血液病患者金葡球菌的耐药性分析

目的：了解西安地区血液病患者金黄色葡萄球菌（金葡球菌）的感染比例、β－内酰胺酶携带率、ＭＲＳＡ分离率及对多种抗生素的耐药性。方法：采用Ｋ－Ｂ法对８２株金葡球菌进行了１８种抗菌药的体外抗菌活性试验，β－内酰胺酶采用Ｏｘｏｉｄ公司生产的ｎｉｔｒｏｃｅｆｉｎ纸片测试，用每片１μｇ的苯唑西林的纸片进行ＭＲＳＡ的筛选试验。结果：血液病患者金葡球菌的感染率为１３．８％，８２株金葡球菌对去甲万古霉素、利福平、头孢哌酮、头孢他啶、妥布霉素的敏感性分别为１００％、９７．１％、８２．９２％、８０．４９％、８０％，金葡球菌对青霉素的敏感率最低为１２．１９％。在８２株金葡球菌中β－内酰胺酶的携带率为７８．２６％，ＭＲＳＡ的检出率为６５．８５％。结论：明确了血液病患者感染的金葡球菌在体外对不同抗菌药的敏感性，对指导临床选择有效抗菌药具有重要意义。

恶性血液病患者呼吸系统感染酵母样真菌的分离与鉴定

随着化疗研究的进展,恶性血液病的缓解率有了明显提高,但感染仍是恶性血液病治疗中最常见的并发症及死亡原因之一.随着大量新型广谱抗生素等药物的临床应用,致酵母样真菌的感染率逐年增加,给诊断和治疗带来一定困难.作者对360例血液病患者呼吸道分泌物中分离的105株酵母样真菌进行了分离鉴定,现将结果报道如下.

环磷酰胺、威猛、长春新碱和强的松(CVm-260P)方案治疗难治性淋巴瘤

环磷酰胺、威猛、长春新碱和强的松（ＣＶｍ┐２６０Ｐ）方案治疗难治性淋巴瘤乔庆大孙秉中杨平地杨岚袁跃传（第四军医大学西京医院血液内科西安７１００３３）关键词淋巴瘤，难治性药物治疗鬼臼毒素中图号Ｒ５５７．４难治性淋巴瘤治疗困难，疗效颇差．我们采用ＣＶｍ－...

重组人血小板生成素治疗特发性和血液肿瘤化疗后血小板减少症的Ⅲ期临床研究

目的 :评估重组人血小板生成素 (rhTPO)治疗特发性和化疗后血小板减少的临床安全性和有效性 .方法 :①病例分组 :4例非霍奇金淋巴瘤 (NHL)患者入选随机交叉对照组 ,6例巩固治疗期急性白血病患者入选非随机自身对照组 ;难治性血小板减少性紫癜 (ITP)组入选 9例患者 ;②用药方法 :rhTPO 1 μg/kg ,皮下注射 ,每日 1次 ,疗程 1 4d ;③统计分析 :病例资料采用SPSS软件统计分析 .结果 :①血液肿瘤组 :试验组rhTPO治疗后血小板数均值、最高值皆大于对照 ,两周期血小板数用药前后差值相差显著 (P <0 .0 5 ) ,试验组血小板数低于 5 0× 1 0 9/L的持续日数、恢复至 75× 1 0 9/L和 1 0 0× 1 0 9/L以上需要日数均有不同程度缩短 ;②难治性ITP组 :rhTPO治疗后患者血小板数均值渐升高 ,至 1 7d达 1 0 1× 1 0 9/L ;用药前后血小板差值为 85 .6 7× 1 0 9/L ,其中血小板数达 30× 1 0 9/L ,5 0× 1 0 9/L及 1 0 0× 1 0 9/L所需日数分别为 9.89,1 3.5 6及 1 9.78d .结论 :rhTPO对部分难治性ITP及血液肿瘤化疗所致的血小板减少有一定疗效 。

