最大厚度比值降低。结论人冠状动脉粥样硬化病灶内CD40L、MMP-9表达水平明显增强,CD40L可能通过促进MMP-9表达,使血管病灶内细胞外基质分解加强,从而促进病变的进展及坏死灶的扩大,使粥样病灶稳定性下降。

大鼠颅骨材料力学和骨质参数的增龄性变化

目的通过检测大鼠颅骨材料力学和骨质参数,探讨二者关系及其与年龄的相关性。方法48只健康雄性SD大鼠按年龄分为2、4、6、8、17、26、52和104周龄组,每组6只。利用KDⅡ-0.2型微机控制电子万能试验机压缩右侧颅盖骨检测其材料力学参数(极限载荷、压缩强度、压缩模量),之后分离颅骨骨片进行Micro-CT系统扫描,检测骨质参数(颅骨厚度、骨密度、骨体积、骨小梁厚度)。结果各组大鼠颅骨极限载荷、压缩强度和压缩模量组间差异均具有统计学意义(P<0.05),在26周范围内与年龄呈正相关(P<0.05)。大鼠颅骨厚度、骨密度、骨体积和骨小梁厚度组间差异均具有统计学意义(P<0.05),在52周内与年龄均呈正相关(P<0.05)。各材料力学参数与骨质参数呈正相关(P<0.05)。结论大鼠骨质参数(颅骨厚度、骨密度、骨体积、骨小梁厚度)和颅骨材料力学参数(极限载荷、压缩强度、压缩模量)在一定范围内与年龄呈正相关关系,可用于年龄推断。

大鼠颅骨材料力学和骨质参数的增龄性变化

目的通过检测大鼠颅骨材料力学和骨质参数,探讨二者关系及其与年龄的相关性。方法48只健康雄性SD大鼠按年龄分为2、4、6、8、17、26、52和104周龄组,每组6只。利用KDⅡ-0.2型微机控制电子万能试验机压缩右侧颅盖骨检测其材料力学参数(极限载荷、压缩强度、压缩模量),之后分离颅骨骨片进行Micro-CT系统扫描,检测骨质参数(颅骨厚度、骨密度、骨体积、骨小梁厚度)。

基于整合式与递进式的法医病理学PBL教学改革探索

传统的“以学科为中心”的教学方法较难全面地反映法医病理学的教学特点及实践性特点。以学生为中心的教学思路以解决司法鉴定实际问题为主要教学目标,教学中融入整合医学理念并侧重递进式教学,循序渐进地增加学科的知识难度,从而使学生从单纯地接受基础医学知识到能够解决复杂的司法鉴定实际问题。本课题拟探索基于整合式与递进式的 PBL 教学法在法医病理学教学中的应用,以适应素质教育的要求,也为其他院校深化教学改革提供可借鉴的经验。

法医病理学PBL教学的课程设计与教案编制

死亡原因分析是法医学实践中最常面对也是最基础的工作内容。在以问题为基础的学习(problem-based learning,PBL)教学目标问题设计时,应以死亡原因分析为主线,兼顾其他相关问题。PBL课程案例选择要以目标问题为中心;同时考虑解决这些问题所用的法医病理专业理论知识点,使学生通过解决案例的问题切实学到专业理论知识;此外,还应考虑案例难易度、资料的趣味性、结论的明确性等。法医病理学PBL课程的环节包括通过案例提出目标问题,学生自主学习和探索解决问题,共同讨论获得目标问题答案。可根据每环节中的问题或知识点分成几幕,每幕以一个小问题引出一个或几个知识点,充分引导学生在解决问题中学习知识。教师的工作重点是把控学生工作方向,掌握学生能力状态,平衡学生机会等,以推动课程顺利实施并达到教学目的。

整合医学与整体医学理念在法医病理学死因分析教学中的应用研究

本文结合法医病理学的特点,阐释了整体医学与整合医学的概念、内涵及其在法医病理学教学中的优势。然后,通过具体的死因分析实践案例教学过程设计及效果分析的应用介绍,阐明了整合医学与整体医学应用于法医病理学教学的必要性及有效性,为法医病理学整体教学的改革提供了新思路。