耐药乳腺癌免疫治疗的实验研究

目的:探讨耐药乳腺癌抗原负载的树突细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)联合培养后对同种乳腺癌荷瘤小鼠的可能治疗机制。方法:分离健康人外周血获得单个核细胞,分别诱导为DC和CIK细胞,将人类乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR细胞的冻融物抗原冲击DC(AP-DC),分别将DC与CIK细胞共培养(AP-DC+CIK组、DC+CIK组),将细胞经尾静脉注入裸鼠体内,观察不同组荷瘤标本中MDR1的表达、肿瘤细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达。结果:AP-DC+CIK组、DC+CIK组、CIK组及生理盐水组MDR1/β-actin比值分别为0.14、0.57、0.81及0.98。生理盐水组、CIK组、DC+CIK组和AP-DC+CIK组平均凋亡指数差异有统计学意义(P<0.001)。各组Bcl-2及Bax蛋白表达的OD值差异有统计学意义(P<0.01),Bcl-2/Bax值AP-DC+CIK组<DC+CIK组<CIK组<生理盐水组。结论:经耐药乳腺癌抗原负载的DC与CIK共同作用后,诱导同种乳腺癌细胞凋亡强于单纯DC与CIK共同作用后及单独CIK的治疗效果。

HDAC6与P21^(WAF1)在胃癌组织中表达及意义

目的:探讨HDAC6与P21^(WAF1)在胃癌发生、发展中的作用及其相关性,为胃癌的早期诊断、治疗和判断预后提供依据。方法:应用SP免疫组化法分别检测40例胃癌、30例癌前病变组及32例正常胃黏膜组中H)AC6及P21^(WAF1)蛋白的阳性表达情况。结果:HDAC6组织表达阳性率在胃癌,癌前病变及正常对照组依次降低,分别为65.0%,43.3%,15.6%(P<0.01),P21^(WAF1)组织表达阳性率在胃癌,癌前病变及正常对照组依次升高,分别为45.0%,63.3%和81.3%(P<0.01)。HDAC6的表达在分化程度越低、分期越高和淋巴结转移胃癌组织中显著升高(P<0.05);P21^(WAF1)蛋白阳性表达则相反,在分化程度越低、分期越高和淋巴结转移胃癌组织中显著降低(P<0.05)。胃癌组织中HDAC6与P21^(WAF1)的表达呈负相关(r-0.495,P<0.01);癌前病变、黏膜组织中HDAC6与P21^(WAF1)的表达呈负相关(r=-0.451,P<0.05)。结论:HDAC6与P21WAF1的异常表达可能与促进胃癌的发生、发展和浸润转移有关。HDAC6可能通过下调P21^(WAF1)的表达,导致并促进胃癌的发生发展。HDAC6和P21^(WAF1)可能作为胃癌诊断和预后判断的指标及胃癌治疗的新靶点。

快速石蜡切片在病理诊断中的作用

目的:快速石蜡切片是病理诊断中的一个特殊领域,它要求病理医师在15分钟内做出准确病理诊断,从而及时为正在手术中的外科医师提供手术切除范围的依据。方法及结果:复习1992-2000年病理资料,快速石蜡切片101例,并留快速石蜡剩余标本及术后标本做常规石蜡切片进行病理诊断对照确诊率100%。

淋巴结滤泡树突细胞肉瘤1例

患者男性，53岁。发现颈右侧-粟粒大小肿物20余天。查体：颈右侧胸锁乳突肌前缘深部可触及一肿物，2cm×2cm大小，质硬，表面光滑，与周围组织分界尚清，活动度差。颈部CT示右侧胸锁乳突肌前缘可见稍低密度结节影，形态不规则，大小2cm×2cm，边界清。彩色超声示右颈颌下可见2．3cm×2．4cm×1．9cm低回声结节，边界清，周边及内部血流较丰富。术中见距下颌骨约4cm处的中下肌层内可触及一肿物大小2cm×2cm，质硬，有包膜，与周围组织分界清。

病理科医技人员健康状况的初步调查

病理科医技人员在日常工作中暴露于多种有害化学物质，健康状况值得关注。笔者于2014年10月以天津市6家综合性医院的132名病理科医技人员为调查对象（病理组），选择其他临床科室176名非病理专业医务人员为对照组。以2014年6家医院定期健康体检资料为基础，结合病理科医技人员常暴露于多种有害化学物质的职业暴露特征，对嗅觉障碍、眼痒、皮疹及红斑、经常打喷嚏、流涕、咽喉干痒等进行问卷调查。