Th1/Th2细胞对再生障碍性贫血CD34^+细胞体外扩增和集落形成的影响

目的探讨Th1/Th2细胞平衡偏离及平衡回复对重型再生障碍性贫血(sAA)骨髓CD34+细胞体外扩增和集落生成的影响。方法以1例确诊的sAA患者为研究对象。(1)分离骨髓单个核细胞,用免疫磁珠法富集CD34+细胞、CD4+(Th)细胞。(2)以流式细胞术(FCM)检测CD4+细胞中Th1、Th2细胞比例。(3)扩增CD34+细胞并再次富集以获足量CD34+细胞,分为4组对照组;Th细胞作用组;Th细胞+IFN-γ作用组;Th细胞+IL-4作用组。(4)各组扩增培养10d,继以集落生成试验,测定各组CD34+细胞扩增率和集落产率。(5)患者经免疫抑制治疗后随访,用FCM监测Th1/Th2细胞比。结果(1)患者经5个月治疗获缓解。(2)缓解前、后Th1/Th2比分别是22.47和12.27,正常对照组为8.98±4.45。(3)CD34+细胞扩增率,以对照组最高,其次为Th细胞+IL-4组、Th细胞组,Th细胞+IFN-γ组的最低。(4)各组CD34+细胞集落产率与其扩增率数值平行相关,即对照组最多,其次为Th细胞+IL-4组、Th细胞组,Th细胞+IFN-γ组的最少。结论Th1细胞反应亢进直接抑制sAA患者CD34+细胞在体外的自我更新和增殖分化,IL-4能拮抗这种造血抑制效应,这可能是通过调节Th1/Th2平衡而间接实现的。

老年肺部感染患者铜绿假单胞菌血清学分型及对抗生素体外抗菌活性研究

对老年肺部感染患者呼吸道分泌物分离的６８株铜绿假单胞菌进行了分型鉴定。６８株铜绿假单菌以６、２、１１、１９和１型为主，占分型菌株的７３．５％，同时我们还进行了铜绿假胞单菌１５种抗生素的敏感性测定。老年肺部感染患者铜绿假单胞菌对悉复欢的敏感率为８６．７６％、对多粘菌素Ｂ的敏感率为８３．８％、对氨苄青霉素的耐药率最高９７．１％、对其它１１种抗生素有不同的敏感性。本结果对老年肺部感染患者铜绿假单胞菌的流行病学调查及铜绿假单胞菌感染临床治疗的药物选择具有重要意义。

老年肺部感染患者铜绿假单胞菌血清学分型及对抗生素的敏感性分析

对老年肺部感染患者呼吸道分泌物分离的６８株铜绿假单胞菌进行了分型鉴定。６８株铜绿假单胞菌以６、２、１１、１９和１型为主，占分型菌株的７３．５％，同时我们还进行了铜绿假单胞菌对１５种抗生素的敏感性测定。老年肺部感染患者铜绿假单胞菌对环丙沙星的敏感率为８６．７％，对多粘菌素Ｂ的敏感率为８３．８％，对氨苄西林的耐药率最高为９７．１％，对其它１２种抗生素有不同的敏感性。本结果对老年肺部感染患者铜绿假单胞菌的流行病学调查及临床治疗的药物选择具有重要意义。

重型再生障碍性贫血患者骨髓T细胞克隆的初步研究

目的 :建立源于重型再生障碍性贫血 (重型再障 )患者骨髓的T淋巴细胞克隆 ,以便研究该病的发病机理。方法 :用免疫分选法分别从 1名初诊重型再障患者及对照的骨髓中富集CD34+ 和CD3+ 细胞。将CD3+ 细胞作反应细胞、照射过CD34+ 细胞作刺激细胞 ,进行 14d单向自身混合淋巴细胞培养。对活细胞作有限稀释和单个细胞分孔接种 ,与含IL 2和PHA P的饲养细胞体系共培养。观察挑选细胞生长孔 ,计算接种率 ,用泊松 (Poisson)分布初步判断单个细胞分离过程成功与否。而后将阳性孔细胞作转孔培养 ,定期用饲养抚育刺激、常规用IL 2支持增殖以扩大各克隆的数量。用SABC P免疫细胞化学染色法 ,初步鉴定各克隆CD4 CD8抗原表型。结果 :自身混合淋巴细胞培养后的活细胞数 ,病例为 4× 10 3,对照为 6 5。单细胞分离接种培养后 ,对照组的细胞生长孔数为 0 ;而病例组的培养板上 ,共有 11孔发生细胞增殖 ,相应的实际接种率是 2 1% ,未超出Poisson理论接种率值范围 (<2 6 % ) ,判明平均每个增生孔的细胞克隆前体数不大于 1。这 11个克隆中 ,9个呈CD4单阳性表型 ,阳性为 98% ;2个为CD8单阳性表型 ,阳性率为 98%。结论 :从 1例重型再障患者骨髓中分离出了 11株T淋巴细胞克隆。进一步鉴定分析这些克隆的表型和特异性 。

