盐霉素对胶质母细胞瘤U87细胞抑制作用的研究

目的:观察盐霉素对人胶质母细胞瘤(U87)细胞增殖、凋亡的影响,检测盐霉素对凋亡相关基因表达影响以探究对U87细胞抑制机制。方法;分别用高浓度(SH, 4 μmol/L)、低浓度盐霉素(SL, 2 μmol/L)处理U87细胞,分为空白对照组(NC组)、SH组、SL组,48小时后,通过集落形成实验观察盐霉素对U87细胞的集落形成能力的影响。通过RT-PCR检测SENP2等33个凋亡相关下调基因RNA的表达水平。结果:集落形成实验结果显示,SH和SL组均能抑制U87的增殖,且成浓度依赖性(P 【0.05)。PCR结果得到SENP2等33个凋亡相关基因表达下调。结论;盐霉素对U87细胞增殖具有明显抑制作用,并促进细胞凋亡。

IDH2野生型/突变型基因慢病毒包装及鉴定研究

目的构建异柠檬酸脱氢酶2(IDH2)野生型/突变型基因慢病毒载体。方法构建IDH2野生型、突变型质粒,采用聚合酶链反应(PCR)进行鉴定;对感染293T细胞,测定病毒滴度;对感染HEK293细胞,观察感染效率。结果PCR鉴定结果显示,2组重组质粒在1.0~2.0kb间各出现一条明显扩增带,片段大小与IDH2目的片段大小一致(1359bp)。对感染293T细胞观察发现,48h后绿色荧光的强度和范围明显增加;病毒滴度为:1.0×10^8TU/mL。感染HEK293细胞的效率在90%以上。结论IDH2野生型和突变型慢病毒构建成功,能够高效地感染细胞。