山药提取物联合DC-CIK细胞疗法对结肠癌HT29干细胞荷瘤裸鼠的体内抗肿瘤研究

目的观察山药提取物联合树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞(DC-CIK)疗法对结肠癌HT29细胞干细胞荷瘤裸鼠的治疗效果。方法建立Balb/c裸鼠结肠癌干细胞荷瘤模型,随机分为4组,对照组、DC-CIK组、山药提取物组、山药提取物联合DC-CIK组(联合治疗组),每组10只。其中DC-CIK组、联合治疗组裸鼠在肿瘤干细胞接种第4天后通过尾iv 1×106个DC-CIK细胞给予治疗,每周2次,共3周;山药提取物组和联合治疗组,按山药提取物125 mg/kg给药,每天ig给药1次,共3周;对照组以等体积生理盐水代替。各组裸鼠在治疗3周期间每2天测量瘤体大小及裸鼠体质量,治疗结束后处死裸鼠,取出瘤体称质量,并计算抑瘤率,RT-PCR法检测瘤组织中信号通路关键基因的表达水平。结果治疗结束后,山药提取物组、DC-CIK组、联合治疗组的瘤体质量明显低于对照组,其中,联合治疗组抑瘤率为51.26%。在信号通路关键基因的表达水平变化方面,联合治疗组与DC-CIK组、山药提取物组相比,PI3K/Akt通路中关键基因PI3KR1,Wnt/β-catenin通路中关键基因Wnt1,Notch通路中关键基因Notch1的m RNA表达均有所下调,DC-CIK组和山药提取物组相比,各基因m RNA表达变化差异不显著。结论对结肠癌HT29细胞干细胞荷瘤裸鼠模型,山药提取物联合DC-CIK抑瘤效果最佳。

槐耳联合DC-CIK对荷结肠癌HT29干细胞瘤裸鼠的体内杀伤实验研究

为了比较不同治疗方法对荷结肠癌HT29细胞干细胞瘤裸鼠的治疗效果。建立了Bal B/C裸鼠结肠癌干细胞模型,随机分为以下4组,每组8只裸鼠：空白对照组、DC-CIK组、槐耳组、槐耳联合DC-CIK组（联合治疗组）。其中DC-CIK组、联合治疗组裸鼠在肿瘤干细胞接种4 d后通过尾静脉注射1×10^6个DC-CIK细胞给予治疗,每周2次共3周;槐耳组和联合治疗组,按每60 kg体质量20 g给药,每天1次灌胃0.2 mL,共3周;对照组以等体积生理盐水代替。各组裸鼠在治疗3周期间每2d测量瘤体大小及裸鼠体重,治疗结束后处死裸鼠取出瘤体称重,观察对荷结肠癌HT29干细胞裸鼠的治疗后影响,RT-PCR法检测信号通路关键基因的表达水平。各组治疗结束后,槐耳组、DC-CIK组、联合治疗组荷结肠癌HT29干细胞裸鼠的瘤质量明显低于对照组,联合治疗组又明显低于槐耳组和DC-CIK组,其中,联合治疗组抑瘤率可达46.77%。在信号通路关键基因的表达水平变化方面,联合治疗组与DC-CIK组、槐耳组相比,PI3K/Akt通路中关键基因PI3KR1和Akt,Wnt/β-catenin通路中关键基因Wnt1,CTTNB1,Notch通路中关键基因Notch1,Notch2,Notch3的mRNA表达均有所下调。不同治疗方法对结肠癌HT29细胞干细胞瘤裸鼠治疗效果中,槐耳联合DC-CIK组效果最佳,为临床治疗结肠癌提供了新思路。

达芬奇机器人在病理学领域研究应用与进展

手术是临床上常用的一种治疗方式,随着医学技术的进步,达芬奇机器人手术逐渐出现并应用于临床。对于微创手术来说,达芬奇机器人将手术的准确性提高到一个全新的水平,在国外,它早已被广泛用于骨科、肿瘤科等疾病的治疗中,国内多家医院也已开始使用达芬奇机器人,效果良好。这一新型微创术式有可提高精确度的震颤过滤系统、操作灵活的机械腕、放大的三维立体术野等。当前不少医院逐渐将达芬奇机器人应用于外科手术治疗中。文章主要从分析达芬奇机器人的构成与特点入手,并对其在临床上的应用与进展展开综述。