抗凋亡基因bcl-X_L与白血病细胞耐药的相关性研究

目的：研究ｂｃｌ－ＸＬ基因高表达在白血病细胞耐药形成中的作用，观察急性髓细胞白血病病人的ｂｃｌ－ＸＬ表达与临床疗效间的相关性。方法：采用脂质体法将 ｂｃｌ－ＸＬ ｃＤＮＡ转导入ＨＬ－６０细胞；流式细胞仪定量检测凋亡细胞；ＭＴＴ法测定足叶乙甙、柔红霉素、阿霉素对转染细胞的细胞毒性； ＲＴ－ＰＣＲ法检测２０例急性髓细胞白血病病人的 ｂｃｌ－Ｘ_Ｌ表达。结果：ｂｃｌ－Ｘ_Ｌ高表达可抑制足叶乙甙诱发的凋亡，抑制率为４０．５％；降低上述化疗药物的细胞毒作用，耐药指数分别为３．２、３．２、１．６。１６／２０例急性髓细胞白血病病人ｂｃｌ－ＸＬ阳性，其中７例ｂｃｌ－ＸＬ强阳性表达，仅２例（２８．６％）获得完全缓解；９例ｂｃｌ－Ｘ_Ｌ弱阳性表达，６例（６６．７％）获得完全缓解。结论：ｂｃｌ－Ｘ_Ｌ可能作为一种新的耐药途径，通过抑制化疗药物诱发的细胞凋亡参与多药耐药的形成，可以作为预测耐药及判定预后的一种参考指标。

癌胚纤维连接蛋白mRNA在大肠癌细胞中的表达

目的 检查癌胚纤维连接蛋白在大肠癌中的表达及转化生长因子 β1对其表达的影响。方法 采用逆转录聚合酶链法扩增癌胚纤维连接蛋白 EDA、EDB和 CS1剪切区 ,并对目的片段进行酶切鉴定。结果 EDA、EDB和 CS剪切区在大肠癌细胞中表达阳性 ,EDB、 CS1表达仅局限于癌组织中 ;转化生长因子 β1可部分逆转 EDA、EDB的表达。结论 EDA、EDB和 CS在大肠癌基因诊断和治疗方面具有潜在的应用价值 ,值得进一步研究。转化生长因子β1逆转 EDA、EDB表达可能是该因子抑制大肠癌浸润与转移的机理之一。

K562细胞分泌的exosome的免疫电镜研究

目的:通过免疫电镜方法观察K562细胞分泌的 exosome,探讨其潜在的临床应用价值.方法:采用离心超滤和 蔗糖密度梯度离心等方法分离出K562细胞释放的exosome, 经透射电镜观察其超微结构.采用固相免疫电镜法(SPIEM) 制备exosome的HSP70,ICAM 1及ABL免疫电镜标本.结果: K562细胞分泌的exosome为直径50～100nm的膜性微囊结 构,圆形或椭圆形,腔内为低电子密度成分.经抗HSP70, ICAM 1和ABL抗体 胶体金免疫电镜标记,囊外膜及腔内可 见点状、颗粒状电子致密物沉积.结论:离心超滤和蔗糖密度 梯度离心法纯化小量exosome方法可行,K562细胞分泌的ex osome表达HSP70,ICAM 1和ABL蛋白,具备免疫原性.

纯红细胞再生障碍和再生障碍性贫血的免疫抑制治疗

目的观察免疫抑制剂对纯红细胞再生障碍(PRCA)、重型再生障碍性贫血(SAA)与非重型再生障碍性贫血(NSAA)的治疗作用。方法采用小剂量环孢素A(3～5mg/kg.d)治疗7例PRCA、4例SAA及4例NSAA,动态监测环孢素A的血药浓度。从外周血象的变化,来判断环孢素A的临床疗效。结果环孢素A治疗3个月后,除1例SAA外,其余14例患者的血红蛋白水平均有较大程度的提高。随着治疗时间的延长,7例SAA与NSAA的白细胞数、中性粒细胞绝对数及血小板数也呈逐渐上升趋势。结论环孢素A治疗PRCA、SAA及部分NSAA的近期效果良好。

