Humanin通过JNK途径减轻Aβ_(31-35)诱导的皮层神经元的凋亡

目的研究JNK信号通路在Aβ31-35诱导神经元凋亡中的作用以及Humanin(HN)的神经保护机制。方法原代培养大鼠皮层神经元随机分为对照组、Aβ31-35组(1h,4h,8h,16h,24h)、抑制剂SP600125组、HN预处理组。应用流式细胞术观察各组神经元凋亡率,应用免疫细胞化学法观察各组磷酸化c-Jun(p-c-Jun)和FasL蛋白表达情况。结果对照组仅有少数神经元发生凋亡;Aβ31-35诱导培养皮层神经元异常凋亡;JNK抑制剂SP600125抑制了Aβ31-35诱导的神经元凋亡;HN(20μmol/L)16h预孵育部分抑制了Aβ31-35的致凋亡作用,各组神经元凋亡率分别为7.43%,32.6%(24h),8.8%,20.36%。对照组仅有少量p-c-Jun及FasL蛋白的表达;Aβ31-35时间依赖性诱导了p-c-Jun、FasL蛋白的表达;SP600125抑制了Aβ31-35诱导的p-c-Jun、FasL蛋白的表达;20μmol/LHN16h预孵育部分抑制了p-c-Jun及FasL蛋白的表达。结论JNK通路可能参与了Aβ31-35诱导的神经元凋亡过程;HN可在一定程度上阻抑JNK信号通路,减轻Aβ31-35诱导的神经元凋亡。

Humanin通过内源性途径抑制Aβ_(31-35)诱导的神经元凋亡(英文)

为了探讨Humanin(HN)对Aβ31-35诱导的培养皮层神经元凋亡的影响,本研究采用不同浓度(5、10、20μmol/L)的HN预孵育体外培养的皮层神经元不同时间(0、8、16h),加入Aβ31-35(25μmol/L)24h后,应用电子显微镜观察神经元的凋亡情况;流式细胞术、TUNEL法检测神经元的凋亡率;酶标仪检测caspase活性;Westernblot检测Bax蛋白的表达。结果显示:HN(20μmol/L)预孵育16h明显抑制了Aβ31-35诱导的神经元凋亡;HN降低了Aβ31-35诱导的caspase-3、9活性的升高;HN抑制了Aβ31-35诱导的Bax从胞浆到线粒体的转位。以上结果提示,HN通过阻断内源性凋亡途径抑制Aβ31-35诱导的神经元凋亡。

JNK激活的外源性凋亡途径介导Aβ_(31-35)诱导的神经元凋亡(英文)

目的探讨JNK信号通路在Aβ31-35诱导的神经元凋亡过程中的作用。方法经老化处理的Aβ31-35(终浓度为25μmol/L)制备AD细胞模型,采用生物比色法检测caspase-3和caspase-8的活性。采用免疫细胞化学技术观察不同时间点磷酸化c-Jun(p-c-Jun)及Fas ligand(FasL)蛋白的表达情况,并用IPP11.0图像分析软件进行定量分析。结果Aβ31-35孵育24h能显著提高神经元内caspase-3和caspase-8的活性。Aβ31-35孵育4h时p-c-Jun蛋白表达水平开始升高,在8h升高最显著,呈现一定的时间依赖性;JNK特异性抑制剂SP600125能抑制Aβ31-35对p-c-Jun蛋白表达的诱导作用。Aβ31-35孵育8h时出现FasL蛋白表达的升高,而SP600125则能抑制这一作用。结论JNK激活的外源性凋亡途径在Aβ31-35诱导的神经元凋亡过程中发挥一定的作用。