CD133作为结肠癌HT29细胞系干细胞特异性生物标志的研究

目的研究CD133作为结肠癌HT29细胞系干细胞特异性生物标志的可行性,为治疗结肠癌提供新的靶点及思路。方法克隆形成试验于6孔板中按浓度梯度各接种50、100、200个经磁珠分选的CD133＋或CD133-结肠癌HT29细胞,培养2~3周至肉眼可见的细胞克隆时计数克隆数并计算克隆形成率;经磁珠分选的CD133＋或CD133-HT29细胞接种于BALB/C裸鼠侧腹部皮下,观察裸鼠成瘤情况,绘制裸鼠生长曲线。HE染色观察病理学变化。提取瘤体组织RNA,反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测CD133表达。成瘤率的比较应用Fisher’s Exact Test。结果克隆形成试验中,CD133＋HT29细胞在各接种密度下的克隆形成率分别为65.32%±3.56%、78.01%±3.79%、91.23%±4.23%;CD133-分别为20.05%±2.51%、35.19%±2.94%、44.33%±3.03%;同一接种密度下CD133＋克隆形成率明显高于CD133-,差异均有统计学意义（P〈0.05）。成瘤试验中,CD133＋HT29细胞高剂量组于第4天观察到移植瘤全部形成,HE染色呈典型结肠癌组织,RT-PCR检测到CD133表达。而等剂量的HT29 CD133-细胞至第5周仍无明显移植瘤形成。结论在结肠癌HT29细胞系中CD133可以作为鉴定肿瘤干细胞的特异性生物标志,为后续试验研究奠定基础。

靶向胃癌干细胞树突状细胞共培养细胞因子诱导的杀伤细胞治疗晚期胃癌患者的疗效观察

目的研究用胃癌干细胞(GSC)冻融抗原制备GSC-树突状细胞(DC)共培养细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)联合化疗对晚期胃癌患者的临床疗效。方法选取72例晚期胃癌患者分为联合治疗组(40例,DC-CIK生物治疗联合化疗)和对照组(32例,常规化疗)。观察两组患者治疗前后T细胞亚群变化、临床疗效。用SPSS 13.0对数据进行t检验和χ2检验。结果联合治疗组患者经过GSC-DC-CIK联合化疗方案治疗后,CD3+、CD4+、CD8+和CD56+T淋巴细胞百分比均较治疗前及对照组治疗后显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组治疗有效率为43.75%,肿瘤控制率为53.13%;联合治疗组治疗有效率为57.50%,肿瘤控制率为80.00%。两组治疗有效率的差异无统计学意义(χ2=1.346,P>0.05),肿瘤控制率的差异有统计学意义(χ2=5.906,P<0.05)。结论采用GSC-DC-CIK联合化疗方法能够提高免疫细胞功能、提高疗效,具有较强的临床推广价值。

不同方式诱导的树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞对荷结肠癌HT29细胞干细胞瘤裸鼠免疫治疗的研究

目的比较不同方式诱导的树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞(DC-CIK细胞)对荷结肠癌HT29细胞干细胞瘤裸鼠的免疫治疗效果及其安全性的研究。方法建立BALB/c裸鼠结肠癌干细胞模型,随机分为6组,每组3只裸鼠:空白对照组、DC-CIK组(D组)、HT29细胞干细胞全细胞裂解液-DC-CIK组(L-D组)、HT29细胞干细胞RNA-DCCIK组(R-D组)、DC-CIK联合化疗5-Fu组(F-D组)和化疗5-Fu组。其中D组、L-D组、R-D组和F-D组裸鼠在肿瘤干细胞接种4 d后通过尾静脉注射1×106个DC-CIK细胞给予治疗,每周2次,共3周;5-Fu组和F-D组在裸鼠给予DC-CIK治疗前1天通过尾静脉注射50 mg/kg剂量的5-Fu化疗药物,每周1次,共3周;空白对照组以等体积生理盐水代替。各组裸鼠在治疗3周期间每2天测量瘤体大小及裸鼠体重,治疗结束后处死裸鼠取出瘤体称重,绘制裸鼠生长曲线,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测蛋白磷酸化(AKt)信号通路中关键原癌基因c-Myc表达水平。结果各组治疗结束后,比较各组瘤体生长速率,L-D组<R-D组<D组<F-D组<空白对照组<5-Fu组。在裸鼠生存状态方面,L-D组、R-D组、D组始终情绪平稳,活动自如,进食进水正常;F-D组、5-Fu组精神萎靡,活动减弱,进食进水减少,空白对照组于第3周开始活动受阻,瘤体破溃。各组裸鼠瘤体中c-Myc基因与空白对照组相比均有所下调。结论 DC-CIK各组均能明显抑制肿瘤增长,其中以L-D组效果最佳,为临床治疗结肠癌提供了新思路。