Exosomes对L1210肿瘤细胞攻击的免疫保护作用研究

目的：观察L1210小鼠白血病细胞分泌的exosomes的抗肿瘤作用。方法：采用离心超滤和蔗糖密度梯度离心法分离L1210细胞释放的exosomes。固相免疫电镜法制备exosomes的H-2D，ICAM-1电镜标本，免疫印迹观察exosomes中HSP70的表达情况。exosomes免疫DBA／2小鼠，检测特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）活性；免疫后的小鼠以L1210肿瘤细胞攻击，观察免疫保护效果。结果：L1210细胞分泌的exosomes为直径介于50～100nm的膜性微囊，圆形或椭圆形。抗H-2D，ICAM-1抗体-胶体金免疫电镜标记，囊外膜可见点状、颗粒状电子致密物沉积。通过免疫印迹证明其表达HSP70。Exosomes免疫小鼠，可诱导产生针对L1210细胞的CTL反应；L1210的exosomes（2．5及5扯g）免疫小鼠后，接种L1210肿瘤细胞，有明显的抵抗肿瘤生长作用。结论：L1210分泌的exosomes在同基因小鼠模型中可产生较强的保护性免疫力，exosomes疫苗可作为白血病等恶性肿瘤免疫治疗的候选疫苗。

前列腺素E脂质微球联合小剂量肝素及丹参预防60例异基因造血干细胞移植后肝静脉闭塞病

目的：探讨前列腺素E脂质微球联合小剂量肝素及复方丹参预防肝静脉闭塞病（VOD）的效果。方法：59例急、慢性白血病患者及1例T细胞淋巴瘤患者接受移植治疗。移植患者中3例曾有乙型肝炎病史,1例有轻度脂肪肝病史。移植前所有患者肝功能均正常。采用CyTBI加Ara-C/VP-16或改良BuCy2方案预处理。VOD预防方案：移植前8d至移植后28d,采用前列腺素E脂质微球（凯时）30-40μg/d联合小剂量肝素（100U/kg·d^-1）及复方丹参30-40ml/d,发生VOD后继续上述治疗,加用去纤苷10mg/kg·d^-1。结果：59例均获得植入,1例植入失败。2例出现重症VOD,其中1例为接受单倍型半相合外周血干细胞移植的复发ALL患者,1例患者有轻度脂肪肝,接受非血缘外周血干细胞移植。2例均采用较强的清髓性预处理方案,最终死于多脏器功能衰竭。结论：本研究采用的VOD预防方案,VOD发生率低于文献报道,提示前列腺素E脂质微球联合小剂量肝素及复方丹参方案对预防VOD的发生可能有一定效果。

异基因造血干细胞移植治疗白血病的临床研究

目的 :探讨异基因造血干细胞移植治疗白血病的疗效及主要并发症的处理。方法 :30例 5～ 5 0岁白血病患者 ,其中 2 5例接受HLA完全相合、2例接受 1～ 2个HLA主要位点不合同胞供者的外周血干细胞移植。2例接受HLA全相合的非血缘供者骨髓移植。 1例接受 1个HLA主要位点不合的非血缘脐带血移植。采用改良的环磷酰胺联合全身放疗 (CYTBI)或白消安环磷酰胺 (BUCY2 )方案预处理。采用环孢素A(CsA)联合短程甲氨蝶呤 (MTX)方案预防移植物抗宿主病 (GVHD) ,3例非血缘供者及HLA不全相合移植加用抗人胸腺细胞蛋白(ATG)、霉酚酸酯 (MMF)及抗CD2 5人鼠嵌合抗体。结果 :30例均获得植入 ,2例无关供者移植出现继发性植入失败。 13% (4/ 30 )出现Ⅰ～Ⅳ度急性GVHD ,2 6 .6 % (8/ 30 )出现慢性GVHD。并发间质性肺炎 2例。重症 (Ⅳ度 )出血性膀胱炎 1例。纯红细胞性再生障碍性贫血 1例。随访 2～ 34个月 ,现存活 2 1例 ,8例死于白血病复发 ,1例死于CMV相关的间质性肺炎。结论 :异基因造血干细胞移植是治疗白血病的有效方法 ,但移植前处于高危难治状态的病例复发率仍较高。

应用多种教学手段提高实验诊断学教学效果

应用多种现代化的教学手段,旨在通过丰富多彩的教学形式,使学生在有限的时间内,轻松愉快地掌握所学内容,提高学习效率.

如何讲好内科学

内科学是一门重要的临床课,本文从多年临床内科学教学实践出发,浅谈在如何提高内科学授课效果方面的几点体会.