两种去污剂在制备脱细胞肺支架中的对比

背景:制备脱细胞肺支架的一个困难在于必须充分去除细胞同时尽可能保留细胞外基质。灌注去污剂-核酸酶法已被广泛应用于脱细胞支架的制备。目的:对比脱氧胆酸钠和十二烷基硫酸钠两种去污剂用于制备脱细胞肺支架的效果。方法:取出24只雄性SD大鼠肺脏,分3组,正常对照组不进行任何干预;脱氧胆酸钠组灌注去污剂脱氧胆酸钠联合核酸酶,制备脱细胞肺支架;十二烷基硫酸钠组灌注去污剂十二烷基硫酸钠联合核酸酶,制备脱细胞肺支架;取3组肺组织,进行组织学染色、免疫荧光染色及DNA含量测定。将A549细胞分别接种于两组脱细胞肺支架上培养7 d,进行苏木精-伊红染色。将两组脱细胞肺支架分别埋于SD大鼠背部皮下,2周后进行移植组织Masson染色。结果与结论:(1)正常对照组肺组织布满细胞,两脱细胞肺支架均没有残留的细胞和细胞核,但脱氧胆酸钠组肺支架内肺泡形态结构较十二烷基硫酸钠组完整;两组肺支架的DNA含量均低于正常对照组(P<0.01);(2)培养7 d,两组肺支架上的细胞均是由边缘向组织中间生长、浸润,脱氧胆酸钠组肺支架内的细胞生长、浸润速度明显优于十二烷基硫酸钠组;(3)肺支架移植2周后,十二烷基硫酸钠组肺支架与周围组织融合欠佳,边界清楚,可见大量细胞浸润,分布较均匀,血管内血细胞清晰可见;脱氧胆酸钠组肺支架内新生血管数量明显多于十二烷基硫酸钠支架,并且新生血管直径更大;(4)结果表明与十二烷基硫酸钠相比,采用去污剂脱氧胆酸钠制备的脱细胞肺支架生物相容性更好,与周围组织融合速度更快,细胞浸润和新生血管形成更明显。

基于德尔菲法构建体外膜肺氧合辅助心肺复苏临床治疗专家共识

目的初步探索建立国人体外膜肺氧合辅助心肺复苏(ECPR)临床治疗规范。方法研究国内外ECPR治疗相关文献,运用德尔菲法,设计专家调查表并进行专家咨询,使用SPSS 22.0软件统计分析调查结果。结果本研究共进行了两轮专家调查,第一轮调查咨询专家25名,专家积极系数100%,达成共识30项,主要包括ECPR的定义,部分适应证、禁忌证、ECPR过程中的监测、脱机指征及停机指征等。第二轮调查主要针对第一轮调查中存在争议的项目及部分新增专家意见,本轮调查咨询专家20名,专家积极系数100%,新达成共识16项,专家意见更为统一集中。在此基础上,对各咨询条目进行综合分析,初步建立了ECPR临床治疗规范。结论建立了初步的ECPR临床治疗规范。

iPSC外泌体载体肺血管内皮细胞及肺泡Ⅱ型上皮细胞摄入研究

目的全身炎症反应在体外循环致肺损伤过程中起关键作用。外泌体载体能否被肺脏靶细胞有效摄入是急性肺损伤(ALI)基因治疗的关键。方法超速离心法提取体外培养的iPS细胞外泌体,Western Blot鉴定其特征蛋白表达。PKH26标记的外泌体与肺微血管内皮细胞和肺泡Ⅱ型上皮细胞体外共培养,免疫荧光共聚焦技术检测靶细胞对外泌体的吸收、摄取情况。结果 iPS细胞来源的外泌体可以被肺微血管内皮细胞和肺泡Ⅱ型上皮细胞有效摄入。结论 iPS细胞外泌体可以被肺脏靶细胞有效摄入,是ALI基因治疗的理想载体。

儿童体外膜肺氧合支持下心肺复苏的回顾性研究

目的:回顾性分析了ELSO组织亚太地区1999年至2016年321例接受了E-CPR治疗的儿童患者的相关信息。探讨E-CPR与儿童院内死亡率相关的危险因素。方法:回顾分析从ELSO组织获取的1999-01至2016-12期间在亚太地区接受E-CPR治疗的年龄小于18岁的儿童患者的相关信息、基线资料、ECMO支持前辅助信息、ECMO支持期间相关信息、ECMO并发症以及临床预后等情况。

体外膜肺氧合支持的心肺复苏研究进展

体外心肺复苏（extracorporeal cardiopulmonary resuscitation，E—CPR）作为心脏骤停（CA）的辅助治疗手段正日益得到重视。进一步探索其临床应用有利于提升心肺复苏（CPR）的存活率，减少复苏后的神经系统并发症的发生。本文就E—CPR在CPR中的应用进行了综述。

亚太地区成人ECPR多中心回顾性研究

目的:通过分析国际体外生命支持组织(ELSO)亚太地区成人 ECPR 支持的登记数据,探索影响成年 ECPR 患者生存的危险因素. 方法:收集整理 2000-01 至 2016-12 ELSO 组织亚太地区成人 ECPR 支持的相关数据,建立包含患者基线资料、体外膜肺氧合(ECMO)支持前资料、诊断资料、治疗情况、临床结局、并发症等信息的数据库.根据临床结局将患者分为存活组及死亡组,并使用 SPSS24.0 软件对数据进行回顾性分析.连续变量使用均数 ± 标准差或中位数、四分位数间距;分类变量使用频数、百分率进行统计描述.根据数据特征对资料进行 t 检验、卡方检验或非参数检验,比较组间差异,并将单变量分析中 P 值 <0.1 的变量纳入 Logistic 回归分析,进一步探索影响成年 ECPR 患者生存的危险因素.

离体灌注新型去垢剂用于组织工程人工肺构建实验

目的评价一种新型去垢剂十二烷基醚硫酸钠(SLES)经主支气管途径用于制备脱细胞肺支架的效果,并自制简易生物反应器来评价种植细胞的效果,探索构建组织工程人工肺的可行性。方法取SD大鼠肺,利用Langendorff系统经主支气管灌注0.1%SLES等溶剂制备脱细胞肺支架,在支架内种植A549细胞,生物反应器内培养3 d,评价指标包括HE染色、DAPI染色、DNA含量测定。结果经主支气管途径灌注SLES可以有效的去除肺内细胞,无残留的细胞及细胞核,DNA含量去除率达到96.27%,种植A549细胞培养3 d,细胞在支架内均匀生长,DNA含量达到正常肺的64.67%。结论新型去垢剂SLES可以制备出较为理想的脱细胞肺支架,自制的生物反应器可以有效地促进种植细胞的生长。