结肠癌HT29细胞干细胞诱导的树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞对结肠癌干细胞的体外杀伤实验研究

目的研究结肠癌干细胞(CSC)经RNA转染或全细胞裂解诱导树突状(DC)细胞,与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养,对结肠癌HT29细胞及其CSC的杀伤作用,为结肠癌的治疗提供依据。方法提取健康人单个核细胞,培养DC和CIK细胞,用结肠癌HT29细胞干细胞的RNA转染或全细胞裂解诱导DC细胞,然后与CIK细胞共培养,形成CSC-RNA-DC-CIK、CSC-裂解物-DC-CIK以及HT29细胞RNA-DC-CIK、HT29细胞裂解物-DC-CIK,用LHD法检测其对HT29细胞及其干细胞的杀伤效果。用SPSS 18.0统计软件进行方差分析。结果 CSC-RNA-DC-CIK组、CSC-裂解物-DC-CIK组、HT29-RNA-DC-CIK组和HT29-裂解物-DC-CIK组的CIK免疫表型(CD3、CD8、CD56)和DC免疫表型(CD40、CD80、CD86、HLA-DR)成熟表达率均明显高于CIK组和DC-CIK组,差异均有统计学意义(P<0.05)。但CSCRNA-DC-CIK组、CSC-裂解物-DC-CIK组、HT29-RNA-DC-CIK组和HT29-裂解物-DC-CIK组之间,差异无统计学意义(P>0.05)。随着效靶比的增加,CIK、DC-CIK、CSC-RNA-DC-CIK、CSC-裂解物-DC-CIK、HT29-RNA-DC-CIK和HT29-裂解物-DC-CIK作为效应细胞对HT29细胞及其干细胞的杀伤作用也逐渐增强,各效靶比中,CSC-RNA-DC-CIK组、CSC-裂解物-DC-CIK组、HT29-RNA-DC-CIK组和HT29-裂解物-DC-CIK组的杀伤率高于CIK组和DC-CIK组,差异均有统计学意义(P<0.05);DC-CIK组高于CIK组,差异有统计学意义(P<0.05);但CSC-RNA-DC-CIK组、CSC-裂解物-DCCIK组、HT29-RNA-DC-CIK组和HT29-裂解物-DC-CIK组之间,差异无统计学意义(P>0.05)。结论利用CSC经RNA转染或全细胞裂解诱导DC细胞,与CIK细胞共培养,强于常规DC-CIK细胞对结肠癌HT29细胞及其CSC的杀伤作用,为今后的肿瘤患者提供了新免疫治疗的方法。

以低热、咳嗽、头痛、消瘦为主要表现的侵袭性肺曲霉菌一例

患者男性,62岁,因发热伴咳嗽、头痛、消瘦14d于2012年3月23日入院.患者于2012年3月9日受凉后出现发热,体温最高38.0℃,午后明显,伴有畏寒、全身肌肉酸痛、头痛剧烈,双侧额、颞部胀痛,鼻塞、咽痛并咳嗽,咳黄色黏液痰,无血丝及臭味,口服退热药物后,体温可降至正常,头痛可缓解.

腘窝原始神经外胚叶肿瘤一例报告

原始神经外胚叶肿瘤是一种较为罕见的高度恶性神经系统肿瘤，主要由原始神经上皮产生，具有多向分化潜能，发生于胭窝部位罕见。2012年5月我们收治1例胭窝原始神经外胚叶肿瘤，现回顾分析患者临床资料，并结合相关文献，探讨其临床特点、诊断及治疗方法。报告如下。

发热咯血胸痛胸腔积液

诊治要点： ·发热、胸痛、肺部阴影，病情进展快速，血培养为金黄色葡萄球菌，结合胸液性状及化验支持金黄色葡萄球菌所致化脓性胸膜炎。